猪肉、猪肝中地塞米松、倍他米松和阿托品检测方案(样品前处理)

猪肉、猪肝中地塞米松、倍他米松和阿托品的测定 （Copure® HLB Lim） Copure® HLB Lim柱，是采用特殊吸附剂装填而成的一款新型固相萃取柱。与传统SPE柱相比，它能更加快速有效地去除样品中脂肪、磷脂、色素等多种干扰物，减少基质效应；同时其极大地简化了前处理流程，省去活化、平衡步骤，样品经提取后直接过柱，节省大量时间及试剂，使前处理变得更加的简便高效。 本方案采用Copure® HLB Lim，对地塞米松、倍他米松和阿托品三种药物进行了加标验证，高中低三水平下，猪肉和猪肝样品的回收率在85%~110%，RSD＜10%,满足日常实验需求。 样品提取 准确称取粉碎均匀的样品2 g于干净离心管中，加入10 mL 0.2%甲酸乙腈:水=80:20（V:V）溶液，涡旋混匀后超声提取15 min，8000 r/min离心5 min，待净化。 样品净化（Copure® HLB Lim，200mg/3mL ） 取1.5 mL上述上清液过柱，收集流出液，取其中1 mL氮吹近干后用0.1%甲酸水定容至1 mL，过尼龙滤膜，上机。 基质标准曲线溶液的制备 选同类型空白肉类样品，按上述前处理方法进行操作，收集过柱流出液，取其中1 mL于干净离心管中，加入适量的标液后与样品一同氮吹复溶，配制成上机浓度分别为2 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L的标准曲线。 仪器条件 色谱条件 仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TSQ Endura） 色谱柱：Commasil® 兽残专用柱 (2.1 mm×100 mm，3 μm) 流动相：A：水（0.1 %甲酸）   B：甲醇：乙腈=2:8（0.1 %甲酸） 洗脱方式：梯度洗脱，见表1 流速：0.3 mL/min 柱温：35℃ 进样量：10 μL 表1 梯度洗脱程序 时间/min A/% B/% 0 98 2 3.0 85 15 6.0 65 35 8.5 5 95 9.0 98 2 10.0 98 2 质谱条件 离子源：HESI 电喷雾电压：3500 V 鞘气压力：40 arb 辅气压力：10 arb       离子传输管：380 ℃ 辅气温度：350 ℃ 表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子） 序号 名称 保留时间/min 母离子 子离子 1 阿托品 4.15 290.2 93.1、124.1* 2 倍他米松 8.18 393.1 355.1*、373.1 3 地塞米松 8.15 393.2 355.1、373.1* 实验结果 表3 36种兽残加标回收实验结果 目标物 猪肉 猪肝 10.0 μg/kg 50.0 μg/kg 100.0 μg/kg 10.0 μg/kg 50.0 μg/kg 100.0 μg/kg 回收率 （%） RSD（%） n=3 回收率 （%） RSD（%） n=3 回收率 （%） RSD（%） n=3 回收率 （%） RSD（%） n=3 回收率 （%） RSD（%） n=3 回收率 （%） RSD（%） n=3 阿托品 108 4.29 98.2 2.26 92.2 1.33 94.0 4.55 85.6 2.61 85.5 2.13 倍他米松 104 6.68 96.4 3.76 91.3 2.42 87.0 5.27 86.1 2.04 90.0 1.82 地塞米松 105 7.20 96.5 3.45 91.4 2.08 94.3 6.26 87.2 3.18 89.7 2.35 图1 添加水平为50 μg/kg时猪肉样品中地塞米松、倍他米松和阿托品总离子流图 图2 添加水平为50 μg/kg时猪肝样品中地塞米松、倍他米松和阿托品总离子流图 订购信息 货号 描述 包装 COHLB3200-Lim Copure®HLB Lim净化柱，200mg/3mL 50支/盒 SDC-3000-D biocomma® 多管涡旋混匀仪 1台/箱 SF250-22-NL 尼龙针式过滤器，直径25 mm，孔径0.22 μm，有机系 100个/盒 SC2-1 2 mL蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425 100个/盒 BN24 智能水浴氮吹 1台/箱 V2-AL 2 mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm，9-425 100个/盒 一样品提取准确称取粉碎均匀的样品2 g于干净离心管中，加入10 mL 0.2%甲酸乙腈:水=80:20（V:V）溶液，涡旋混匀后超声提取15 min，8000 r/min离心5 min，待净化。二样品净化取1.5 mL上述上清液过柱，收集流出液，取其中1 mL氮吹近干后用0.1%甲酸水定容至1 mL，过尼龙滤膜，上机。货号：COHLB3200-Lim三基质标准曲线溶液的制备选同类型空白肉类样品，按上述前处理方法进行操作，收集过柱流出液，取其中1 mL于干净离心管中，加入适量的标液后与样品一同氮吹复溶，配制成上机浓度分别为2 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L的标准曲线。四仪器条件【色谱条件】仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TSQ Endura）色谱柱：Commasil® 兽残专用柱 (2.1 mm×100 mm，3 μm)流动相：A：水（0.1 %甲酸）   B：甲醇：乙腈=2:8（0.1 %甲酸）洗脱方式：梯度洗脱，见表1流速：0.3 mL/min柱温：35℃进样量：10 μL表1 梯度洗脱程序【质谱条件】离子源：HESI电喷雾电压：3500 V鞘气压力：40 arb辅气压力：10 arb      离子传输管：380 ℃辅气温度：350 ℃表2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（*为定量离子）五实验结果表3  36种兽残加标回收实验结果图1 添加水平为50 μg/kg时猪肉样品中地塞米松、倍他米松和阿托品总离子流图图2 添加水平为50 μg/kg时猪肝样品中地塞米松、倍他米松和阿托品总离子流图六订购信息更多详情，敬请垂询