乳酸菌素中蛋白质含量检测方案(定氮仪)

Manon海能仪器民族仪器 品质典范 海能仪器：乳酸菌素中蛋白质含量的测定(凯氏定氮法) 前言 乳酸菌素是由乳酸菌产生的一种具有活性的多肽或蛋白质。大部分细菌素对近缘关系的细菌有抑制作用，少数细菌素抑菌谱很广。乳酸菌除了本身对人体有健胃、整肠等保健功能外，其代谢过程中会产生许多有益物质。 2实验部分 2.1原理 有机态氮在浓硫酸和催化剂的共同作用下，转化为氨态氮。加碱蒸馏后，用硼酸吸收后，再以硫酸标准滴定液进行滴定。 2.2 仪器与试剂、器具 2.2.1K1100F全自动凯氏定氮仪(济南海能仪器股份有限公司)。 2.2.2 SH420F石墨消解仪(济南海能仪器股份有限公司)。 2.2.3硫酸分析纯， c(HCL)=0.1mol/L，标准滴定液。 2.2.4硼酸分析纯，质量分数2%。 2.2.5氢氧化钠分析纯，质量分数40%。 2.2.6溴甲酚绿-甲基红混合指示剂将溴甲酚绿乙醇溶液(1g/L)与甲基红乙醇溶液(1g/L)按 5：1体积比临时混合摇匀备用。 2.2.7催化剂：硫酸钠和硫酸酸以10：1的比例混合备用 2.2.850ml量筒 2.2.9称量瓶 2.3实验部分 2.3.1取样：取 0.6g左右的样品，用无屑称量纸包住投入消化管中，加混合催化剂1g，再沿瓶壁滴加硫酸8.0ml. 2.3.2消解：消解：在凯氏烧瓶口放一小漏斗并使凯氏烧瓶呈45°斜置，用直火缓缓加热。使溶液的温度保持在沸点以下，等泡沸停止，强热至沸腾，等溶液成澄明的绿色后，除另有规定外，继续加热30分钟，放冷。 2.3.3稀释：将溶液用45ml水转移至50ml容量瓶中，加水定容。精密量取2ml加入消化管中。 2.3.4待消化管内溶液冷却至室温后，将消化管放置于定氮仪上。定氮仪设置程序如下： 稀释水：：10ml 硼酸：25ml碱：10m 蒸馏时间：：5min 2.3.5仪器自动滴定并给出计算结果。 3结果与讨论 N%=1.401×Mx(V-V)氮含量 W蛋白质含量 P%=N%×6.25 式中：：MM-标准酸摩尔浓度(mol/L) (一般使用0.05mol/L) W-样品质量(g) VO-空白样滴定标准酸消耗量(mL)V-样品滴定标准酸消耗量(mL)，精确到小数点后四位 6.25蛋蛋白质系数 编号 质量 体积 氮含量 蛋白质含量 平均 乳酸菌素 1 0.6000g 1.8252ml 5.0492% 32.2142% 32.1543% 2 0.6000g 1.8272m1 5.0554% 32.2532% 3 0.6000g 1.8140m1 5.0150% 31.9956% 注意事项： 1.由于样品消解完要进行定容，要注意将样品转移干净，不要有残留。 2.消解过程中，注意不要将硫酸烧干。 -- --