土壤中硝态氮检测方案(紫外分光光度计)

TEL-400-616-4686 美析仪器MACYLAB INSTRUMENTTEL-400-616-4686 测定土壤硝态氮的应用方案((紫外分光光度法) 方法原理 土壤浸出液中的 NO-在紫外分光光度计波长210nm 处有较高的吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH-、CO32-、FHCO3、、NO2-和有机质等外，吸光度均很小。将浸出液加酸中和酸化，即可消除 OH-、CO32-、HCO3的干扰。NO2-一般含量极少，也很容易消除。因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO3-的含量。 待测液酸化后，分别在 210nm 和275nm处测定吸光度。A210 是NO；和以有机质为主的杂质的吸光度；A275只是有机质的吸光度，因为 NO3~在 275nm 处已无吸收。但有机质在275nm处的吸光度比在 210nm 处的吸光度要小R倍，故将A275校正为有机质在 210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得 NO3 在 210nm 处的吸光度(OA)。 仪器设备及试剂 美析UV-1800紫外可见分光光度计； 石英比色皿 往复式或旋转式振荡机，满足180r/min 土 20r/min 的振荡频率或达到相同效果； H2SO4溶液(1：9)：取 10mL 浓硫酸缓缓加入90mL 水中。 氯化钙浸提剂[c (CaCl2 .6H20)=0.01mol/L-1]：称取 2.2g氯化钙(CaCl2.6H2O)溶于水中，稀释至1L； 硝态氮标准贮备液[p(N)=100ug.mL1]：准确称取 0.7217g经105℃~110C烘2h 的硝酸钾(KNO3，优级纯)溶于水，定容至IL， 存放于冰箱中； 硝态氮标准溶液[p (N)-10u g.mL]：测定当天吸收 10.00mL 硝态氮标准贮备液于100mL容量瓶中用水定容。 操作步骤 称取10.00g土壤样品放入200mL 塑料瓶中，加入50mL氯化钙浸提剂，盖严瓶盖，摇匀，在振荡机上于20℃~25℃振荡 30min (振荡频率：180r/min 土 20r/min)， 干过滤。 吸取 25.00mL待测液于 50mL三角瓶中，加1.00mL1：9H2SO4溶液酸化，摇匀。用滴管将此液装入1cm 光径的石英比色槽中，分别在210nm 和275nm 处测读吸光值(A210和A275)，以酸化的浸提剂调节仪器零点。以 NO3的吸光值(△A)通过校准曲线求得测定液中硝态氮含量。 上海美析仪器有限公司 NO3的吸光值(△A)可由下式求得： △A=A210-A275*R 式中R为校正因数，是土壤浸出液中杂质(主要是有机质)在 210nm 和275nm处的吸光度的比值。其确定方法为： A210是波长210nm 处浸出液中 NO；的吸收值(A210)与杂质(主要是有机质)的吸收值(A210杂)的总和，即A210=A210硝十A210杂得出A210杂=A210-A210先。选取部分土样用 酚二磺酸法测得 NO3 -N的含量后，根据土液比和紫外法的工作曲线，即可计算各浸出液应有的A210硝值，即可得出A210。 A275 是浸出液中杂质(主要是有机质)在275nm处的吸收值(因为NO；在该波长处已无吸收)，它比A210杂小R倍，即A210杂=R.A275，得出校正因数R=A210杂/A275。 各不同区域可根据多个土壤测定R值的统计平均值，作为其他土壤测试 NO3 -N 的校正因数，其可靠性依从于被测土壤的多少，测定的土壤越多，可靠性越大。 校准曲线的绘制：分别吸取 10ug.mL'NO3-N标准溶液0， 1.00，2.00，4.00，6.00， 8.00mL，用氯化钙浸提剂定容至50mL，即为0、0.2，0.4，0.8，1.2，1.6ug.mL1的标准系列溶液。各取 25.00mL 于 50mL三角瓶中，分别加 ImL1：9H2SO4溶液摇匀，用标准系列溶液的零浓度调节仪器零点测A210，计算A210 对 NO3-N浓度的回归方程，：或者绘制工作曲线。 结果计算 土壤硝态氮(N) 式中：p一查校准曲线或求回归方程而得测定液中 NO3-N的质量浓度， ug. mL1； V_浸提剂体积， mL(50mL)； D-一浸出液稀释倍数， 若不稀释则 D=1； 103和1000-分别将 ug 换算成 mg 和将g换算为kg； m一土壤质量，g； 注意事项 1)土壤硝态氮含量--般用新鲜样品测定，如需以硝态氮加铵态氮反映无机氮含量，则可用过 2mm 筛的风干样品测定，但需标明为风干基。 2)一般上壤中NO2含量很低，不会干扰 NO；的测定。如果 NO2 含量高时，可用氨基磺酸消除(HNO2+NHSO3H=N2+H2SO4+H20)， 它在 210nm 处无吸收，，不干扰 NO3.测定。 上海美析仪器有限公司 3)浸出液的盐浓度较高，操作时最好用滴管吸取注入比色皿中，尽量避免溶液溢出比色皿外，污染比色血的外壁，影响其透光性。 