血浆中氟胺酮、新精神活性物质检测方案(液质联用仪)

SSL-CA20-678Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-586 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. -Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cn Tel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn LCMSMS 测定血浆中的氟胺酮含量 LCMSMS-586 摘要：本文使用岛津液相色谱-三重四极杆质谱联用仪，建立了血浆中新精神活性物质氟胺酮的分析方法。血浆样品以甲醇进行蛋白沉淀处理后，进样分析。结果表明：氟结酮的定量限低于 0.02 ng/mL； 在0.02-5Cng/mL的线性范围内，外标法建立校准曲线，各校准点浓度准确度分别在 88.6-112.9%之间，R为0.9972；残留考察结果表明 ULOQ 加标样品进样后无明显系统残留；对不同浓度的标准样品分别连续分析6次，保留时间 RSD 均不高于0.35%，峰面积RSD均不高于4.87%；空白样品添加不同浓度氟胺酮后进行处理，回收率在87.6~93.0%。该方法快速简单，灵敏度和准确度高，适合血浆中的氟胺酮检测。 关键词：LCMSMS血浆氟胺酮新精神活性物质 氟胺酮，英文名为 F-ketamine，与氯胺酮同属苯环已哌啶类物质，是一种新型苯环己哌啶衍生药物。近些年来，作为氯胺酮的替代物，已开始在市场上频繁出现。氟胺酮具有与氯胺酮类似的镇静作用，长期使用具有成瘾性。吸食毒品，会造成吸食者出现幻觉和思维障碍，甚至丧失人伦道德，对社会危害极大。 2021年5月11日，公安部、国家卫生健康委员会和国家药品监督管理局联合发布《关于将合成大麻 素类物质和氟胺酮等18种物质列入的公告》，决定正式整类列管合成大麻素类新精神活性物质，并新增列管氟胺酮等18种新精神活性物质，自2021年7月1日起施行。 本文使用岛津液相色谱-三重四极杆质谱联用仪，建立了血浆中氟胺酮的分析方法。该方法快速简单，灵敏度和准确度高，适合血浆中氟胺酮含量的检测。 实验部分 1.1仪器 本实验采用岛津液相色谱 Nexera LC-40B X3与三重四极杆质谱仪 LCMS-8045 联用系统。具体配置为： 系统控制器： CBM-40自动进样器：SIL-40C X3输液泵：LC-40BX3质谱仪： LCMS-8045 柱温箱： CTO-40S 色谱工作站： LabSolutions Ver. 5.99 SP2 1.2分析条件 液相色谱条件： 色谱柱： Shim-pack Velox SP-C18，100 mm×2.1 mm l.D.， 2.7um(岛津(上海)实验器材有限公司，P/N：227-32003-03) 流动相：A-0.1%甲酸水溶液；B-乙腈 柱温：30℃ 流速：0.40mL/min 进样量：1uL 洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为15% 表1 梯度洗脱程序 Time(min) Module Command Value 4.00 Pumps Pump B Conc. 95 6.00 Pumps Pump B Conc. 95 6.50 Pumps PumpB Conc. 15 8.00 Controller Stop 质谱条件： 分析仪器：LCMS-8045加热模块温度：300℃离子源： ESI*DL温度：250℃雾化气流速：3.0L/min离子源温度：400℃加热气流速：10.0 L/min扫描模式：多反应监测(MRM)干燥气流速：10.0L/minMRM参数：见表2 表2MMRM 参数 序号 化合物名称 前体离子 产物离子 Q1 Pre Bias(V) CE Q3 Pre Bias (V) 1 氟胺酮 222.20 109.10* -11.0 -27.0 -10.0 191.15 -17.0 -12.0 -19.0 *定量离子对 1.3样品前处理 精确量取100uL血浆，加入1.5mL 离心管中，加入900 uL甲醇，涡旋 2 min， 12000 r/min 离心 5 min，上清液以有机相滤膜过滤后待测。 结果讨论 2.1专属性和灵敏度 空白样品和0.02 ng/mL标准样品的 MRM 色谱图如图2所示，空白样品无干扰，以S/N=10对应浓度为定量限，推算氟胺酮仪器定量限低于 0.02 ng/mL. Area 图1空白样品和0.02 ng/mL标准样品 MRM 色谱图 图2校准曲线 2.2校准曲线 10 ug/mL 氟胺酮标准溶液，以90%甲醇逐级稀释得浓度分别为0.02、0.05、0.1、0.5、1、5、10、50 ng/mL 的标准溶液，外标法建立校准曲线如图2所所。 2.3残留考察 ULOQ加标样品进样后，空白样品进样分析所得色谱图(绿线)如图3所示，氟胺酮保留时间处无明显色谱峰。 图3残留考察 2.4重复性考察 对不同浓度的标准样品分别连续分析6次，计算保留时间和峰面积的RSD.结果见表3，保留时间 RSD 均不高于0.35%，峰面积 RSD 均不高于 4.87%. 表3保留时间和面积 RSD (n=6) 名称 进样浓度 (ng/mL) 保留时间 RSD(%) 峰面积 RSD)( (%) 0.1 0.35 4.87 氟胺酮 1 0.22 2.49 标准溶液 10 0.12 0.65 2.5回收率考察 空白样品中添加不同浓度的氟胺酮后进行前处理，上机测定，考察回收率，不同浓度加标样品回收率在87.6~93.0% 之间。 表4回收率 No. 样品名称 检测值 加标浓度 (ng/mL) 加标测定值 (ng/mL) 回收率 (%) 1 血浆 N.D. 2 加标1 0.1 0.093 93.0 3 加标2 1 0.876 87.6 4 加标3 一 10 8.890 88.9 注：N.D.代表未检出 I结结论 本文使用岛津液相色谱-三重四极杆质谱联用仪，建立了血浆中氟胺酮的分析方法。该方法快速简单，灵敏度和准确度高，适合血浆中氟胺酮含量的检测。 岛津应用云 本文使用岛津液相色谱-三重四极杆质谱联用仪，建立了血浆中氟胺酮的分析方法。该方法快速简单，灵敏度和准确度高，适合血浆中氟胺酮含量的检测。