无醇啤酒中乙醇浓度检测方案(气相色谱仪)

SSL-CA22-016Excellence in Science Excellence in ScienceGC-196 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.- Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cn Tel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn 气相色谱法测定啤酒中的乙醇浓度 GC-196 摘要：本文参考 GB 5009.225《食品安全国家标准酒和食用酒精中乙醇浓度的测定》 (征求意见稿)相关条件，采用岛津GC-2010 Pro气相色谱仪建立了测定无醇啤酒中乙醇浓度的分析方法，实验结果显示：在0.02~2%(vol)的浓度范围内，相关系数为0.9993；低、中、高浓度的标准品溶液重复分别进样6次，乙醇峰面积与内标峰面积比的 RSD% 均小于4%，表明仪器精密度良好；该方法中乙醇的检出限为 0.001%(vol)。结果表明，该方法操作简单、灵敏度高，可用于无醇啤酒中乙醇浓度的测定。 关键词：气相色谱法无醇啤酒乙醇 酒精度测定一直是酒类食品安全的一个指标，酒精度的测定有各种方法，包括气相色谱法，酒精计法，密度瓶法等等。 调查显示，年轻人对于正常普通啤酒的需求在逐步减少，更倾向于低酒精度的饮品，各大生产厂家为吸引年轻消费群体，推出了无醇啤酒。为保证食品安全，国家标准 GB 5009.225-2016 也随之开始修订。 GB 5009.225食品安全国家标准酒和食用酒精中 乙醇浓度的测定(征求意见稿)于2021年九月公布，其中测试方法的适用范围进行了调整，第三法气相色谱法从适用于葡萄酒，果酒及啤酒变更为适用于无醇啤酒。 本文参考 GB 5009.225《食品安全国家标准酒和食用酒精中乙醇浓度的测定》(征求意见稿)相关条件，采用岛津 GC-2010 Pro 气相色谱仪建立了测定无醇啤酒中乙醇浓度的分析方法，该方法操作简单、灵敏度高，重复性好，可用于无醇啤酒中乙醇浓度的测定。 1.1仪器 仪器： GC-2010 Pro 气相色谱仪 1.2分析条件 色谱条件： 色谱柱： InertCap wax， (60 m×0.25 mm×0.25 um) 柱流速：1.0 mL/min 柱温程序：40℃(5min))_3℃/min_55℃_10℃/min_150℃_ 进 样口温度：200℃ 40℃/min _220℃ (5min) 进样方式：分流进样 FID 温度：250℃ 分流比：50：1 进样体积：0.5uL 1.3标准溶液配制 乙醇标准系列工作液：取7个100mL容量瓶，分别吸入0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1和2mL乙醇，用水定容至刻度，混匀，制得乙醇标准系列工作液，浓度为0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0和2.0%(vol)。临用现配。 正丁醇内标工作液：取1个100mL容量瓶，吸入10mL正丁醇，用水定容至刻度，混匀。临用现配。 1.4样品前处理 图1样品前处理流程图 结果讨论 2.1标准溶液色谱图 标准溶液色谱图见图2，相关化合物信见表1。 图2 色谱图(乙醇浓度为 0.5%(vol)) 表1化合物信息 No. 化合物 英文名称 CAS号 保留时间 (min) 1 乙醇 Ethanol 64-17-5 9.332 2 正丁醇(内标) 1-Butanol 71-36-3 15.384 2.2标准曲线 分别取乙醇标准系列工作液10 mL于不同的容量瓶中，各加0.5 mL 正丁醇内标工作液，混匀后，分别取1mL 于自动进样小瓶中，上机分析。以峰面积比为纵坐标，浓度比为横坐标，绘制标准曲线，并以最低点浓度的3倍信噪比计算方法检测限，目标化合物标准曲线如图3所示，标准曲线线性范围和相关系数如表2所示。 图3乙醇标准曲线 表2 浓度范围、相关系数和方法检出限 No. 化合物 浓度范围(%(vol)) 相关系数 检测则(%(vol)) 1 乙醇 0.02~2 0.9993 0.001 2.3重复性 按照1.3分析条件，取低、中、高三个浓度水平标准溶液，重复进样6次，考察仪器重复性，测定结果见表3。从表3结果可以看出，在不同浓度下乙醇与正丁醇的峰面积比的 RSD% 均小于4%，表明 GC-2010 Pro 气相色谱仪具有良好的重复性。 表3 标样峰面积比重复性结果(n=6) 标样浓度 0.05% (vol) 0.2%(vol) 2% (vol) 面积比 RSD% 3.88 0.22 0.17 2.4加标回收实验 对两个不同品牌的啤酒样品中的乙醇浓度进行测定，2#样品谱图结果如下图4所示。结果列于下表4。 图4 #2无醇啤酒样品图谱 表4 啤酒样品中乙醇浓度(%(vol)) 啤酒样品 乙醇浓度 #1(无醇啤酒) N.D. #2(无醇啤酒) 0.01 注：N.D.为未检出。 以#1样品为空白样品，添加标准溶液，添加浓度0.05、0.1和2.0% (vol)三个浓度，考察加标回收情况。实验结果表明各组分的加标回收率在 92.7%~101.3%之间，结果如下图表5所示。 表5样品三个浓度加标回收率结果 化合物 0.05%(vol) 0.1%(vol) 2.0% (vol) 平均回收率% 平均回收率% 平均回收率% 99.5 101.2 96.3 乙醇 94.8 101.7 96.7 95.1 99.9 96.1 RSD% 2.73 0.92 0.32 结论 本方法参考 GB 5009.225《食品安全国家标准酒和食用酒精中乙醇浓度的测定》(征求意见稿)相关条件，采用岛津 GC-2010 Pro 气相色谱仪建立了测定无醇啤酒中乙醇浓度的分析方法，实验结果显示：在0.02~2%(vol)的浓度范围内，相关系数均为 0.9993；低、中、高浓度的标准品溶液重复分别进样6次，乙醇峰面积与内标峰面积比的 RSD% 均小于4.0%，表明仪器精密度良好；该方法中乙醇的检出限为 0.001%(vol)。实验结果表明该方法操作简单、灵敏度高、重复性好，可用于无醇啤酒中乙醇浓度的测定。 岛津应用云 本方法参考GB 5009.225《食品安全国家标准 酒和食用酒精中乙醇浓度的测定》（征求意见稿）相关条件，采用岛津GC-2010 Pro气相色谱仪建立了测定无醇啤酒中乙醇浓度的分析方法，实验结果显示：在0.02~2% (vol)的浓度范围内，相关系数均为0.9993；低、中、高浓度的标准品溶液重复分别进样6次，乙醇峰面积与内标峰面积比的RSD%均小于4.0%，表明仪器精密度良好；该方法中乙醇的检出限为0.001% (vol)。实验结果表明该方法操作简单、灵敏度高、重复性好，可用于无醇啤酒中乙醇浓度的测定。