污水中芬太尼类物质检测方案(液相色谱仪)

SSL-CA20-643Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-576 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn AOE 系统与 LCMS-8060NX联用分析污水中7种芬太尼类物质 LCMSMS-576 摘要：本文利用岛津 AOE 系统和三重四极杆质谱仪 LCMS-8060NX，建立了污水中7种芬太尼类物质的分析方法。该系统将样品富集、净化和分析高度集成，在22 min 内完样品的上样、富集、分离和测定。该方法采用内标法定量，在0.05-10ng/L的范围内，芬太尼类物质线性相关系数均在0.999以上，线性良好；高中低标准溶液连续进样6次，保留时间和峰面积的相对标准偏差(RSD%)分别在 0.02~0.04%和1.00~5.10% 之间，重复性良好；高中低三个浓度的加标回收率在63.0~89.3%之间，平行3份加标样品的相对标准偏差(RSD%)在0.55~10.60%之间，方法准确可靠，可用于实际样品的检测。 关键词： AOE 系统-LCMS-8060NX联用 污水 芬太尼类物质 芬太尼类物质是最近几年才出现，并且在美国、加拿大等国迅速发展蔓延的新型合成毒品。以芬太尼类物质为代表的新型毒品来势凶猛，已在一些国家大规模流行滥用，造成大量人员死亡，引发严重社会问题。由于该类物质毒性强、品种多、变异快、查查难，已成为当前国际禁毒领域面临的一大难题。 在我国，芬太尼类物质一直是严格管控的强效麻醉性镇痛药，在2018年底举行的中美元首会晤上，两国领导人就“对芬太尼类物质进行管控”达成了共识。 实验部分 去年4月1日，公安部、国家卫生健康委员会、国家药品监督管理局联合发布《关于将芬太尼类物质列入<非药用类麻醉药品和精神药品管制品种增补目录〉的公告》，芬太尼类物质被整类列管。 本文利用岛津AOE 系统(全自动固相萃取分析系统)和三重四极杆质谱仪 LCMS-8060NX联用，建立一种简便、快速、准确、高灵敏度污水中芬太尼类物质的检测方法。供相关人员参考。 1.2分析条件 液相色谱条件： 固相萃取柱： Oasis HLB Direct Connect HP (30 mm L. × 2.1 mm l.D.，20 um) SPE 输液泵：A-水，B-50%甲醇水含0.1%甲酸，C-甲醇：乙腈：异丙醇(1：1：1， v/v/v) SPE 流速： 3mL/min 色谱柱： Shim-pack GIST C18-AQHP (100 mm×2.1 mml.D.， 3um， P/N：227-30765-03， 岛津(上海))实验器材有限公司) 流动相：A相-0.1%甲酸水B相-乙腈 流速： 0.4mL/min 柱温：40℃ 进样量：1000uL 洗脱方式：梯度洗脱 LCMS-8060NX 质谱条件： 离子源：ESI(+) 接口电压：0.5kV 雾化气流速：3L/min加热气流速：15.0L/min 接口温度：350℃ 加热模块温度：400℃扫描模式：多反应监测 (MRM)干燥气流速：5.0 L/min DL温度：200℃ MRM参数：见表1 表1 MRM 优化参数 序号 化合物 内标分组 CAS No. 前体离子 产物离子 Q1 Pre Bias (V) CE(V) Q3 Pre Bias (V) 188.15* 22.0 -11.0 -24.0 1 4-氟丁酰芬太尼 1 244195-31-1 369.30 105.10 22.0 -26.0 -39.0 2 奥芬太尼 2 101343-69-5 371.25 188.15* 22.0 -11.0 -24.0 105.10 22.0 -24.0 -37.0 188.15* 22.0 -10.0 -24.0 3 丙烯酰芬太尼 2 82003-75-6 335.25 105.20 22.0 -24.0 -34.0 188.15* 22.0 -11.0 -23.0 4 呋喃芬太尼 2 101345-66-8 375.25 105.20 22.0 -25.0 -38.0 188.25* 22.0 -11.0 -25.0 5 戊酰芬太尼 1 122882-90-0 365.25 105.20 22.0 -25.0 -40.0 188.25* 22.0 -10.0 -24.0 6 异丁酰芬太尼 1 119618-70-1 351.10 105.10 22.0 -25.0 -37.0 7 乙酰芬太尼 1 3258-84-2 323.25 188.25* 22.0 -12.0 -23.0 105.10 22.0 -23.0 -36.0 8 氯胺酮-D4(内标) 1 242.10 129.05 13.0 -28.0 -20.0 9 美沙酮-D3(内标) 2 313.15 268.25 22.0 -15.0 -10.0 注：*表示定量离子 1.3标准溶液的配置 分别取芬太尼类物质质准溶液，用乙腈稀释，配制混合工作液，放置于-20℃冰箱中保存。分别取内标溶液，用乙腈稀释，配制内标工作液，浓度为5 ug/L，放置于-20℃冰箱中保存。