药品中酮康唑有关物质检测方案

2020版《中国药典》酮康唑有关物质的分析方案三 CAPCELL PAK C18 MG S5 酮康唑的化学结构 酮康唑为咪唑类抗真菌药，其作用机制为抑制真菌细胞膜麦角甾醇的生物合成，影响细胞膜的通透性，抑制其生长。酮康唑可用于治疗浅表和深部真菌病，如皮肤和指甲癣、阴道白色念珠菌病、胃肠真菌感染等，以及由白色念珠菌、类球孢子菌、组织胞浆菌等引起的全身感染。 大曹三耀技术中心按照《2020版中国药典》酮康唑有关物质的分析方法，同时也参考了欧洲药典和美国药典，优先选用粒径为 3um，4.6×100mm 规格的色谱柱，色谱条件流速设为 2mL/min。 2020 版药典系统适用性要求：酮康唑峰的保留时间约为6分钟，酮康唑峰与盐酸洛眠丁胺峰的分离度应大于 15。 根据以上要求，我们制定了三套分析方案，保留时间、分离度均能满足2020版药典要求；通过调整柱长、流速、温度，降低了分析压力的同时，仍能保持良好的分离结果。 推荐色谱柱 货号 酮康唑保留时间 酮康唑与盐酸洛哌丁胺分离度 分析压力 CAPCELL PAK C18 AQS3； 4.6×100mm F92154 5.7min 19.8 25MPa CAPCELL PAK C18 MGS3； 4.6×75mm F90806 5.6min 23.7 20MPa CAPCELL PAK C18 MGS5； 4.6×100mm F90102 6.1min 19.1 15MPa 方案案 CAPCELL PAK C18 AQ S3 CAPCELL PAK C18 AQ S3 色谱图 HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 AQ S3；4.6mm×100mm 流动相：A：0.34%四丁基硫酸氢铵 B：乙腈 B(%)：5%(0min)→50%(10min)→50%(15min)→5%(17min)→5%(22min) 流速：2.0mL/min 柱温：30℃ 检测：PDA220nm 进样量：10uL 样品：0.05mg/mL(酮康唑样品、盐酸洛哌丁胺各 0.05mg/mL， 甲醇溶解稀释) 表一 CAPCELL PAK C18 AQ S3 积分表 峰号 保留时间 理论塔板数(USP) 分离度(USP) 拖尾因子 面积 面积% S/N 高度 1 5.656 67391 1.13 130985 44.98 9.73 41476 7.391 114366 19.87 1.13 160244 55.02 11.97 51013 总计 291229 100 92489 CAPCELL PAK C18MG S3 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S3；4.6mm i.d. ×75mm 流动相：A：0.34%四丁基硫酸氢铵安B：乙腈 B(%)： 5%(0min)-50%(10min)→50%(15min)→5%(17min)→5%(22min) 流速：1.5mL/min 柱温：30℃ 检测： PDA220nm 进样量：10uL 样品：0.05mg/mL(酮康唑样品、盐酸酒哌丁胺各0.05mg/mL， 甲醇溶解稀释) 表二 CAPCELL PAK C18 MG S3 积分表 峰号 保留时间 理论塔板数(USP) 分离度(USP) 拖尾因子 面积 面积% S/N 高度 1 5.633 79522 1.14 172955 25.72 44.06 60117 2 7.603 123858 23.69 1.11 216326 32.17 50.98 69553 总计 672557 100 291642 CAPCELL PAK C18 MGS5色谱图 HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6mm i.d.×100mm 流动相：A：0.34%四丁基硫酸氢铵安 B：乙腈 B(%)：5%(0min)→50%(10min)→50%(15min)→5%(17min)→5%(22min) 流速：1.5mL/min 柱温：40℃ 检测： PDA220nm 进样量：10uL 样品： 0.05mg/mL(酮康唑样品、盐酸洛哌丁胺各 0.05mg/mL，甲醇溶解稀释) 表三 CAPCELL PAK C18 MG S5 积分表 峰号 保留时间 理论塔板数(USP) 分离度(USP) 拖尾因子 面积 面积% S/N 高度 1 6.123 64522 1.08 172533 43.64 42.92 48977 2 8.006 100735 19.09 1.07 222829 56.36 52.5 59897 总计 395362 100 108873 2020版药典系统适用性要求：酮康唑峰的保留时间约为6 分钟，酮康唑峰与盐酸洛眽丁胺峰的分离度应大于15。 根据以上要求，我们制定了三套分析方案，保留时间、分离度均能满足2020版药典要求；通过调整柱长、流速、温度，降低了分析压力的同时，仍能保持良好的分离结果。 酮康唑有关物质分析 三套方案任选 方案一 CAPCELL PAK C18 AQ S3  CAPCELL PAK C18 AQ S3 色谱图 HPLC Conditions ：色谱柱：CAPCELL PAK C18 AQ S3;4.6mm×100mm流动相：A :0.34%四丁基硫酸氢铵  B :乙腈 B(%) : 5%(0min)→50%(10min)→50%(15min)→5%(17min)→5%(22min)流  速：2.0mL / min柱  温：30°C检  测：PDA 220nm进样量：10 μL样  品：0.05mg/mL（酮康唑样品、盐酸洛哌丁胺各0.05mg/mL，甲醇溶解稀释）表一 CAPCELL PAK C18 AQ S3积分表 方案二 CAPCELL PAK C18 MG S3  CAPCELL PAK C18 MG S3 HPLC Conditions ：色谱柱：CAPCELL PAK C18 MG S3; 4.6mm i.d. ×75mm流动相：A :0.34%四丁基硫酸氢铵  B :乙腈 B(%) : 5%(0min)→50%(10min)→50%(15min)→5%(17min)→ 5%(22min)流  速：1.5mL / min柱  温：30°C检  测：PDA 220nm进样量：10 μL样  品：0.05mg/mL（酮康唑样品、盐酸洛哌丁胺各0.05mg/mL，甲醇溶解稀释） 表二 CAPCELL PAK C18 MG S3 积分表 方案三 CAPCELL PAK C18 MG S5  CAPCELL PAK C18 MG S5 色谱图 HPLC Conditions ：色谱柱：CAPCELL PAK C18 MG S5; 4.6mm i.d. ×100mm流动相：A :0.34%四丁基硫酸氢铵  B :乙腈   B(%) : 5%(0min)→50%(10min)→50%(15min)→5%(17min)→5%(22min)流  速：1.5mL / min柱  温：40°C检  测：PDA 220nm进样量：10 μL样  品：0.05mg/mL（酮康唑样品、盐酸洛哌丁胺各0.05mg/mL，甲醇溶解稀释） 表三 CAPCELL PAK C18 MG S5积分表