新隐患！动物源性食品中阿奇霉素测定整体解决方案……

动物源性食品中阿奇霉素的测定摘要：本方法采用乙睛水溶液提取动物源性样品中的阿奇霉素药物残留，经低温离心，上清液用增强型脂质去除净化管(Anavo HMR-lipid)净化，液相色谱-质谱/质谱测定，同位素内标法定量。在卤鸭肝加标10μg/kg水平时，回收率在85.8%-87.3%之间；在羊肉加标10μg/kg水平时，回收率在89.8%-90.4%之间，在熏鸭肉加标10μg/kg水平时，回收率在82.7%-82.9%之间。1、标准品配制1.1标准储备液:质量浓度为 1000 mg/L，-20℃以下避光贮存，保存期为 12 个月。1.2标准中间液:准确量取 0.1 mL 阿奇霉素标准储备液,用甲醇定容至 10 mL,标准中间液质量浓度为 10 mg/L，-20℃以下避光贮存，保存期为 12 个月1.3内标标准中间液:准确量取 0.2 mL 阿奇霉素-D3 标准储备液，用甲醇定容至 10 mL，标准中间液质量浓度为 2 mg/L，-20℃以下避光贮存，保存期为 6 个月。1.4标准使用液:准确吸取标准中间液 0.1 mL，用乙睛定容至 10 mL，标准使用液质量浓度为 0.1 mg/L，4℃贮存，保存期为 30 天。1.5内标标准使用液:准确吸取内标标准中间液 1 mL，用甲醇定容至 10 mL标准使用液质量浓度为 0.2 mg/L，4℃贮存，保存期为 30 天。2、试样提取称取均质试样 2.0g(精确到 0.01 g)，置于 50 mL 聚丙烯离心管中，准确加入100 μL 内标标准使用液 ，加入2mL 1%甲酸水涡旋混匀，再加入8mL 1%甲酸乙睛溶液，涡旋混合 30s，超声提取 10min。10000r/min离心 10 min(温度低于5℃) 。上清液待净化。3、净化取前述上清液1mL于2mL 净化管中（内有50 mg Anavo HMR-lipid，货号：AN50E025），震荡 1min，10000 r/min 离心5min，取上清液用于 UPLC-MS/MS测定。4、仪器参考条件：色谱柱：Leosil XP C18, 1.7µm, 2.1*100mm流动相：A 0.1％甲酸水  B 乙腈流  速：0.3 mL/min    进样量：5μL  柱温：40 ℃梯度设置时间/min流速/（mL/min）A/％B/％0.000.370302.00.370305.00.350506.00.320806.50.301008.00.301008.50.37030100.37030质谱条件：电喷雾离子源: 离子源温度: 150°C。毛细管电压: 2.5 kV脱溶剂气温度: 450° C。脱溶剂气流量: 1000 L/h。扫描模式:正离子多离子反应监测模式(MRM)。其它质谱参数见下表：化合物母离子（m/z）定量离子(碰撞能量 eV)定性离子锥孔电压(V)阿奇霉素749.5158(38)591.5(30)25阿奇霉素-D3752.5158(38)594.5(30)255、添加回收结果加标量：10 μg/kg实测值（μg/kg）卤鸭肝羊肉熏鸭肉样品18.739.048.29样品28.558.988.276、 谱图卤鸭肝样品 Anavo HMR 50mg熏鸭肉样品 Anavo HMR 50mg羊肉样品 Anavo HMR 50mg阿奇霉素检测关键耗材货号产品名称描述AN50E025Anavo 高效除脂净化管Anavo Oue Tube, 50 mg HMR-Lipid 2 mL. 100/PKAN80A006Leosil XP杂化硅胶UPLCLeosil XP C18, 1.7µm, 2.1*100mmDRE-C10385990阿奇霉素25mgTRC-A927002-10mg阿奇霉素-d310mg