动物源性样品中糖皮质激素检测方案(摇床)

动物源性样品中糖皮质激素的检测 (SPE-LC/MS)使用 500mg 3mL HyperSep Silica 固相萃取柱(部件号：60108-315) 样品制备 LC/MS 方法 称取(2±0.05)g组织品品于50mL离心管内，加乙酸乙酯15mL， 涡旋混匀提取 3min， 离心 10min (4000rpm)，移取乙酸乙酯层至50mL梨形瓶中。残渣中加0.1mol/LNaOH溶液 10mL， 混匀，加乙酸乙酯 15mL 提取后移取乙酸乙酯层。合并两次提取液，40℃下减压浓缩近干，加入乙酸乙酯1.0mL 和正己烷5mL，使之充分溶解，待净化。 活化 色谱柱Hypersil Gold， 5pm， 2.1×150mm货号25005-152130流动相0.01%甲酸(A)：乙腈(B) 5mL 正己烷 梯度洗脱程序 上样 表1.流动相梯度洗脱条件 样品 清洗 5mL 正己完 洗脱 5mL正己烷一丙酮(6：4， v/v) Time(min) A(%) B(%) 01823 23.1 28 70 4040 70 70 306060 30 30 进样量 10pL 流速 250pL/min MS条件 电喷雾电离源(ESI)，负离子模式 选择反应监控(SRM)扫描模式 喷雾电压 3500V 离子传输管温度 350℃ 结果 1.典型LC/MS/MS 色谱图 2.定量限(LOQ)： RT： 0.00-28.02 SM： 5B 泼尼松、泼尼松龙、地塞米松、倍他米松、甲基泼尼松在牛奶中的定量限为0.1pg/L，在肌肉，鸡蛋及肝脏组织中的定量限为0.2ug/kg；氟氢可的松、倍氯米松在牛奶中的定量限为0.2ug/L，鸡蛋及肝脏组织中的定量限为0.2pg/kg；氢化可的松在牛奶中的定量限为 0.2pg/L， 鸡蛋及肝脏组织中的定量限为 0.5pg/kg. 图2糖皮质激素类药物 LC/MC 色谱图 3.本方法糖皮质激素类药物在猪、牛、羊的肝脏和肌肉，鸡肉，鸡蛋，牛奶中的提取回收率均可达60-110%。 样品制备称取（2±0.05）g 组织样品于50mL 离心管内，加乙酸乙酯15mL，涡旋混匀提取3min，离心10min（4000rpm），移取乙酸乙酯层至50mL 梨形瓶中。残渣中加0.1mol/LNaOH 溶液10mL，混匀，加乙酸乙酯15mL 提取后移取乙酸乙酯层。合并两次提取液，40℃下减压浓缩近干，加入乙酸乙酯1.0mL 和正己烷5mL，使之充分溶解，待净化。活化5mL 正己烷上样样品清洗5mL 正己烷洗脱5mL 正己烷一丙酮（6:4， v/v）