蜂蜜中营养成分检测

还原糖是指具有还原性的糖类，能够还原斐林(H.von Fehling)试剂(本尼迪特试剂）或托伦斯(B.Tollens)试剂。在糖类中，分子中含有游离醛基或酮基的单糖和含有游离醛基的二糖都具有还原性。还原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。 我们采用高锰酸钾电位滴定法测定蜂蜜中还原糖的含量，操作方便、准确度高，可作为有效测定方法。

蜂蜜具有较高的营养价值和药用价值，广泛应用于食品和药品中。其中，蜂蜜中的糖类物质含量较高，超过 60%，为其主要成分。食品安全国家标准 GB 14963-2011 中规定了蜂蜜中糖类的含量指标要求及其检验方法。本实验室按照 GB14963-2011 要求，采用液相色谱-蒸发光散射法（HPLC-ELSD）实现了蜂蜜中糖类含量的测定。

采用EasySep ®-1020 液相色谱系统，配备通微ELSD 检测器，精密吸取标准品溶液10μL，进液相色谱测定，重复进样5 次，计算得保留时间RSD≤0.5%、峰面积RSD≤2.0%，方法的定量重复性良好。

测定蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖 适用于该项目的国标有GB/T 22221-2008和GB/T18932.22-2003, 实验室没有GB/T18932.22-2003标准中规定的色谱柱，而GB/T 22221-2008标准中规定的条件都能满足，就先按照GB/T 22221-2008标准的方法进行样品前处理和仪器分析。

中国药典2020版一部推荐用Prevail Carbohydrate ES（5μm，250 x 4.6mm）色谱柱进行蜂蜜含量测定。

利用离子色谱脉冲安培检测器对蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖的测定方法进行了研究。采用CARBOPAC PA1分离柱和脉冲安培检测器，对淋洗分离条件进行了实验，选择50mmol/LNaOH作淋洗液，可使蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖很好的分离。检出限分别为：葡萄糖2µg/kg，果糖2µg/kg，蔗糖5µg/kg。加标回收率为90％～108％。该方法只需简单的前处理，无基体干扰，分离效果好，测定准确度高，适用于蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖的测定。

为满足对蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定，依利特公司，结合 GB 5009.8-2016《食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定》及《中 国药典》2015 版第一部相关标准，采用示差折光检测器，经氨基色谱柱分离，根据保留时 间定性和峰面积定量，提出了蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定的全套 HPLC 解决方案，包括前处理设备、试剂、前处理方法直至到液相色谱方法。相关人员可参考本实 验中的方法，进行蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的检测。

蔗糖，即食糖，双糖的一种，由一分子葡萄糖的半缩醛羟基与一分子果糖的半缩醛羟基彼此缩合脱水而成。蔗糖有甜味，无气味，易溶于水和甘油，微溶于醇。相对密度1.587（25℃）。有旋光性，但无变旋光作用。蔗糖几乎普遍存在于植物界的叶、花、茎、种子及果实中。在甘蔗、甜菜及槭树汁中含量尤为丰富。蔗糖味甜，是重要的食品和甜味调味品。分为白砂糖、赤砂糖、绵白糖、冰糖、粗糖（黄糖）

利用离子色谱脉冲安培检测器对蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖的测定方法进行了研究。采用CARBOPAC PA1分离柱和脉冲安培检测器，对淋洗分离条件进行了实验，选择50mmol/LNaOH作淋洗液，可使蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖很好的分离。检出限分别为：葡萄糖2µg/kg，果糖2µg/kg，蔗糖5µg/kg。加标回收率为90％～108％。该方法只需简单的前处理，无基体干扰，分离效果好，测定准确度高，适用于蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖的测定。

利用离子色谱脉冲安培检测器对蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖的测定方法进行了研究。采用CARBOPAC PA1分离柱和脉冲安培检测器，对淋洗分离条件进行了实验，选择50mmol/LNaOH作淋洗液，可使蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖很好的分离。检出限分别为：葡萄糖2µg/kg，果糖2µg/kg，蔗糖5µg/kg。加标回收率为90％～108％。该方法只需简单的前处理，无基体干扰，分离效果好，测定准确度高，适用于蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖的测定。

