化学药中有效成分含量分析检测方案

中国无机分析化学Chinese Journal of Inorganic Analytical ChemistryVol.2， Supplement 11~第2卷增刊12012年9月 等：离子色谱脉冲安培法测定硫酸阿米卡星增刊189 doi：10.3969/j. issn.2095-1035.2012.z1.038 离子色谱脉冲安培法测定硫酸阿米卡星 张岩 孙郑冬” (1河北省食品质量监督检验研究院，石家庄050091； 2瑞士万通中国有限公司中心实验室，北京100192) 摘 要 根据欧洲药典更新了硫酸阿米卡星的测试方法，采用新的壁射式脉冲安培检测器获得了相关系数达0.9999线性工作曲线和0.40 mg/L的方法检出限。同时，讨论了测试过程中需注意的淋洗液配制过程并优化了脉冲安培检测器参数。 关键词 离子色谱法；硫酸阿米卡星；脉冲安培检测器；欧洲药典 中图分类号：O657.7+5；TH833 文献标识码：A 文章编号：2095-1035(2012)S0-0000-00 1引言 硫酸阿米卡星是一种氨基糖苷类抗生素，对多数肠杆菌科细菌有良好的作用。中国药典采用薄层色谱法，美国药典 USP 采用阴离子交换色谱法，采用与欧洲药典相同分离机理及反相液相色谱对目标物质及相关杂质进行分离，并改进电化学检测池，获得较好的分离和检出。 2实验部分 2.1 仪器与试剂 850 Professional 离子色谱仪(高压梯度泵)，889 自动进样器，872柱后衍生高压泵，壁射式安培检测池，Au工作电极，Ag/AgCl参比电极。 Na2SO (Sigma Aldrich 71960)、KHPO(Flu-ka 60220)、H，PO(Fluka79620)、NaOH30%(Merck11.05589.0250)、CHgO (Sigma Aldrich34865，四氢呋喃)、辛烷磺酸钠(优级纯，国药集团化学试剂有限公司)Cg H1 NaO；S· HzO (Fluka74884一10g，优级纯，国药集团化学试剂有限公司)；超纯水(电阻率≥18.2 M·cm)。 2.2 色谱条件 色谱柱：Supelco Discovery C18(5 um，250 mm×4.6 mm)；柱温：40℃，20 uL定量环。淋洗液A：辛烷磺酸钠(1.95 g/L)+NazSO(20 g/L)+四氢 呋喃(1.4%)+KHzPO(5%)；淋洗液B：辛烷磺酸钠(1.95 g/L)+ NazSO(28g/L)+四氢呋喃(1.4%)+KH，PO4(5%)，上述A、B相溶液均用磷酸调整pH值到3.0并脱气过滤除二氧化碳。柱后衍生试剂：NaOH(400 mmol/L)，使用除二氧化碳纯水配置，流速0.3 mL/min。 表1 梯度淋洗条件 时间/min 淋洗液A/%淋洗液B/% 流速/(mL·min-1) 0~3 100 0 1.0 3~38 100~30 0~70 1.0 38.1~68 0 100 1.0 68~78 100 0 1.0 检测器参数：PAD(脉冲安培模式)；E1：0.05V；E2：0.75 V；E3：-0.15 V； t：0.3 s；t2：0.05 s；ts：0.2s；程程：200uA；检测器温度：35℃。 2.3 标准溶液配制 分别配制含0.66、1.32、2.64、6.60 mg/L4组标准溶液，另取33 mg硫酸阿米卡星溶解到50 mL容量瓶中作为样品溶液(TS)待稀释。 3 结果与讨论 3.1 工作曲线线性相关性 依次测试2.3配制的4点标准溶液，得到线性工作曲线方程如下：A=1.61+0.45C(其中A为峰面积nA·min，C 为样品浓度 mg/L)，线性相关度 ( 收稿日期：2012-07-12 修回日期：2012-08-06 ) ( 作者简介：张岩，男，法医学博士后，主要从事食品安全理论研究。E-mail：zhan g yan@nepp. com. cn ) 为0.9999. 3.2 样品分析 取5mL2.3中的待稀释液定容至10mL得到待测液。在待测液中分别加入不同浓度的标准溶液进行测定。样品测试过程中淋洗液制备需要注意除气，并且现用现配，这有利于减小背景值并获得稳定的基线和更小的噪音。样品谱图见图1。从测定结果得出样品的回收率为89%~92%。 图1 样品溶液测试谱图 4 结论 建立了离子色谱脉冲安培法测定硫酸阿米卡星的方法，根据3倍信比，计算得到方法的检测限为0.40 mg/L。方法定量准确、可靠。 ( 参考文献 ) ( [1]李茜，刘英，韩春霞等.离子色谱法测定硫酸阿米卡星原料及其制剂的有关物质[J].药物分析杂志，2012(2)： 318-322. )