猪肉 肌肉 三文鱼中兽药残留检测方案(液相色谱柱)

食用肌肉组织中多种兽药多残留测定引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163 引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163食用肌肉组织中兽药的多残留测定 简介 目前，针对组织样品中多种兽药残留的LC/MS/MS检测，已经开发出优化的样品制备和分析方案。本研究选择了三种肌肉组织样品(猪肉、鸡肉和三文鱼)来证实该方法的适用性。用酸化乙腈/水溶剂处理样品，以沉淀蛋白质并提取目标兽药。然后使用Sep-Pak@C小柱或96孔板进行简单的SPE纯化。蒸发并复溶后，通过LC/MS/MS分析样品。从主要的兽药种类中选择具有代表性的化合物，包括四环素、氟氟诺酮、磺胺类、大环内酯、B-内酷胺、NSAID、类固醇和B-肾上腺素药物。 样品制备初步提取/沉淀 在一支50mL离心管中加入5g组织匀浆样品。加入10 mL 0.2%甲酸的80：20乙腈/水溶液。漩涡混合30秒，置于摇床上30分钟。在12000rpm下离心5分钟。 在提取/沉淀步骤中，大多数目标化合物都表现出良好的回收率，但同时还提取出了大量的脂肪。 SPE净化 取1 mL上清液(来自步步1)，使用Sep-PakC，g小柱或样品板进行SPE净化(有关SPE的详细信息，请参见图1)。 该步骤可以除去脂肪和非极性干扰物。 系统： ACQUITY UPLC 色谱柱： ACQUITY UPLC CSHMC， 1.7 pum， 2.1x 100 mm 流动相A： 0.1%甲酸水溶液 流动相B： 0.1%甲酸的乙腈溶液 进样体积： 7ul 进样模式： 部分定量环进样 柱温： 30℃ 弱清洗液： 10：90乙腈/水(600pL) 强清洗液： 50：30：40水/乙腈/IPA(200uL) 密封清洗液： 10：90乙腈/水 时间 流速 溶剂A 溶剂B 曲线 (min) (mL/min) 初始 初始 60 40 6 5 6 5 6 15 6 15 6 检测器： Xevo@ TO 电离模式： 电喷雾正离子 (仅氯霉素采用负离子模式) 150℃ 脱溶剂气温度： 500℃ 脱溶剂气流速： 1，000L/h 锥孔气流速： 30 L/h 碰撞气流速： 0.15 mL/min 数据管理： Masslynx 4.1版 结果 化合物 加标浓度 猪肉回收 鸡肉回收率三文鱼回收 率%(RSD%) %(RSD%) 率%(RSD%) (ng/g) n=5 n=6 n=6 卡巴氧 100.00 9(36) 17(14) 21(13) 氯霉素 100.00 57(20) 51(20) 89(2) 金霉素 100.00 42(11) 49(6) 54(7) 环丙沙星 100.00 30(21) 61(8) 88(2) 地塞米松 100.00 70(7) 61(8) 91(4) 恩诺沙星 200.00 106(4) 62(9) 90(2) 红霉素 10.00 36(9) 33(4) 43(8) 林可霉素 50.00 64(17) 59(10) 83(8) 苯唑西林 100.00 51 (4) 48(6) 55(4) 土霉素 100.00 51(8) 50(10) 60(5) 青霉素 50.00 46(7) 45(8) 54(9) 保泰松 100.00 16(16) 44(10) 38(8) 莱克多巴胺 300.00 74(7) 62(11) 88(3) 沙丁胺醇 100.00 71(14) 66(12) 78(7) 磺胺甲基嘧啶 100.00 63(5) 59(7) 82(3) 磺胺二甲嘧啶 100.00 67(5) 60(8) 84(3) 磺胺 100.00 74(21) 65(21) 74(11) 四环素 100.00 58(10) 53(8) 69(2) 泰乐霉素 20.00 47(11) 36(12) 63(14) 图2.红霉素加标浓度为10 ng/g的猪肉的典型LC-MS/MS色谱图(上方的图为主要MRM通道)。 描述 部件号 ACQUITY UPLC CSHC 1.7 pm， 2.1×100 mm 186005297 Sep-Pak Cg小柱，1 cc， 10 mg WATO23590 LCMS认证样品瓶 600000751CV ◎2013年沃特世公司。Waters、 ACQUITY UPLC、Xevo、Masslynx和Sep-Pak是沃特世公司的注册商标。CSH是沃特世公司的商标。 [ 参考资料：沃特世应用资料N[ 色谱柱： ACQUITY UPLC CSH™ C18, 1.7 μm, 2.1 x 100 mm流动相A： 0.1%甲酸水溶液流动相B： 0.1%甲酸的乙腈溶液进样体积： 7 μL进样模式： 部分定量环进样柱温： 30 ˚C弱清洗液： 10:90乙腈/水(600 μL)强清洗液： 50:30:40水/乙腈/IPA(200 μL)密封清洗液： 10:90乙腈/水梯度： 时间 流速 溶剂 A 溶剂 B 曲线(min) (mL/min) (%) (%)初始 0.4 85 15 初始2.5 0.4 60 40 63.9 0.4 5 95 64.9 0.4 5 95 65.0 0.4 85 15 67.0 0.4 85 15 6