中药材和饮片中鉴别检测

为探究不同产地当归活性成分的差异，采用全谱二维液相色谱与四极杆飞行时间质谱联用非靶向代谢组学测定方法，对甘肃、云南当归中的活性成分进行比较。采集后数据经MS-DIAL软件进行峰提取和对齐后，采用Metaboanalyst进行统计学分析，经数据库比对、Labsolutions Insight Explore鉴定差异活性成分。结果表明，全谱二维液相色谱（Polarity-Extended Liquid Chromatography- PELC）方法相对于一维液相色谱（One-Dimensional Liquid Chromatography -1D-LC）方法可提高当归成分的分析覆盖率；通过主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)发现不同产地的当归存在显著差异；经数据库比对、Labsolutions Insight Explore软件预测共鉴定出43种差异性化合物，包括苯酞类、有机酸类等天然活性物质。

数码生物显微镜用于中药材粉末鉴定，根据用户需求工程师推荐使用生物显微镜CX43和显微镜摄像头结合的显微系统方案，可以在高效直观地观察材的组织构造、细胞形状及其后含物的特征，用以鉴定药材真伪，减轻了实验操作人员的负担，极大提高了实验效率。

千百年来，作为我国独特的卫生资源，中医药与人民生命健康、幸福生活密切相关。过去，中华民族几千年靠中医药治病救人。经过抗击新冠肺炎疫情、非典等重大传染病之后，我们对中医药的作用有了更深的认识。 随着人们经济、生活水平提高，人们也愈加重视自身健康。加之中医药在养生保健方面有着巨大优势，人们对中药的需求正逐渐加大。 但中药造假掺假的现象随之而来，进而造成诸多危害，如疗效降低、容易产生毒副作用等，更会影响中医药事业的发展。因而，对中药的品质把控至关重要。 古代有神农尝百草确定中药种类，而今科学仪器可代替人来发挥作用。

本研究应用了900-1700nm的高光谱相机，可采用杭州彩谱科技有限公司产品FS-15进行相关研究。短波近红外高光谱相机，采集速度全谱段可达200FPS,被广泛应用于成分识别，物质鉴别，机器视觉，农产品品质，屏幕检测等领域。

本文利用岛津GCMS-TQ8050 NX三重四极杆气质联用仪结合AOC-6000自动进样器SPME Arrow进样建立了冬虫夏草中150种气味成分MRM定量方法，该方法具有高通量、高灵敏度和准确的特点。基于150种气味成分MRM方法，对不同产地冬虫夏草中气味成分、冬虫夏草正品和伪品中气味成分进行了研究比较。

利用德国AIRSENSE电子鼻、日本INSENT电子舌技术对不同等级白术药材进行鉴别研究。应用Loading分析法对电子鼻传感器区分样品的能力进行分析，应用主成分分析( PCA).线性判别分析法( LDA)分析不同等级白术药材电子鼻信号值，单因素方差分析电子舌获取的甜味值。结果显示电子鼻LDA与PCA分析均可有效区分不同等级白术样品;电子舌能够客观测定不同等级白术药材“味”的变化参数，三个等级白术药材的甜味有差异。

本文基于分子生物学技术，采用岛津公司微芯片电泳仪MultiNA成功对中药材蕲蛇进行鉴定，不仅在凝胶电泳图谱中300-400 bp之间有单一条带，还能通过电泳图得到片段尺寸信息，误差在5%以内。此方法相比传统的琼脂糖凝胶电泳，更加高效、灵敏，分辨率高，操作简便，全自动化分析，通量高，是中药材品种鉴定有力的分析方法。

德国G.A.S.公司研发的FlavourSpec®风味分析仪能简单快速地获得中药材挥发性有机物组分的信息，从而辨别中药材样品的是否经过熏蒸。

使用G.A.S.公司的FlavourSpec®风味分析仪，在无需样品前处理前提下，直接加热百合粉末，顶空进样后可快速检测中药材百合中的挥发性有机组分，仪器配备的强大功能软件可给出样品的气相离子迁移谱图、挥发性有机物的Gallery Plot图、PCA等，用户一眼便能看出样品间的共性与差异：

