毛发中四氢大麻酚检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-396Excellence in Science Excellence in ScienceGCMS-382 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cn Tel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn ATLAS-LEXT 和 GCMS 联用测定毛发中四氢大麻酚的含量 GCMS-382 摘要：本方法采用 ATLAS-LEXT 全自动样品处理平台和 GCMS-QP2020 NX 联用检测毛发中四氢大麻床。该方法最大特点为采用ATLAS-LEXT处理样品，实现毛发样品碱水解、乙酸中和、萃取、真空干燥、衍生等流程的自动化处理。实验结果表明：该方法采用 ATLAS-LEXT 自动处理基质加标溶液后测定得到的校准曲线线性良好，标准溶液连续6针平行测定，重复性良好，加标回收率在59.1-79.3% 之间。该方法简单方便，能用于检测毛发中四氢大麻酚的含量。 关键词：气相色谱-质谱联用仪ATLAS-LEXT 全自动样品处理平台 毛发 四氢大麻酚 大麻为一年生草本植物，雌雄异体，几乎遍及全球。大麻是世界范围内滥用最为严重的毒品之一，其中四氢大麻酚(^-THC)是首要的精神活性成分，能使人致幻成瘾，并可对人体产生多种毒害作用。按照THC 含量的不同，大麻可大致分为医用、娱乐性大麻和工业大麻。受加拿大、美国等国“大麻合法化”影响，国际大麻种植加工等问题关注度骤升，进而在全球掀起大麻热。目前在国外大麻产品销售，产品主要包括大麻烟，大麻油和大麻药酒，大麻食品等。而在国内对大麻管控依然严格，因此建立大麻成分检测方法有着重要的现实意义。 实验部分 1.1仪器 ATLAS-LEXT+GCMS-QP2020 NX 1.2分析条件 色谱柱： SH-Rxi-5SilMS， (30m×0.25mm×0.25 um) 柱温程序：80℃ (2 min)_30℃ /min_280℃ (10 min)离子源温度：230℃接口温度：280℃ 载气控制方式：恒线速度(36.8 cm/sec) 岛津公司 ATLAS-LEXT 全自动样品处理平台可以对毛发等样品中的违禁药物自动进行液-液萃取，复溶后可进行液质联用分析或气质联用分析，自动化程度高，可节省大量时间，提高效率。同时ATLAS-LEXT 可根据前处理需要进行自定义编程，从而完美实现复杂前处理步骤，包括多次萃取，酸碱萃取、衍生等。 本文利用岛津 ATLAS-LEXT 和 GCMS-QP2020 NX联用，通过 ATLAS-LEXT 编程功能自动实现毛发水解、萃取、衍生等流程，建立毛发中四氢大麻酚的检测方法，供相关人员参考。 进样口温度：280℃ 进样方式：不分流进样 进样量：1uL 检测器电压：调谐电压 +0.2 kV 采集方式： SIM 样品前处理 取毛发样品，置于小烧杯中，依次用甲醇、水、甲醇各振荡清洗2min， 清洗3次，自然晾干。将晾干后的毛发检材铰碎至1mm ~2 mm左右，称取20 mg 置于 ATLAS-LEXT样品管中，利用 ATLAS 自定义前处理程序完成样品处理。处理流程：样品管中加入1 mol/L 氢氧化钠溶液 0.5 mL， 90℃加热10 min 水解， 再加入乙酸 0.5 mL混匀中和，6300 r/min 离心30s， 取上清液，加入正己烷/乙酸乙酯(体积比9：1)混合溶剂2.5mL，震荡萃取 5min， 6300 r/min 离心30s，取上清液；重复提取一次，合并两次提取的有机相，40℃浓缩至干，再加入五氟丙酸 100 uL， 70℃衍生化 30 min。衍生完成后40℃浓缩至干，用乙酸乙酯200 uL溶解，作为检材样品衍生液供GCMS分析。 图1 ATLAS 前处理流程 结果与讨论 3.1标准品图谱 A-THC标准品根据1.3前处理条件进行衍生，按1.2中分析条件上机分析，得到-THC质量色谱图见图2，化合物信息见表 1。 图22A-THC衍生物质量色谱图(50 ug/L) 表1 ^-TH化合物信息 化合物名称 英文名称 CAS号 检测目标物 保留时间 定量离子 定性离子 (min) (m/z) (m/z) 四氢大麻酚 Tetrahydrocannabinol 1972-08-3 四氢大麻酚衍生物 9.133 377 460 3.2标准曲线及检出限 称取5份毛发样品，在样品中分别加入5个不同浓度的标准品溶液，浓度分别为50、100、200、500和1000ug/L， 根据1.3前处理条件进行处理并上机分析，以△-THC衍生物浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，外标法绘制标准曲线(图3)。线性相关系数和检出限见表2。 图3A'-THC衍生物校准曲线 表2 校准曲线参数 序号 名称 校准曲线 相关系数r 检测限(ug/L)定量限(ug/L) 1 A-THC衍生物 Y=4414.905X+16941.75 0.9999 0.64 2.12 3.3重复性测试 别取浓度为50、200、1000 ug/L衍生溶液，连续进样6次，考察仪器的重复性，测定结果见表3。 表3 A°-THC衍生物重复性结果(n=6) 样品名称 RSD% (50 g/L) RSD% (200 ug/L) RSD%(1000 ug/L) R.T. Area R.T. Area R.T. Area ^°-THC衍生物 0.01 1.45 0.01 1.48 0.01 1.04 3.4样品加标回收率 为评估前处理中碱水解、中和及萃取过程的回收率，毛发样品经 ATLAS 完成碱水解、中、萃取和真空干燥之后，再手动加入50、200、500 ug/L的A-THC的标样，随后再用 ATLAS 完成后续衍生流程并上机分析，标准曲线中对应浓度峰面积比上该峰面积计算回收率，回收率结果见表 4。 图4 空白样品和加标样品质量色谱图(左：空白样品；右：50 ug/L加标样品) 表4 加标回收率 名称 回收率%(50ug/L) 回收率%(200ug/L) 可收率%(500 ug/L) ^°-THC 衍生物 59.1 65.3 79.3 结论 本方法采用 ATLAS-LEXT 和 GCMS-QP2020 NX联用检测毛发中四氢大麻酚(^-THC)。采用 ATLAS-LEXT 处理标准样品，在50~1000 ug/L 浓度范围内， A'-THC线性良好，相关相关系数为0.9999，方法检出限为 0.64 ug/L。分别取浓度为50、200、1000 pg/L衍生溶液连续进样6针，峰面积 RSD 均小于1.5%，精密度良好。加标回收率在59.1-79.3%之间。该方法简单方便，能用于检测毛发中四氢大麻酚的含量。 岛津应用云 本方法采用ATLAS-LEXT全自动样品处理平台和GCMS-QP2020   NX联用检测毛发中四氢大麻酚。该方法最大特点为采用ATLAS-LEXT处理样品，实现毛发样品碱水解、乙酸中和、萃取、真空干燥、衍生等流程的自动化处理。实验结果表明：该方法采用ATLAS-LEXT自动处理基质加标溶液后测定得到的校准曲线线性良好，标准溶液连续6针平行测定，重复性良好，加标回收率在59.1-79.3%之间。该方法简单方便，能用于检测毛发中四氢大麻酚的含量。