莴苣中29种有机氯及拟除虫菊酯类农药检测方案(固相萃取仪)

自动化样品前处理解决方案-RK-2020-F007 解决方案 莴苣中29种有机氯及拟除虫菊酯类农药的测定 全自动固相萃取；；气相色谱-质谱法；有机氯；拟除虫菊酯 近年来我国农业病虫害的不断发生甚至部分地区虫害的加重，造成农业生产中农药使用量的快速增加。但农药残留也造成了很大的负面影响，如人体食用有残留农药的蔬菜后会对体内的胆碱酯酶有抑制作用，阻断神经递质的传递，引起肌肉麻痹造成中毒而引起的毒性作用。许多农药特别是有机氯类农药结构稳定，在生物体内酶难于降解，所以积存在动、植物体内的有机氯农药分子消失缓慢。由于这一特性，它通过生物富集和食物链的作用，环境中的残留农药会进一步富集和传递。通过食物链进入人体的有机氯农药能在肝、肾、心脏等组织中蓄积。而且这类农药脂溶性大，在体内脂肪中的蓄积作用更加突出。蓄积的残留农药也能通过母乳排出，或转入卵蛋等组织，影响后代。 本文参考《NY/T 761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》用乙腈提取莴苣中的有机氯及拟除虫菊酯类农药，加入氯化钠使提取液中乙腈与水分离，取乙腈层浓缩后用正己烷溶解，用睿科Fotector Plus全自动固相萃取系统进行净化，洗脱液经浓缩后供GC/MS检测，外标法定量。当加标浓度为0.05 mg/kg时，回收率在80~110%之间， RSD值小于15%。说明本方法能够准确、有效地测定莴苣中的29种有机氯及拟除虫菊酯类农药。 仪器、耗材 Raykol Fotector Plus 高通量全自动固相萃取仪 Raykol AutoEVA-60 全自动平行浓缩仪 Raykol Auto Prep 200 全自动液体样品处理工作站 Raykol AH-30全自动均质器 试剂与溶液 分别称取适量的标准品，用丙酮溶解，配制成1000 mg/L的单一农药标准储备液，-18℃保存。乙腈(色谱纯， TEDIA)， 丙酮(色谱纯，， TEDIA) 2.标准曲线配置 使用睿科Auto Prep 200 全自动液体样品处理工作站实现标准品的全自动化配置，可将母液(1000 mg/L)通过工作站的配液模式，配置成浓度为10 mg/L的混合中间液，紧接着可通过程序设置，吸取该工作液，配置一条浓度分别为0.01 mg/L，0.05 mg/L， 0.10 mg/L， 0.2 mg/L 和 0.5 mg/L的 3.样品提取与前处理 样品前处理 准确称取10 g粉碎后的莴苣样品，加入20mL乙腈，用睿科 AH-30全自动均质进行均质。匀浆好的样品经4000 r/min 离心5 min， 上清液转移至另一 50mL离心管中，加入5~7g氯化钠，盖上盖子，剧烈震荡1 min， 4000 r/min 离心5 min， 使水相 固相萃取净化条件 表-1固相萃取净化条件 全自动固相萃取仪 睿科Fotector Plus 固相萃取柱 Florisil (RayCure， 1g/6mL) 淋洗 正己烷 洗脱 10%的丙酮/正己烷容液 将佛罗里硅土固相萃取柱(Florisil) 安装在全自动固相萃取仪上，分别用 5mL 10%的丙酮/正己 Agilent 7890A-5975C气相色谱-质谱联用仪HP-5MS (30m×250pm×0.25pm)气相色谱柱湘仪，转速不低于 4000r/min 离心机 弗罗里硅土柱 (RayCure Florisil， .1g/6 mL，RC-204-16945) 正己烷(色谱纯， TEDIA)，氯化钠(AR， Kermel)。10%的丙酮/正己烷溶液：取10mL丙酮酒 90mL正己烷混合。 标准工作曲线。 图-1. Auto Prep 200 液体工作站配标程序 和有机相分层。 准确吸取10 mL 有机相到玻璃试管中，用睿科AutoEVA-60全自动平行浓缩仪在50℃、2 psi条件下氮吹至近干，加入2.0 mL 正己烷溶解残渣，待净化。 烷溶液，5mL 正己烷以2 mL/min 的速度活化，以1 mL/min 速度上样，用2mL 正己烷清洗样品瓶，收集流出液，最后用5mL 10%的丙酮/正己烷溶液洗脱。收集洗脱液用睿科 AutoEVA-60 全自动氮吹平行浓缩仪浓缩至小于1mL，用10%的丙酮/正己烷溶液定容到1mL 供 GC/MS 检测。具体步骤见图 4.