传统草药被用作许多疾病的替代药物。土坛树就是这样一种传统药用植物。目前已有多项研究使用到这种植物的提取物，这也证明了其具有治疗价值。但是，极少有人尝试确定这种植物复杂的代谢物组成。在本应用简报中，我们用有机溶剂和水性溶剂对样品进行提取，对土坛树树皮上的代谢物进行分析和鉴定。通过 Agilent 1260 的分析型馏分收集系统对有机溶剂提取物和水提取物进行馏分收集。并利用 LC/MS 和 GC/Q-TOF 技术分析每种馏分。使用 HILIC 色谱和三个独立的正交反向色谱柱进行 LC/MS/MS 分析。使用 AJS 离子源在正离子和负离子模式下收集数据，然后在 METLIN 数据库或 MS/MS 谱库中进行搜索。那些未能获得数据库和谱库匹配的八角枫属化合物继而还可以使用安捷伦 MSC 软件在收录超过 3000 万个结构的ChemSpider 数据库中进行搜索。为了鉴定由 GC/Q-TOF 分析结果所产生的化合物，可以通过 AgilentFiehn GC/MS 代谢组学谱库和 Wiley/NIST 谱库对数据进行检索。借助多个 GC 谱库的搜索结果鉴定出 62 种化合物，匹配得分均大于 70。使用两种技术共检测出 1016 种化合物，其中有 511 种化合物被成功鉴定。文献检索显示，511 种化合物中有 81 种对癌症、微生物感染等传统疾病具有治疗效果。我们的研究表明，使用馏分收集法进行代谢物富集、用双相溶剂提取以及正交色谱柱固定相进行代谢物分离，并采用互补的 LC/MS 和 GC/MS 检测，可以提高药用植物的代谢物检测范围。

摘要： 蒙古黄芪和膜荚黄芪采用HPTLC高效硅胶预制薄层板点样，分别采用普通双槽层析缸和全自动展开仪（ADC 2）展开，ADC 2展开的色谱图分离度较好。从薄层色谱指纹图谱分析，蒙古黄芪和膜荚黄芪所含皂苷类主要成分的比例基本一致，而黄酮类成分在量上存在一定的差异。 讨论： 1）采用ADC 2展开与普通缸展开，得到基本一致的色谱图，但用ADC 2的色谱图分离度较好，且基本不受外界环境的湿度的影响，重现性好； 2）蒙古黄芪和膜荚黄芪共同收载于《中国药典》2005年版（一部），两者在功能主治和用法用量上完全一致，从指纹图谱上分析，两者所含皂苷类成分的比例上基本一致，不能明确对两者进行品种鉴定，所含黄酮类成分在量上存在一定的差异。（Fig 1~ 2）。 3) 黄芪甲苷为人工产物，来自样品中的各类黄芪皂苷如黄芪皂苷I、II等在碱性环境下提取时的脱糖分解产物。 注意事项： 1） 在《中国药典》2005年版（一部）黄芪鉴别项展开剂中含有三氯甲烷，现改为二氯甲烷，并对展开系统进行了优化； 2） 展开时环境温度20 ℃左右较好，不宜太高。

摘要： 五味子和南五味子用普通硅胶预制薄层板点样，普通缸和自动展开仪（ADC 2）自动展开，获得较为一致的薄层色谱图。从薄层色谱指纹图谱分析，五味子和南五味子所含主要成分的比例存在显著性差异，可以明确对两者进行品种鉴定。 讨论： 1）采用ADC 2展开与普通缸展开，得到基本一致的色谱图，但用ADC 2基本不受外界环境的湿度的影响，重现性好； 2）《中国药典》2005年版（一部）收载的五味子属药材有五味子和南五味子，两者在功能主治和用法用量上基本一致，但从所含成分的比例上，它们却有很大的差异，主要体现在木脂素类成分比例上，以五味子醇甲和五味子乙素为代表的成分，北五味子含量高而南五味子含量极低或几乎不含；五味子酯甲和五味子甲素成分，北五味子含量极低或不含而南五味子则含量较高，两者所含主要成分的比例具有显著性差异，可以明确对两者进行品种鉴定（Fig 1~ 2）。 注意事项： 1）展开剂放置冰箱10 ℃下分层，取上层溶液作为展开剂，可以避免产生展开剂脱混造成的水印（第二前沿）； 2）在此色谱条件下，用普通薄层板比高效薄层板的分离度更好。

摘要： 人参、红参和西洋参采用高效硅胶预制薄层板点样，采用普通缸和自动展开仪（ADC 2）自动展开，获得较为一致的薄层色谱图。从薄层色谱指纹图谱分析，人参、红参、西洋参的皂苷类成分色谱指纹图谱在整体相似的基础上，又存在着成分种类和含量的显著差异，可以通过其指纹图谱明确对三者进行品种鉴别。 讨论： 1）采用ADC 2展开与普通缸展开，得到基本一致的色谱图，但用ADC 2展开的色谱图分离度较好，能将人参皂苷Rg1和伪人参皂苷Rf分开，而在此色谱条件下，用普通缸展开很难分开，且ADC 2展开基本不受外界环境的湿度的影响，重现性好； 2）《中国药典》2005年版（一部）将人参、红参、西洋参分开收载，三者在功能主治方面不尽相同，但从所含皂苷类成分的比例上，它们都含有人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1等成分，人参、红参含有伪人参皂苷Rf，而西洋参不含，同样，西洋参含有拟人参皂苷F11，而人参、红参不含。在总皂苷的量上，西洋参比人参、红参高很多，而红参的皂苷元在量上也明显比人参多，所以人参、红参、西洋参的指纹图谱在整体一致的基础上，又存在一定的差异，可以通过其指纹图谱明确对三者进行品种鉴定（Fig 1~ 2）。 3) 控制环境温度在20 ℃以下，分离度好。