果糖中含6个碳原子，也是一种单糖，是葡萄糖的同分异构体，它以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中，果糖还能与葡萄糖结合生成蔗糖。 纯净的果糖为无色晶体，熔点为103～105℃,它不易结晶，通常为黏稠性液体，易溶于水、乙醇和乙醚。D-果糖是最甜的单糖。

葡萄糖（Glucose）（化学式C6H12O6）是自然界分布最广且最为重要的一种单糖，它是一种多羟基醛。纯净的葡萄糖为无色晶体，有甜味但甜味不如蔗糖（一般人无法尝到甜味），易溶于水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。天然葡萄糖水溶液旋光向右，故属于“右旋糖”。

摘要： 目前蜂蜜样品常规检测项目仅限于食品添加剂、农残等对人体胡明显危害成分，对蜜源搀杂、搀假没有强制检测。假蜂蜜几乎没有营养价值可言，而且糖尿病、龋齿、心血管病患者喝了还可能加重病情。常见的假蜜成分有：糖浆，砂糖，转化糖，异构化糖等等，常见的假蜜源作物有大米，麦子，甘蔗，甜菜，玉米，西米等等。目前国际上广泛采用碳同位素法、TLC法、HPLC法等做为假蜜搀杂鉴定的检测手段。其中薄层色谱法具有操作简单，成本低廉的优点而逐步普及；液相色谱法具有重现性好、灵敏度高，检出限低等特点，是假蜜检测的发展方向。

利用离子色谱脉冲安培检测器对蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖的测定方法进行了研究。采用CARBOPAC PA1分离柱和脉冲安培检测器，对淋洗分离条件进行了实验，选择50mmol/LNaOH作淋洗液，可使蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖很好的分离。检出限分别为：葡萄糖2µg/kg，果糖2µg/kg，蔗糖5µg/kg。加标回收率为90％～108％。该方法只需简单的前处理，无基体干扰，分离效果好，测定准确度高，适用于蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖的测定。

蜂蜜糖分掺假鉴定的参考方法是利用EA-IRMS测定蜂蜜糖分和蛋白质的δ13C同位素值的差异（AOAC 998.12），改方法的原理是C3植物（例如为蜜蜂提供来源的花蜜）和C4植物（例如生产转化糖浆的玉米和甘蔗）不同光合作用路径造成的13C同位素代谢富集的差异，这种方法对于C4糖分添加超过7%时非常灵敏。通过液相色谱结合稳定碳同位素比质谱(LC-IRMS)测定蜂蜜中果糖、葡萄糖和高糖的δ13C值，可以检测出蜂蜜中是否掺杂了来自C3植物如甜菜和水稻的糖浆以及C4植物糖。

使用岛津全谱型电感耦合等离子体发射光谱仪ICPE-9000。样品经酸消解，进行定量分析。本文详细介绍分析方法。

羟甲基糠醛（HMF）的含量是蜂蜜质量的一个关键指标。在这篇应用文献中，将使用LAMBDA™ 465 UV/Vis分光光度计和UV Lab™软件中的方程计算模式测定HMF的含量。UV Lab软件中方程计算模式使得HMF含量测定更加简单快速。使用LAMBDA 465可以更加快速地收集到从190nm到1100nm全波段范围内的数据。

傅里叶变换近红外光谱法（FT-NIR）提供了一种快速、准确度高的测试方法，可以进行蜂蜜中掺杂物的检测。为了优化该技术的有效性，对不同的数据模型方法进行了测试。

本文使用岛津LC-30A液相色谱仪建立了自动柱前衍生法同时测定蜂蜜中的十几种氨基酸。以邻苯二甲醛(OPA)为柱前衍生剂，使用C18柱，乙腈/甲醇和0.05 mol/L的醋酸钠(pH 6.5)为流动相，荧光检测器的激发波长为330 nm，发射波长为440 nm。各氨基酸标准曲线的线性相关系数在0.9974至1.0000之间，保留时间的RSD %在0.02 %-0.06 %之间，峰面积的RSD %在0.73 %-6.44 %之间，结果的重现性良好。0.5 μmol/L的氨基酸标准溶液的信噪比S/N的平均值在2201-126824之间，具有很高的检测灵敏度。此方法省去了繁琐的前处理步骤，每个样品的总分析时间仅需1小时。