检测条件 气相色谱-质谱联用条件 进样量：1uL 进样口温度：280℃，不分流进样 柱流速：1.5 ml/min， 恒流模式 升温程序：起始温度60℃保持1 min；以30℃/min 升温至180℃；再以2℃/min 升到230℃，保持5 min； 再以10℃/min升到290℃，保持7 图-2.Fotector Plus 固相萃取净化方法 传输线温度：280℃ 离子化方式： EI， 70 eV离子源温度：230℃四级杆温度：150℃采集方式： SIM选择离子扫描。具体参数见表 -2。 表-2.29种农药的定量离子和定性离子 化合物名称 英文 保留时间 定量离子 离子2 离子3 p，p'-DDE p，p'-DDD 24.987 246 318 248 p'p-DDT p'p-DDT 31.018 235 237 165 p，p-DDD p，p-DDE 28.125 235 237 165 o p-DDT o p-DDT 28.239 235 237 165 六氯苯 Hexachloro-Benzene 12.163 284 286 282 a-六六六 alpha-HCH 11.977 181 183 219 β-六六六 beta-HCH 12.936 181 183 219 8-六六六 n-Lindane 13.281 181 183 219 Y-六六六 Lindance 14.503 181 183 219 狄氏剂 Dieldrin 25.353 263 277 265 七氯 Heptachlor 16.652 100 272 237 艾氏剂 Aldrin 18.657 263 261 265 异狄氏剂 Endrin 26.871 263 281 265 a-硫丹 Endosulfan I 23.466 237 241 239 B-硫丹 Endosulfan II 27.715 195 237 241 氯菊酯 Permethrin 40.86，41.13 183 165 163 氟氯氰菊酯 Cyfluthrin 42.29，42.39 199 163 206 氟氰戊菊酯 Tau-fluvalinate 43.422 199 157 181 胺菊酯 Tetramethrin 35.267，36.09 164 123 165 甲氰菊酯 Fenpropathrin 36.539 181 265 280 氰戊菊酯 Phenvalerate 44.70，45.246 125 167 181 溴氰菊酯 Deltamethrin 46.818 181 253 251 氯氰菊酯 Cypermethrin 42.87，42.633 42.97，43.084 163 181 165 阿特拉津 Atrazine 12.62 200 215 202 异菌脲 Iprodione 35.021 314 187 244 乙烯菌核利 Vinclozolin 15.509 212 198 285 三唑酮 Triadimefon 18.933 208 181 128 腐霉利 Procymidone 21.685 283 98 285 丁草胺 Machette 22.946 176 160 188 色谱图 图-3.29种农药标准品总离子流图(0.5 mg/L) 5.方法可行性验证 取莴苣样品10 g， 添加标准品(50uL， 1mg/L)进行上述样品前处理过程，马验结果如下表-3所示。回收率在80~110%之间， RSD 值小于15%，符合回收率以及相对标准偏差的要求。 表-3加标回收率及 RSD值 序号 化合物 R1 R2 R3 Avg (%) RSD 1 a-六六六 107.1 99.4 102.7 103.0 3.9 2 六氯苯 94.4 86.1 102.1 94.2 8.0 3 阿特拉津 104.7 98.5 98.1 100.4 3.7 4 β-六六六 112.9 105.7 101.3 106.6 5.9 5 6-六六六 110.5 103.1 101.2 104.9 4.9 6 y-六六六 109.7 102.4 102.8 105.0 4.1 7 乙烯菌核利 103.4 104.0 100.9 102.8 1.6 8 七氯 103.7 97.4 103.5 101.5 3.6 9 艾氏剂 99.5 94.3 101.6 98.5 3.8 10 三唑酮 103.6 97.5 93.2 98.1 5.2 11 