取混合工作液用乙腈以逐级稀释方法配制校准曲线工作液，浓度分别为0.05、0.1、0.2、0.5、1、2、5、10 ug/L。在超纯水中按照1：1000 的比例加入内标工作液，用该内标溶液将校准曲线工作液按照1：1000比例稀释，并按照1：100 的比例加入30%的乙酸铵溶液，摇匀装入样品瓶中待测。 1.4样品前处理方法 取10mL污水样品离心，过0.22 um滤膜，然后按照1：1000 的比例加入内标工作液和1：100 加入30%的乙酸铵溶液，装入样品瓶中待测。 结果与讨论 2.1标准溶液的 MRM 色谱图 图1芬太尼类物质MRM 色谱图 (1ng/L) 2.2线性范围 按照1.3配制成各浓度混合标准溶液，以各目标物浓度为横坐标，目标物峰面积与内标峰面积为纵坐标，以内标法绘制标准曲线，所得校准曲线线性关系良好，线性相关系数均达到或大于 0.999，线性方程及相关系数见表2。 表2 校准曲线参数 序号 化合物 线性范围 (ng/L) 线性方程(1/C) 相关系数 R 精确度 % 定量限 (ng/L) 1 乙酰芬太尼 0.05-10 Y=(0.560768)X+(0.00868995) 0.9999 98.1-103.3 0.02 2 异丁酰芬太尼 0.05-10 Y=(0.455737)X+(0.00426698) 0.9998 93.9-111.1 0.01 3 戊酰芬太尼 0.05-10 Y=(0.256408)X+(0.00307897) 0.9996 89.4-114.0 0.01 4 呋喃芬太尼 0.05-10 Y=(0.344665)X+(0.00153668) 0.9998 96.2-104.3 0.01 5 丙烯酰芬太尼 0.05-10 Y=(0.483625)X+(0.00718216) 0.9997 94.9-107.7 0.01 6 奥芬太尼 0.05-10 Y=(0.459414)X+(0.00396403) 0.9996 94.0-108.6 0.01 7 4-氟丁酰芬太尼 0.05-10 Y=(0.330630)X+(0.00655271) 0.9999 91.0-103.8 0.01 图2芬太尼类物质校准曲线 2.3重复性 按照1.3步骤配制低、、中、高浓度标准溶液，连续进样6次，考察分析方法保留时间和峰面积的重复性。芬太尼类物质的保留时间和峰面积的 RSD 分别在0.02~0.04%和1.00~5.10%之间，数据表明方法重复性良好。 表3 重复性测试(n=6) 序号 样品名称 RSD% (0.2ng/L) RSD% (1ng/L) RSD% (5ng/L) R.T. Area R.T. Area R.T. Area 1 乙酰芬太尼 0.03 3.19 0.02 2.67 0.04 2.33 2 异丁酰芬太尼 0.03 5.10 0.02 3.72 0.04 2.28 3 戊酰芬太尼 0.03 3.38 0.02 2.51 0.03 3.36 4 呋喃芬太尼 0.03 3.27 0.02 2.05 0.04 4.69 5 丙烯酰芬太尼 0.03 4.40 0.02 1.00 0.04 3.25 6 奥芬太尼 0.03 2.59 0.02 3.58 0.04 2.36 7 4-氟丁酰芬太尼 0.03 3.91 0.02 2.26 0.03 4.02 2.4加标回收实验 取污水样品，按照1.4步骤中制备样品和加标样品，三个水平加标浓度如下表4所示，各样品平行测定3次。测试结果显示：芬太尼类物质的加标回收率在63.0~89.3%之间，相对标准偏差在0.55~10.60%之间，说明本方法准确性良好。 表4 基质加标实验结果(n=3) 序号 名称 样品浓度 加标(0.2ng/L) 加标示(1ng/L) 加标(5ng/L) (ng/L) 回收率% RSD% 回收率% RSD% 回收率% RSD% 乙酰芬太尼 N.D. 87.0 10.20 87.0 2.10 89.3 0.55 2 异丁酰芬太尼 N.D. 63.0 5.15 69.4 1.25 67.2 1.23 3 戊酰芬太尼 N.D. 82.0 1.09 83.6 0.95 84.1 2.72 4 呋喃芬太尼 N.D. 68.0 4.84 74.1 4.10 67.1 1.21 5 丙烯酰芬太尼 N.D. 89.0 6.81 83.9 1.88 84.3 1.10 6 奥芬太尼 N.D. 66.5 5.15 70.6 1.70 72.1 2.43 7 4-氟丁酰芬太尼 N.D. 72.5 10.60 78.5 1.70 80.1 0.85 注： N.D.表示未检出。 结论 本文利用岛津 AOE 系统和三重四极杆质谱仪LCMS-8060NX， 建立一种简便、快速、准确、高灵敏度的污水中芬太尼类物质的检测方法。该方法采用内标法定量，验验数据表明：该方法线性、重复性、加标回收率良好，方法准确可靠，可以为污水中芬太尼类物质检测提供很好的借鉴和参考。 岛津应用云 本文利用岛津AOE系统和三重四极杆质谱仪LCMS-8060NX，建立一种简便、快速、准确、高灵敏度的污水中芬太尼类物质的检测方法。该方法采用内标法定量，验证数据表明：该方法线性、重复性、加标回收率良好，方法准确可靠，可以为污水中芬太尼类物质检测提供很好的借鉴和参考。