目前蜂蜜样品常规检测项目仅限于食品添加剂、农残等对人体胡明显危害成分，对蜜源搀杂、搀假没有强制检测。假蜂蜜几乎没有营养价值可言，而且糖尿病、龋齿、心血管病患者喝了还可能加重病情。常见的假蜜成分有：糖浆，砂糖，转化糖，异构化糖等等，常见的假蜜源作物有大米，麦子，甘蔗，甜菜，玉米，西米等等。目前国际上广泛采用碳同位素法、TLC法、HPLC法等做为假蜜搀杂鉴定的检测手段。其中薄层色谱法具有操作简单，成本低廉的优点而逐步普及；液相色谱法具有重现性好、灵敏度高，检出限低等特点，是假蜜检测的发展方向。

应用DA7200近红外光谱技术对蜂蜜、荞麦、食用油等样品进行品质鉴别分析。通过对上述食品近红外光谱的主成分分析（PCR），可快速判别蜂蜜、荞麦、芝麻油等样品的掺杂。

目前蜂蜜样品常规检测项目仅限于食品添加剂、农残等对人体胡明显危害成分，对蜜源搀杂、搀假没有强制检测。假蜂蜜几乎没有营养价值可言，而且糖尿病、龋齿、心血管病患者喝了还可能加重病情。常见的假蜜成分有：糖浆，砂糖，转化糖，异构化糖等等，常见的假蜜源作物有大米，麦子，甘蔗，甜菜，玉米，西米等等。目前国际上广泛采用碳同位素法、TLC法、HPLC法等做为假蜜搀杂鉴定的检测手段。其中薄层色谱法具有操作简单，成本低廉的优点而逐步普及；液相色谱法具有重现性好、灵敏度高，检出限低等特点，是假蜜检测的发展方向。

本次参考中国药典二部2020年版，采用高效液相色谱法(HPLC)，选用纳谱分析ChromCore NH2色谱柱对蜂蜜进行检测，各峰峰形良好且具有良好的分离度，该方法操作简单，灵敏度高，重复性好，符合药典要求，可用于蜂蜜的测定，为该药物的质量保证提供检测依据。

蜂蜜具有较高的营养价值和药用价值，广泛应用于食品和药品中。其中，蜂蜜中的糖类物质含量较高，超过60%，为其主要成分。食品安全国家标准GB 14963-2011中规定了蜂蜜中糖类的含量指标要求及其检验方法。本实验室按照GB14963-2011要求，采用液相色谱-蒸发光散射法（HPLC-ELSD）实现了蜂蜜中糖类含量的测定。

冬蜜指的是在冬季收获的蜂蜜，因蜜源地不同，冬蜜的主要花种也不尽相同，但是以百花蜜为好。冬季收获的百花蜜颜色一般要比其他季节的要深，含有的矿物质较多，营养成分较全。

方法：HPLC 基质：蜂蜜102394 化合物：果糖、 葡萄糖 、蔗糖、麦芽糖 色谱柱：APS-Amino(氨基) 5m 250 x 4.6mm

参照2015版《中国药典》第二部，采用东曹氨基柱TSKgel NH2-100（4.6 mm I.D.×150 mm,3 μm）对蜂蜜中四种糖类化合物进行分析，实验结果表明，TSKgel NH2-100对果糖和葡萄糖的分离度完全满足药典要求，果糖的柱效大于药典规定的要求（≥2000）。

