注射用加替沙星中无菌检查检测方案(集菌仪)

1377中华临床医学研究杂志2007年5月第13卷第10期 May 2007，Vol 13，No.10 试品溶液至少在10h 内稳定。 2.7.2 流动相的组成比例和pH 在研究分析方法的过程中可以看出，流动相中有机相和水相的比例有小的变动(1%变化)、pH值在3.0~4.0范围变动，对测定结果也没有明显影响。 2.8 含量测定按照上述方法制备对照品溶液和供试品溶液，分别取对照品溶液和供试品溶液溶 10p.l进样测定，外标法以峰面积计算。测定了3批复方苯硝那敏片的含量，结果见表2。 3 讨论 3.1 提取试验显示，以37%的乙腈为溶剂，超声10、15和 20min 结果一致，巨以选用超声 15mino 3.3 本方法精密度、准确度好，操作简便，可用于复方苯硝那敏片中维生生B。 含量测定。 表2. 含量测定结果 样品批号 维生素B(mg/片) 070313-1 3.504 070313-2 3.500 070313-3 3.515 ( 参考文献 ) ( 1.刘刚，王驰，闵庆旺，等.离子对 HPLC 测定特种维生素B。注射液中维 生素B含量.解放军药学学报.2003；19(4)：248 ) 注射用加替沙星无菌检查方法的研究 黑龙江省哈尔滨誉衡药业有限公司(150025) 马友辉黑龙江省哈尔滨仁皇药业有限公司(150050) 马文军 摘要 目的：建立注射用加替沙星无菌检查方法。方法：参照中国药典2005年版二部附录附录 XIH 进行试验。结果：采用薄膜过滤法，以0.1%无菌蛋白胨水溶液为冲洗液，选择冲洗量为600ml，并以 0.1M 硫酸锰为中和剂，即可消除样品对各菌株的抗菌活性。结论：故注射用加替沙星可按照此方法进行无菌检查。 关键词 注射用头加替沙星无菌检查 薄膜过滤法 AbstracttCObjective： Establish Gatifloxacin for Injection steriling test method. Method： In reference to Chinese Pharmacopoeia 2005 version 2 Appen-dix XIH experiment Results： Using membrane filtration method， aseptic to 0.1% peptone solution for the fluid， rinse volume of 800 ml， 0. 1M Manga-nese Sulfate for neutralizer， then remove samples of the strain of antibacterial activity. Conclusion： Therefore， Gatifloxacin for Injection in accordancewith this method sterility test. Key words Gatifloxacin for Injection steriling test membrane filtration method 注射用加替沙星为8-甲氧氟喹诺酮类外消旋化合物，体外具有广谱的抗革兰氏阴性和阳性微生物的活性，其R-和S-对映体抗菌活性相同。本品抗菌作用是通过抑制细菌的DNA 旋转酶和拓扑异构酶 IV，从而抑制细菌 DNA 复制、转录和修复过程。体外试验和临床使用结果均表明，本品对大多数菌株具有抗菌活性。 正常的无菌检查法：取本品适量，按薄膜过滤法过滤，以0.1%无菌蛋白胨水溶液冲洗。以金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]，大肠埃希菌 CMCC(B)44102为阳性对照，依法检查(《中国药典》2005年版二部附录XIH)，应符合规定。因加替沙星具有较强的抑菌活性，故对注射用加替沙星的无菌检查进行了实验摸索，结果：采用薄膜过滤法，以0.1%无菌蛋白胨水溶液为冲洗液，选择冲洗量为600ml，并以0.1M硫酸锰为中和剂，即可消除样品对各菌株的抗菌活性。所以注射用加替沙星可按照此方法进行无菌检查，提高了检查结果的准确性。 1 实验材料与仪器 1.1 样品 注射用加替沙星，批号：060601、060602、060603规格：0.2g。 厂家：哈尔滨誉衡药业有限公司。 1.2 试验用菌种 金黄色葡萄球菌 CMCC(B)26003；铜绿假单胞菌 CMCC(B)10104；枯草芽孢杆菌 CMCC(B)63501；大肠埃希菌 CMCC(B)44102；生孢梭菌 CMCC(B)64941；白色念珠菌 CMCC(F)98001；黑曲霉菌 CMCC(F)98003。以上菌种均由中检所提供。 1.3 试验用培养基码硫乙醇酸盐液体培养基，批号990425；霉菌液体培养基，批号030514；营养肉汤培养基，批号0110084；营养琼脂培养基，批号050328；玫瑰红钠琼脂培养 基，批号030219，以上培养基均由中检所提供。 1.4 仪器 HTY-2000A 型集菌仪(杭州泰林生物技术设备有限公司)，KDGB-330 全封闭集菌培养器(杭州泰林生物技术设备有限公司)， HH.B11.500 型电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂)。 