异甘草酸镁中有关物质检测方案(液相色谱柱)

Jul 4，2016LC Application Lab， Shiseido ChinaEconomic Technological Development Zone，Beijing， China 100176Phone 010-6785-6801，FAX 010-6785-6882 No.31， BDA International Business Park， 2 Jing Yuan Street， Beijing 异甘草酸镁液相分析 技术中心依照客户提供的国家药品标准方法，使用资生堂 CAPCELL PAK C18 MGII S5；4.6mm i.d. ×250mm， CAPCELL PAK C18 AQ S5；4.6mm i.d.×250mm 和 SPOLAR C18 S5；4.6mmi.d.×250mm三款色谱柱进行异甘草酸镁检查项下有关物质试验。 图1 MGII， AQ 及 SPOLAR 色谱柱异甘草酸镁有关物质试验整体色谱图 图2 SPOLAR 色谱柱异甘草酸镁有关物质试验局部放大色谱图 HPLC Conditions 色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGII S5；4.6mm i.d.x250mm CAPCELL PAK C18 AQ S5；4.6mm i.d.×250mm SPOLAR C18 S5；4.6mmi.d.×250mm 流动相： Acetonitrile， 13.6 g/L solution of potassium phosphate monobasic use potassium hydroxide adjust pH=7.0(20：80 V/V) 流速：1.0mL/min温检 度：35℃ 测： UV 250nm 进样量：20pL(2mg/mL) 试验结果如图1所示， SPOLAR， MGII， AQ三款色谱柱，保留能力依次增强，但只有 SPOLAR 色谱柱对于峰前杂质有分离趋势(图2)，但远没有达到分离要求，故接下来我们通过调节柱温尝试改善分离度。 图3 SPOLAR 色谱柱不同温度下异甘草酸镁有关物质试验整体色谱图 图4 SPOLAR 色谱柱不同温度下异甘草酸镁有关物质试验局部放大色谱图 HPLC Conditions 色谱： SPOLAR C18 S5；4.6mmi.d.×250mm 流动相： Acetonitrile， 13.6 g/L solution of potassium phosphate monobasic use potassium hydroxide adjust pH=7.0(20：80 V/V) 流速：1.0 mL/min温检 度：35℃，30℃， 25℃ 测：UV 250nm 进样量：20pL(2mg/mL) 我们分别考察了35℃，30℃，及25℃温度下的分离情况，见图3和图4。随着温度的降低，发现在30℃时分离度有所改善，但在25℃时由于保留时间延长色谱峰展宽分离度反而下降。在没有杂质单标的情况下很难继续考察其他色谱条件对于分离的影响，如果客户想进一步进行考察，可以提供杂质单标以便继续分析。 刘朝远郭彦丽