氨基酸中定量检测方案(液相色谱仪)

高效液相色谱分析仪 Nexera XR/RF-20AXS News岛津SHIMADZUhttp：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行行：2021年3月400-650-0439 ApplicationNews 使用 HPLC-荧光检测器进行氨基酸自动柱前在线衍生的定量方法 01-00117-CN 大城真爱 对用户的好处 氨基酸的定量结果重复性很好。 通过使用 Nexera XR 配置的自动预处理功能，可以简便地分析柱前衍生化氨基酸。 可在一个周期24分钟内完成21种氨基酸的分析。 11简介 表1-2梯度洗脱程序 时间 (min) A. 浓度 B.浓度 C. 浓度 0 95 5 0 0.2 93 7 0 1 93 7 0 4 87 13 0 5 0 15 85 7.5 0 30 70 12 0 35 65 14 0 45 55 14.01 0 95 5 16.99 0 95 5 17 5 95 0 18 5 95 线性和重现性 各氨基酸在100(umol/L)的浓度范围内的线性(r，相关系数)均为0.999以上，结果良好。另外，25umol/L浓度标样连续进样(n=6)的保留时间和峰面积的相对标准偏差如表2所示。 表2保留时间和峰面积结果(%RSD， n=6) 保留时间 面积 保留时间 面积 (%RSD) (%RSD) (%RSD) (%RSD) Asp 0.46 0.55 GABA 0.07 0.73 Glu 0.14 0.57 Met 0.03 0.50 Asn 0.13 0.72 Val 0.04 0.52 Ser 0.11 0.53 Cys 0.03 0.84 Gln 0.08 0.72 Phe 0.03 0.50 His 0.07 2.49 lle 0.04 0.44 Gly 0.08 0.75 Leu 0.05 0.43 Thr 0.08 0.68 Lys 0.03 3.85 Arg 0.10 3.07 Hy-Pro 0.03 3.13 Ala 0.05 0.77 Pro 0.04 5.09 Tyr 0.05 0.59 1.天冬氨酸2.谷氨酸3.天冬酰胺4.丝氨酸5.谷氨酰胺6.组氨酸7.甘氨酸8.苏氨酸9.精氨酸10.丙氨酸11.酪氨酸 12.GABA 13.蛋氨酸14.缬氨酸15.胱氨酸16.苯丙氨酸17.异亮氨酸18.亮氨酸19.赖氨酸20.羟脯氨酸21.脯氨酸 图121种氨基酸组分的同时分析(各25 umol/L)上： Ch1 (Ex. 350 nm， Em. 450 nm) 下： Ch2(Ex. 266 nm， Em. 305 nm) 应用新闻 M310中介绍了使用 GCMS-TQTM 8040 NX 及 SmartMetabolites DatabaseTM， C238中介绍了使用 LCMS-8060 NX及LC/MS/MS 方法包关于代谢物 ver. 2的综合性分析食品所含组分的案例。其旨在区分食品的基础上，探索特殊组分。另一方面，掌握特殊组分后，使用本文介绍的方法可更加稳定简便地计算该差异的定量值。 与各条应用新闻相同，对2种番茄汁(有/无记载使用番茄的品种)、葡萄酒和无酒精葡萄酒进行了定量，结果如表3、4及图2、3所示。用水稀释了离心分离番茄汁后的上清液，用水稀释了葡萄酒和无酒精葡萄酒。 表32种番茄汁的定量值(mmol/L) 有记载使用品种 无记载 使用品种 有记载使用品种 无记载使用品种 Asp 11.06 11.74 GABA 12.93 9.97 Glu 17.77 16.66 Met 0.30 0.31 Asn 6.53 6.80 Val 0.64 0.56 Ser 2.55 2.04 Cys - Gln 0.06 0.13 Phe 1.80 1.90 His 0.95 0.90 lle 0.71 0.61 Gly 0.89 0.85 Leu 0.75 0.67 Thr 1.97 1.80 Lys 0.90 0.77 Arg 0.83 0.68 Hy-Pro - Ala 7.01 6.91 Pro 0.73 0.47 Tyr 0.46 0.44 表4葡萄酒和无酒精葡萄酒的定量值(mmol/L) 葡萄酒 无酒精 葡萄酒 葡萄酒 无酒精葡萄酒 Asp 0.67 0.56 GABA 1.12 2.69 Glu 0.64 0.86 Met 0.15 0.12 Asn 0.25 0.22 Val 0.43 0.40 Ser 0.43 0.74 Cys - - Gln 0.00 0.00 Phe 0.34 0.36 His 0.27 0.44 lle 0.19 0.18 Gly 0.83 0.20 Leu 0.51 0.37 Thr 0.42 0.69 Lys 0.56 0.23 Arg 0.35 6.74 Hy-Pro 0.25 0.05 Ala 1.74 2.20 Pro 41.06 6.77 Tyr 0.18 0.22 各条应用新闻中有特征的组分与其他组分相比，定量值差异较大。 结论 本文介绍了将使用 HPLC-荧光检测器进行氨基酸自动柱前在线衍生的分析方法适用于定量氨基酸的案例。 本系统在保留时间、峰面积上具有狼嚎的重复性，使您可以稳定使用。此外，还可以进行氨基酸的自动柱前在线衍生，因此使用简便。基于这些优点，在通过其他机型综合性地探索组分后，需要进行定量时，推荐您使用 HPLC-荧光检测器。 mV 2 7500 ：有记载使用番茄的品种 0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 min 图3葡萄酒和无酒精葡萄酒的色谱图 岛津应用云 (上段：各组100倍稀释样品在 Ch1的分析结果、下段：100倍及200倍稀稀样品在Ch2 的分析结果) Nexera、Shim-pack、GCMS-TQ 及 Smart Metabolites Database 是岛津制作所株式会社在日本和其他国家的商标。 背 岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司 *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 ( 如有变动，恕不另行通知。 ) 本文介绍了将使用HPLC-荧光检测器进行氨基酸自动柱前在线衍生的分析方法适用于定量氨基酸的案例。本系统在保留时间、峰面积上具有狼嚎的重复性，使您可以稳定使用。此外，还可以进行氨基酸的自动柱前在线衍生，因此使用简便。基于这些优点，在通过其他机型综合性地探索组分后，需要进行定量时，推荐您使用HPLC-荧光检测器。