2 实验条件 2.1 菌液制备 取经30~35℃培养18~24小时的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌与枯草芽孢杆菌营养肉汤液体培养物1ml，分别加入9ml 0.9%氯化钠溶液中，10倍依次稀释，金黄色葡萄球菌稀释至10-5、铜绿假单胞菌与大肠希菌稀释至10-7、枯草芽孢杆菌稀释至10-5约为10~100cfu/ml，备用。 取经23~28℃培养24~48小时的白色念珠菌霉菌液体培养物1ml，加人9ml 0.9%氯化钠溶液中，10倍稀释至10-5，约为10~100cfu/ml，备用。 取经30~35℃培养18~24小时的生孢梭菌硫乙醇酸盐液体培养物1ml，加入9ml 的0.9%氯化钠溶液中，10倍稀释至10-7，备用。 取经培养5~7天的黑曲霉改良马丁琼脂斜面培养物，加0.9%氯化钠溶液 3ml，洗下孢子，转移至另一试管，与标准比浊管比浊后，取1ml加加9ml 0.9%氯化钠溶液中10倍稀释至10-4约为 10~100cfu/ml，备用。活菌计数见表1。 2.2 培养条件金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、生孢梭菌培养温度30~35℃，白色念珠菌、黑曲霉菌培养温度23~28℃，培养时间14天。 3 方法验证试验 薄膜过滤法。 3.1 试验组 取本品140支，每20支用无菌注射器分别吸取适量至100ml稀释液中(规格为2ml：0.2g取1ml)，分别置 7个滤筒中过滤(每筒100ml)，每筒用0.1%无菌蛋白胨水溶液500ml冲洗过滤，每次 50ml，在最后 100ml 冲洗液中分别加入1ml已制备好的上述7株菌液(约为10~100个/筒)，再分别加入相应的培养基100ml，最后在每筒中分别加入0.1mol/L 的硫酸锰溶液 10ml。依照2005年版《中国药典》二部附录 XIH无菌检查法，加入相应培养基，按规定条件培养3~5天。逐日观察。 3.2 对照组另取7个滤筒，加入相应的等量培养基，再加入1ml相应试验菌，作为对照，按规定温度培养3~5天，逐日观察。 3.3 供试品对照组 取本品40支，每20支用无菌注射器分别吸取适量至100ml稀終液中(规格为2ml：0.2g取1ml)，分别在2个滤筒中过滤(每筒100ml)，并在2个滤筒中分别加入硫乙醇酸盐流体培养基100ml和改良马丁培养基100ml，每筒中再分别加入0. 1mol/L 的硫酸锰溶液 10ml。依照2005年版《中国药典》二部附录 XIH 无菌检查法，按规定条件培养3~5天。逐日观察。 3.4 空白对照组旦取试验用硫乙醇酸盐培养基和改良马丁培养基各 100ml，按规定条件培养3~5天。逐日观察。 3.5 阴性对照组 取稀释剂替代本品，方法同供试品对照组。各组生长情况见表2。 4 结果判断 与对照组比较，试验组的各滤筒中的试验菌均生长良好，并与各对照组中相应菌落生长相情况相似，供试品对照组、空白对照组和阴性对照组均无菌落生长，故该供试品在此检验量和检验条件下，可去除样品对各菌株的抗菌活性，因此可照此检查法和检查条件进行注射用加替沙星的无菌检查。 表1. 活菌计数 金黄色葡铜绿假 枯草芽 大肠埃 生孢 白色念 黑曲 萄球菌 单胞菌 孢杆菌 希菌 梭菌 珠菌 霉菌 2 平均值 5 结论 按照《中国药典》2005年版二部(附录XIH)，采用薄膜过滤法，以0.1%无菌蛋白胨水溶液为冲洗液，选择冲洗 量为600ml/筒，并以0.1M硫酸锰为中和剂10ml/筒，即可消除样品对各菌株的抗菌活性，故注射用加替沙星可按照此方法进行无菌检查。 表2. 验证试验各组生长情况 倍他乐克治疗慢性充血性心力衰竭疗效观察 黑龙江省哈尔滨市第九医院(150001) 贾宇红 黑龙江省哈尔滨市第六医院范迎新石艳 摘要 目的：评价倍他乐克治疗慢性充血性心力衰竭的临床疗效。方法：64例慢性充血性心力衰竭患者，随机单盲分成倍他乐克组(治疗组)常规治疗组(对照组)各32例。结果：与对照组比较，治疗组症状缓解，心功能改善、抗心律失常、减少住院率均优于对照组(P<0.05)，两组不良反应均轻微。结论：β受体阻滞剂在改善患者心功能、抗心律失常、增加运动耐量、减少住院率方面作用肯定。 关键词 充血性心力衰竭倍他乐克多普勒UCG 2004年12月~2006年11月，笔者选择病情稳定的心力衰竭患者32例，在常规治疗的基础上，加服倍他乐克，旨在观察能否减轻心衰患者症状、改善心功能、减少住院率及死亡率。报道如下。 1 临床资料 1.1 入选病例64例入选病例均为门诊病情稳定的慢性心力衰竭患者，男46例，女18例；年龄32~76岁，中位年龄58岁；心功能Ⅱ~Ⅲ级(NYHA)L1J，排除心功能Ⅳ级患者；冠心病心力衰竭型50例，风心病8例，慢性病毒性心肌炎2例，扩张 型心肌病4例[2]；病程1.5~2年；42例因心衰住院治疗1次以上，22例未曾住院治疗。随机单盲分成治疗组32例，对照组32例。两组在年龄、性别、病程、住院次数、心功能分级构成比方面均相似，具有可比性。 1.2治疗方法对照组接受低盐饮食、休息、安体舒通、地高辛和卡托普利等常规治疗。治疗组在此基础上加用倍他乐克6.25mg，2次/d，每2周后根据患者耐受情况加服 6.25mg/d，最大量达 100mg/d。两组均于治疗前和治疗后作多普勒UCG检查心功能，记录左心室射血分数(LVEF)，12导联心电图，住院次数以及血、尿常规和肝肾功能。