4)大批样品测定时，可先测完各液(包括浸出液和标准系列溶液)的A210值， 再测A275值，以避免逐次改变波长所产生的仪器误差。 5)如需同时测定土壤 NH4*-N，可选用 2 mol. LI KC1 或 1 mol. LINaCl 溶液制备待测液。但2mol.L1 KCI 溶液本身在 210nm 处吸光度较高，因此同时测定土壤 NH4*-N 和NO3-N时，可选用吸光度较小的1 mol.L-1NaCl 溶液为浸提剂。 6)如果吸光度很高(A>1时)，可从比色槽中吸出--半待测液，再加一-半水稀释，重重新测读吸光度，如此稀释直至吸光度小于0.8。再按稀释倍数，用氯化钙浸提剂将浸出液准确稀稀测定。 7)根据北京和河北石灰性15个土壤样品的测试结果，校正因素(R)的平均值为3.6，不同土类的R值略有差异，各地可根据主要土壤情况进行校验，求出当地土壤的R值。 仪器参数 UV-1800双光束紫外可见分光光度计 UV-1800系列采用双光束光学系统，成功实现了高精度和高可靠性测量的完美结合，可满足各种应用的要求，可用在生物研究、生物工业、药物分析、制药、教学研究、环保、食品卫生、临床检验、卫生防疫等领域 宽广的波长范围，可满足各个领域对波长范围的要求 全自动的设计理念，实现了最简单的测量手段 大规模集成电路的设计大大提高了系统的扩展性和可靠性 改良优化的光路设计、进口光源和接收器造就了系统高性能和高可靠性 丰富的测量方法，具有波长扫描、时间扫描、多波长测定、多阶导数测定(选)、双波长、三波长(选)DNA蛋白质测量(选)等多种测量方法，可满足不同测量的要求，并可在6英寸大屏幕上直接显示 根据用户的要求可选配单孔架、手动四连架、手动八连架、自动八连架、玻璃支架、试管架、1cm比色架、5cm比色架、10cm比色架等 测量数据可通过打印机输出，具有USB接口 可断电保存测量参数和数据，方便用户使用 可通过PC软件控制实现光谱扫描等更精确和灵活的测量要求 测光方式 透过率、吸光度、浓度、能量 波长调节 自动调节 光度范围 -4~4A 显示方式 六英寸高亮度液晶显示屏 检测器 进口硅光二极管 光源 进口气灯，进口钨灯 电源 AC 220V/50Hz或110V/60Hz 功率 120W 仪器尺寸 560×450×230mm 主机净重 28Kg 关于我们 上海美析仪器公司简介 上海美析仪器有限公司(以下简称美析)，是一家具有自主知识产权的高新技术企业，美析的创业理念“科技-—因你改变”，并以此为企业宗旨，不断探究、果敢创新。特别是在分析测试仪器领域，不断开发出先进的产品，使美析成为优质仪器资源的供应者。 上海美析仪器有限公司 美析主营光谱类仪器可见分光光度计、紫外可见分光光度计、原子吸收光谱仪、超微量分光光度计、原子荧光光度计、ICP电感耦合等离子体发射光谱仪、ICP电感耦合等离子体质谱仪，目前，我们的产品已广泛应用于有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域。同时美析利用在产品机械结构、光学设计、电气应用和软软开发方面积累的丰富经验，结合市场的最新实际需求，近期将将续推出一批全新的分析类仪器。 美析的总部及生产基地设在上海，营销中心设在北京，并在江苏、上海、山东三地建有研发基地。为充分利用各地的智力资源，美析与国内外的部分科研单位也进行了深层次的科研合作，不断将科研成果转化为生产力。为更好的服务于广大客户，美析仪器国内设有12家办事机构，度身定制符合您需求的应用解决方案，提高产品的附加值。在不断服务国内用户的同时，美析也与20多个国家的分销机构建立了深度的战略合作关系。 美析主营光谱类仪器：可见分光光度计、紫外可见分光光度计 原子吸收光谱仪、原子荧光光度计、ICP-AES、ICP-MS生命科学仪器：超微量分光光度计、全自动核酸提取仪目前，我们的产品已广泛应用于 有机化学、无机化学、生物化学、医药、环保、冶金、石油、农业等领域 (美析仪器不仅仅只是一家高新技术认证企业，更通过了 CE 认证、FCC 认证、RoHS认证以及国内多项资质审查认证，并有着多项自行研发的光谱类专利版权等等) 上海美析仪器有限公司 上海美析仪器有限公司 土壤浸出液中的NO-在紫外分光光度计波长210nm处有较高的吸光度，而浸出液中的其它物质，除OH-、CO32-、 HCO3、 NO2-和有机质等外，吸光度均很小。将浸出液加酸中和酸化，即可消除OH-、CO32-、HCO3的干扰。NO2-一般含量极少，也很容易消除。因此，用校正因数法消除有机质的干扰后，即可用紫外分光光度法直接测定NO3-的含量。待测液酸化后，分别在210nm和275nm处测定吸光度。A210 是NO;和以有机质为主的杂质的吸光度;A275只是有机质的吸光度,因为NO3~在275nm处已无吸收。但有机质在275nm处的吸光度比在210nm处的吸光度要小R倍,故将A275校正为有机质在210nm处应有的吸光度后，从A210中减去，即得NO3在210nm处的吸光度(O A)。