左卡尼汀药品中遗传毒性杂质S-环氧氯丙烷含量检测方案(气质联用仪)

SSL-CA22-252Excellence in Science Excellence in ScienceGCMS-459 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. - Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cnTel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn GCMS 法测定左卡尼汀药品中遗传毒性杂质S-环氧氯丙烷含量 GCMS-459 摘要：本文利用岛津 GCMS-QP2020 NX 气相色谱质谱联用仪，建立了左卡尼汀中遗传毒性杂质S-环氧氯丙 烷的检测则法。该方法以二氯甲烷为提取液，采用液液萃取法进行前处理，在10~1000 ng/mL 浓度范围内，S-环氧氯丙烷线性关系良好，相关系数R为0.9998，方法检出限为0.97 ng/mL。取浓度为 10 ng/mL标准溶液连续进样7针，峰面积 RSD 为2.6%。加标实验中，以100 ng/g与 200 ng/g加标浓度，加标回收率分别为95.8%与103.9%。该方法简便快捷、灵敏度高，能够有效检测左卡尼汀中遗传毒性杂质S-环氧氯丙烷的含量。 关键词：：气相色谱质谱联用仪 左卡尼汀 SS-环氧氯丙烷 左卡尼汀，别名左旋肉毒碱，65被俄国科学家于1905年在牛肉渍汁中发现。左卡尼汀在临床上用于治疗慢性肾衰竭、慢性心力衰竭、冠心病，疗效好，安全性高。另外由于该药物能够促进人体内脂肪转化为能量，从而加快脂肪的消耗，该药物也被用于减肥。 S-环氧氯丙烷为左卡尼汀合成的起始原料，经氨化、环氧化、氰基化水解制备。但是S-环氧氯丙烷是一种遗传毒性杂质。2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，环氧氯丙烷在2A类致癌物清单中。 左卡尼汀每日最大日剂量为3g，根据欧洲药物 管理局发布的《遗传毒性杂质限度指导原则》相关规定，以毒理学关注阈值 (TTC) 限度(1.5ug/d)作为基因毒性杂质的可接受限度，按此计算，S-环氧氯丙烷的控制限度为0.5 ug/g。 本文以二氯甲烷为提取液，采用液液萃取法进行前处理，采用GCMS-QP2020 NX气相色谱质谱联用仪，建立了左卡尼汀中遗传毒性杂质S-环氧氯丙烷的检测方法。该方法简便快捷、灵敏度高，可用于左卡尼汀中遗传毒性杂质S-环氧氯丙烷，满足该物质的限量要求。 1.1仪器 GCMS-QP2020 NX 气相色谱质谱联用仪 1.2分析条件 色谱柱： SH-Stabilwax-MS (30 m×0.25 mm×0.25 um) 柱温程序：40℃(2 min)_15℃ /min_130℃_30℃ /min_240C (3 min)进样口温度：220℃ 离子化方式：El 流速控制方式：恒线速度方式 离子源温度：230℃ 线速度：36.5cm/s 接口温度：260℃ 进样方式：不分流进样 检测器电压：调谐电压+0.3 kV 进样量：1uL 采集模式： SIM，离子信息见表1 图1 前处理流程图 结果与讨论 2.1 S-环氧氯丙烷质量色谱图 图29S-环氧氯丙烷标准溶液质量色谱图(10ng/mL) 表1S-环氧氯丙烷组分信息 中文名称 英文名称 CAS 号 保留时间 (min) 定量离子 (m/z) 定性生子(m/z) S-环氧氯丙烷 (S)-(+)-Epichlorohydrin 67843-74-7 6.410 62 64 2.2标准曲线和检出限 分别配制10、20、50、100、200、500、1000 ng/mL的标准溶液，进样1uL，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标做标准曲线，标准曲线如图3所示。根据10 ng/mL标样数据，以3倍信噪比计算仪器检出限，S-环氧氯丙烷标准曲线及检出限如表2所示。 图3S-环氧氯丙烷标准曲线 表2 S-环氧氯丙烷曲线信息及仪器检出限 No. 化合物名称 线性方程 相关系数(R) 检出限(ng/mL) 1 S-环氧氯丙烷 Y=233.5208x-260.5824 0.9998 0.97 2.3重复性实验 取浓度为 10 ng/mL标准溶液，连续进样7次，考察仪器的重复性，测定结果见表3。 表3SS-环氧氯丙烷重复性结果 化合物名称 面积1 面积2 面积3 面积4 面积5 面积6 面积7 RSD (%) S-环氧氯丙烷 2150 2053 1985 2019 2048 2093 2048 2.6 2.4加标回收率 取某左卡尼汀原料药按上述方法进行测定，原料药中未检出S-环氧氯丙烷。对此样品进行两个浓度水平的加标实验，回收率结果如表4所示。 图4 原料药样品和加标样品质量色谱图(左：空白样品；右：100ng/g加标样品) 表4 左卡尼汀样品加标实验结果 加标浓度 测定值(ng/g) 平均值(ng/g) (ng/g) 1 2 3 回收率 (%) 100 95.86 95.09 96.42 95.79 95.8 200 207.97 206.22 209.47 207.89 103.9 结论 本文利用岛津 GCMS-QP2020 NX 气相色谱质谱联用仪，建立了左卡尼汀药品中遗传毒性杂质S-环氧氯丙烷的检测方法。该方法以二氯甲烷为提取液，采用液液萃取法进行前处理，在10~1000 ng/mL 浓度范围内，S-环氧氯丙烷性关系良好，相关系数R为0.9998，方法检出限为 0.97 ng/mL。取浓度为 10 ng/mL标准溶液连续进样7针，峰面积 RSD 为 2.6%。加标实验中，以100 ng/g 和200 ng/g加标浓度，加标回收率分别为95.8%与103.9%。该方法简便快捷、灵敏度高，能够有效检测左卡尼汀中遗传毒性杂质S-环氧氯丙烷的含量。 岛津应用云 本文利用岛津GCMS-QP2020 NX气相色谱质谱联用仪，建立了左卡尼汀药品中遗传毒性杂质S-环氧氯丙烷的检测方法。该方法以二氯甲烷为提取液，采用液液萃取法进行前处理，在10~1000 ng/mL浓度范围内，S-环氧氯丙烷性关系良好，相关系数R为0.9998，方法检出限为0.97 ng/mL。取浓度为10 ng/mL标准溶液连续进样7针，峰面积RSD为2.6 %。加标实验中，以100 ng/g和200 ng/g加标浓度，加标回收率分别为95.8 %与103.9 %。该方法简便快捷、灵敏度高，能够有效检测左卡尼汀中遗传毒性杂质S-环氧氯丙烷的含量。