腐霉利 103.5 101.7 103.6 103.0 1.1 12 丁草胺 102.0 101.2 108.6 103.9 4.1 13 a-硫丹 106.8 102.5 101.8 103.7 2.7 14 p，p-DDD 87.2 95.2 75.0 85.8 11.9 15 狄氏剂 105.4 101.4 101.1 102.6 2.4 16 异狄氏剂 100.7 96.8 104.8 100.8 4.0 17 β-硫丹 107.2 105.3 104.0 105.5 1.6 18 p，p-DDE 101.0 101.8 99.5 100.8 1.2 19 p，p-DDT 81.5 80.3 85.1 82.3 2.5 20 o， p -DDT 86.1 79.0 96.0 87.0 9.8 21 异菌脲 90.5 89.0 87.2 88.9 1.6 22 胺菊酯 89.9 96.0 84.4 90.1 5.8 23 甲氰菊酯 97.3 99.4 110.6 102.4 7.2 24 氯菊酯 98.4 96.5 105.7 100.2 4.9 25 氟氯氰菊酯 104.3 107.1 107.3 106.2 1.7 26 氯氰菊酯 97.3 99.4 100.6 99.1 1.7 27 氟戊氰菊酯 93.0 94.2 109.2 98.8 9.0 28 氰戊菊酯 95.9 95.8 106.4 99.4 6.1 29 溴氰菊酯 101.5 105.0 107.6 104.7 3.0 在将乙腈浓缩至近干时，需要把握好浓缩程度，剩余乙腈过多会造成净化时过多的杂质被洗脱；而如果乙腈全部被蒸干则会极大的影响部分目标物的回收率。，一般情况下以看不到明显流动的乙 采用 AH-30全自动均质器及 Fotector Plus 高通量全自动固相萃取仪搭配 AutoEVA-60 全自动平行浓缩仪及 Auto Prep 200全自动液体样品处理工作站的前处理方法，该实验的准确性、重复性均满足要求，，说明此方法能够用于《NY/T 761-2008 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》对莴苣中29种有机氯和拟除虫菊酯农药的测定。 采用 AH-30 全自动均质器通量高，可兼容不同体积规格的离心管。只要设置好方法长，一键完成样品均质并自动清洗刀头。Fotector Plus 高通量全 全自动液体样品处理工作站标液配制 全自动均质器均质 腈为准。 洗脱液浓缩时，浓缩体积不能小于0.5mL， 否则易挥发的农药(如六六六等)会损失，造成回收率降低。 自动固相萃取仪对样品进行检测能同步进行6个样品净化，连续自动处理60个样品，做样通量高。Auto Prep 200 全自动液体样品处理工作站可实现混标、标准曲线的自动配置，全程无需人为值守，让实验人员远离有毒有害的化学物质，保护身体健康。AutoEVA-60全自动平行浓缩仪处理通量高，60个样品可同时进行氮吹，实验平行性好；而且采用氮吹针自动追随液面的设计，无需手动调节氮吹针且耗气量小，省时省力。本解决方案可大幅度减少了工作人员的工作量，提高工作效率。 高通量全自动固相萃取仪净化 全自动平行浓缩仪浓缩 Raykol 睿科集团股份有限公司 RayKol Group Corp.，Ltd. 网址： www.raykol.com 电话：400-885-1816 邮箱： info@raykol.com 本文中的信息、说明和技术指标如有变更，恕不另行通知◎睿科集团股份有限公司 2021年9月版 网址：www.raykol.com邮箱： info@raykol.com热线： 邮箱： info@raykol.com热线：址：www.raykol.com 本文参考《NY/T 761-2008蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯 类农药多残留的测定》用乙腈提取莴苣中的有机氯及拟除虫菊酯类农药，加入氯化 钠使提取液中乙腈与水分离，取乙腈层浓缩后用正己烷溶解，用睿科Fotector Plus全 自动固相萃取系统进行净化，洗脱液经浓缩后供GC/MS检测，外标法定量。当加标 浓度为0.05 mg/kg时，回收率在80~110%之间，RSD值小于15%。说明本方法能够准 确、有效地测定莴苣中的29种有机氯及拟除虫菊酯类农药。