屡见不鲜的蜂蜜掺假现象对养蜂行业产生了巨大的冲击，制约了蜂蜜市场的健康发展。近年来越来越多的养蜂者为加快蜂蜜生产进度，不等自然封盖即进行频繁摇蜜，产出的未成熟蜂蜜经后续浓缩、脱水等步骤，使蜂蜜的水分、糖含量达到标准规定。尽管此类浓缩蜂蜜的各项基础理化指标与天然成熟蜂蜜无异，但蜂蜜中的微量物质及其具有的生物学活性却可能受到很大影响。为探究未成熟蜂蜜与自然成熟蜂蜜间的差异，本研究以我国最具代表性的油菜（Brassica napus L.）意蜂（Apis Mellifera L.）蜂蜜为研究对象，对比研究了封盖成熟油菜蜂蜜与未封盖不成熟油菜蜂蜜的化学组成以及生物学活性。主要研究结果如下：1、采用国标中规定的方法检测了两种油菜蜂蜜中的水分、糖、酸度、糠醛值、淀粉酶值等基础理化指标。结果表明，封盖成熟油菜蜂蜜的各项理化参数均符合标准规定，而未封盖油菜蜂蜜除羟甲基糠醛值符合标准规定外，其余各项指标均不达标。2、通过超高效液相色谱-四极杆串联质谱技术对蜂蜜提取物中的小分子物质进行采集分析，并结合代谢组学数据分析技术进行非靶向分析。经主成分判别分析两类蜂蜜可以实现有效区分。差异性分析结果表明，未成熟油菜蜂蜜中有机酸、糖苷、植物碱等物质含量较多，而成熟蜂蜜中酚类物质含量较高。3、对油菜蜂蜜中常见的多酚类物质进行靶向代谢组学分析，两种蜂蜜中共检出20 种多酚类物质，其中山奈酚、芹菜素、松属素、3, 4-二甲氧基肉桂酸、白杨素、咖啡酸苯乙酯在未成熟油菜蜂蜜中的含量低于检测限，除香草酸、丁香酸外，其余12 种酚类物质含量均低于成熟油菜蜂蜜。4、DPPH、ABTS+·自由基清除能力、铁还原能力测定结果表明，成熟油菜蜂蜜相较未成熟油菜蜂蜜体外抗氧化能力更强；抑菌实验结果表明，两种蜂蜜对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠杆菌（Escherichia coli）均有抑制效果，且成熟油菜蜂蜜的抑菌效果更为明显，但两种蜂蜜对枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）均无抑制作用。5、建立过氧化氢诱导小鼠L929 成纤维细胞氧化应激模型，探索两种蜂蜜对H2O2 诱导的细胞氧化应激损伤的保护作用。成熟油菜蜂蜜提取物在浓度为300 μg/mL 时即可显著提升H2O2 诱导的受损细胞的生长活力，而未成熟油菜蜂蜜提取物在浓度为600 μg/mL 时才表现出上述效果；两种蜂蜜提取物均可在一定程度上上调细胞相关抗氧化基因的表达，但成熟油菜蜂蜜提取物对氧化应激受损细胞中抗氧化基因调节作用更为明显。本研究结果表明，成熟油菜蜜具有更丰富的多酚类化合物和更好的生物学活性，这也为成熟蜂蜜的质量标准和评判依据奠定了理论基础。

蜂蜜检测仪产品介绍： 检测项目：蜂蜜蔗糖、蜂蜜还原糖（葡萄糖和果糖）、蜂蜜羟甲基糠醛、蜂蜜酸度、蜂蜜中农药残留、蜂蜜淀粉酶值、蜂蜜中脯氨酸、蜂蜜水分、蜂蜜糖分、蜂蜜中重金属（铅、镉、汞）、蜂蜜中抗生素（氯霉素、四环素、磺胺类、呋喃类、喹诺酮类）、蜂蜜中灰分，应用范围：应用于现场检测蜂蜜蔗糖、葡萄糖和果糖、羟甲基糠醛、酸度、农残、淀粉酶、脯氨酸、水分、糖分、重金属、抗生素、灰分含量的蜂蜜快速检测仪，可广泛应用于各类蜂蜜品质的快速定量检测。

使用岛津全谱型电感耦合等离子体发射光谱仪ICPE-9000。样品经酸消解，进行定量分析。本文详细介绍分析方法。