自从FDA食品补充剂的现行生产质量管理规范（cGMP）在美国颁布实施以来，对于合适的测试方法的需求大增。由于基于植物来源的原料都是复杂的混合物，其所体现出天然的波动性对植物药成分的分析构成挑战。故对定性鉴别的专属性要求其必须能够区分出样品中是否含有错误的植物种属成分。 HPTLC为执行可靠的鉴别提供了有力保证。因为其能够提供彩色的色谱指纹图谱信息，可被可视化并以数字图像存储。为了充分利用这一源自HPTLC技术本身的独一无二的优势，必须确保获得可重现的结果和图像。 如果选用合适的仪器设备、执行标准化的HPTLC操作规程，以及按照下述准则来进行方法开发和验证[1] ，就可以获得重现性的有效提高。 验证步骤及其组成 基于清晰定义的分析目的，确效过程开始于方法的开发、选择以及优化[2]阶段。接下来是在验证方案中详细说明的一系列的稳定性评价试验。在验证试验中获得的数据需要进行评估，并与验证方案的验收标准进行比较。如果所有要求都被满足，则该方法即可视为有效。 考察刺五加（Eleuthero，左）和当归（Angelica spp.）在色谱展开时的稳定性 对获得自不同相对湿度的蝴蝶亚（Hoodia gordonii）HPTLC指纹图谱的比较 (1: 3% RH, 2: 33% RH, 3: 47% RH, 4: 54% RH, 5: 75% RH)

对两种“柬龙牌”血竭进行鉴别。方法TLC、UV和HPLC色谱进行分析：结集两种“柬龙牌 血竭的化学成分具有显著不同 结论TLC、UV和HPLC法可作为龙血竭的真伪鉴别的方法。

虫草的品种鉴定研究，准确地判定其来源，对药品的监督和检验显得尤为必要。 本文运用近红外高光谱成像技术对冬虫夏草粉末的真假鉴别及含量进行无损检测的判断。与传统的中药检测技术如色谱法、质谱法和光谱法[ 2-4] 等方法相比，高光谱成像技术把二维成像和光谱技术融为一体，其高光谱数据包含光谱和图像信息，可以同时表征被测对象的外部特征和内部信息，优势在于采集到的图像信息量丰富，识别度较高和数据描述模型多。

利用近红外光谱仪 Antaris II 对不同产地枸杞药材进行 光谱采集，建立鉴别分析模型。利用TQ软件判别分析 （Discriminant Anlysis） 建立宁夏枸杞的鉴别模型。 模型鉴别准确率93%以上。结果说明将近红外分析技 术可以合理对枸杞药材的产地进行鉴别，方法具有稳 定、客观等优势。

分别采用 Agilent 6400 系列 QQQ 和 6500 系列 Q-TOF 液质联用 系统，针对 2015 版药典收载的阿胶、龟甲胶、鹿角胶三种胶类药材进行定性方法开发，结果表明，阿胶、龟甲胶、鹿角胶的信噪比远远优于药典的要求。在此基础上，开发了胶类药品的专属性肽段鉴别方法以及特征肽段序列分析方法，并将特征肽段分析成功应用于一例“假龟甲胶”的鉴别中。

色 谱 柱：Shim-pack XR-ODS III 2.0 mm×75 mm, 1.6 μm 流 动 相：A 相-0.1% 甲酸水溶液 B 相-乙腈 流 速：0.3 mL/min 柱 温：40℃

阿胶、鹿角胶、龟甲胶均系常用的滋补药，在复方及中成药配伍方面占有极重要的位置，由于货源紧缺以致药材基源混杂和掺假现象时有发生。目前，针对这三种胶类真伪鉴别的方法有多种，但其认定的最高标准则是《中国药典》关于此类胶的规定。本实验严格参照《中国药典》 2 0 1 5 年版中药材阿胶、鹿角胶、龟甲胶的鉴别方法，应用三重四极杆质谱系统TSQ Endura 开发了药材阿胶、龟甲胶及鹿角胶的检测方法。

本文基于 2015 年版《中国药典》[1] 中采用液质联用技术分析胶类药材的定性方法，开发了稳定、快速、灵敏的三重四极杆液质联用 (LC/QQQ) 法和四极杆飞行时间液质联用(LC/Q-TOF) 法进行阿胶、鹿角胶、龟甲胶的定性鉴别；同时，利用 Q-TOF 强大的化合物定性能力，结合蛋白质库，建立了特征肽段序列分析方法以及“假药”的初步定性方法。

该方法参考《中国药典》 2015 年版中药材阿胶、鹿角胶、龟甲胶鉴别方法而开发的液相串联质谱（LC-MS/MS）检测方法。本方法完全能够满足《中国药典》 2015 年版阿胶、阿胶珠、鹿角胶和龟甲胶药材鉴别方法对于灵敏度和重现性的要求。

本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A和三重四极杆质谱仪LCMS-本方法能够完全满足药典的要求，实现龟甲胶药材的快速、准确、灵敏的定性分析。