虎杖中大黄素的含量检测方案(薄层色谱仪)

DKSH 双波长扫描法测定虎杖中大黄素的含量 目的：研究测定虎杖中大黄素的含量；虎杖属于蓼科虎杖属植物，干燥的根具有祛风利湿散瘀定痛止咳化痰功效，是传统中药，其化学成分复杂，所含有的主要成分大黄素具有抗肿瘤抗病毒抗菌抗炎平喘等作用。 方法：采用双波长薄层扫描法，波长扫描条件：硅胶G薄层板，i，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸(15：2：1)为展开剂，双波长反射法锯齿扫描，入s=440nm， 入r=660nm， 线性参数为3，光束狭缝：2mmx2mm 结果： 点样量 0.202ug-1.010ug，线性关系良好， Y=1424.926X+440.17，r=0.9992；平均回收率为98.04%， RSD=1.47%(n=6) 结论：方法简便准确，9可用于本品质量控制 1材料与仪器 1.1材料 1.11虎杖原药材：蓼科虎杖属植物的干燥根和根茎 1.12试剂：对照品：大黄素对照品，其余试剂均为分析纯 1.2仪器 Biostep-CD60 薄层扫描仪及分析软件；高效硅胶G薄层板，电子天平，5ul微量进样器，2方法 2.1实验条件 2.1.1层析：薄层板：硅胶G预制板(10cm×20cm)，临用前110℃活化 30min展开：甲苯-醋酸乙酯-甲酸(15：2：1)，饱和 15min 后展开，取出晾干自然光检检视为黄色斑点 2.1.2扫描条件双波长扫描法锯齿扫描，测定波长 测s=440nm，参比波长 比r=600nm，线性参数为 Sx=3，光束狭缝：2mmx2mm 2.2对照品溶液制备：取大黄素对照品约 5.05mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。 2.2.2供试品溶液的制备 取虎杖粉碎过60目筛，称取约0.35g， 精密称定，加蒸馏水30ml 及盐酸 3ml， 加热回流2h， 放冷；加氯仿回流提取2次，每次加氯仿50ml， 回流1h，放冷，分取氯仿层；合并：酸水层置分液漏斗中，用氯仿提取三次，每次 30ml， 合并氯仿提取液，通过装有无水硫酸钠的漏斗，滤器用少量氯仿洗涤，洗液并入滤液中，回收氯仿，残渣加少量甲醇溶解，并用甲醇定容于 10ml 容量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。 2.3方法学研究 2.3.1线性关系：精密吸取对照品溶液 2，4，6，8，10ul，点于同一硅胶G薄层板上，依上述条件展开后进行 扫描测定。以其峰面积积分值为纵坐标，以点样量为横坐标，作图，得一条直线，，回归方程：Y=1424.926X+ 440.17， r=0.9992.结果表明，大黄素在 0.202-1.010ug 范围呈现良好的线性关系。结果见表1 表1 线性关系考察 点样量(u1) 含大黄素的量(ug) A1 A2 A 2 0.200 732.49 706.27 719.38 4 0.403 991.09 1030.23 1010.66 6 0.601 1303.65 1354.19 1328.92 8 0.803 1590.76 1591.25 1591.01 10 1.010 1891.49 1845.27 1868.38 2.3.2稳定性试验 取样品2ul点于薄层板上，展开。每间隔 15min测定一次，1h内测定5次，积分值分别为1547.28，1515.13，1508.27，1468.45，1513.32， RSD=1.66%，结果表明1h内稳定2.3.3精密度实验取对照品 6ul点于同一薄层板上，展开，将同一板上的5个点样量相同的点扫描，记录峰面积，积分值分别为 1328.97，1316.54，1320.17，1332.54，1310.27， RSD=0.69%，结果表明， 精密度良好。 2.3.4重复性实验取虎杖粉末5份，每份约0.37g，精密称定，按“样品溶液的制备”项下处理，取2ul 点于薄层板上并测定，结果见表2，结果该批样品含大黄素1.05%， RSD=1.73%，说明重复性良好。 表2重复性实验 取样量(g) A1 A2 A 大黄素含量% 0.3815 1542.18 1534.06 1538.12 1.07 0.3770 1538.29 1555.17 1546.73 1.03 0.3704 1553.16 1543.92 1548.54 1.05 0.3703 1575.38 1563.16 1569.27 1.07 0.3751 1549.29 1554.97 1552.13 1.04 2.3.5加样回收率试验精密称取已知含量的样品共6份，各加入到大黄素对照品量 3.0-4.5mg，按照“供试品液的制备”项下制备依法测定各试验液中大黄素的含量，结果见表3.结果平均回收率为98.04%， RSD=1.47% 表3加样回收率试验 取样量(g) 样品含量(mg) 加 入 量(mg) 测 得 量(mg) 回 收 率(%) X(%) RSD(%) 0.3706 3.78 3.04 6.71 96.38 98.04 1.47 0.3654 3.80 3.01 6.77 98.67 0.3542 3.68 3.73 7.42 100.27 0.3483 3.62 3.51 7.04 97.44 0.3589 3.73 4.36 7.95 96.79 0.3618 3.76 4.47 8.17 98.66 2.4样品测定取供试品及对照品溶液 2ul 点于同一硅胶 G薄层板上按薄层层析条件展开，扫描测定结果，供试品平均峰面积积分值为1529.88，按药材计算大黄素含量为1.04%(n=3) 3讨论 3.1本试验供试品采用的水解条件是参照《中国药典》2005版一部虎杖项下的水解条件确定的 3.2本试验采用氯仿提取液回收后直接点样测定，方法简便，灵敏度高，重现幸好，是控制本品内在质量的较理想方法。 摘录：双波长扫描法测定虎杖中大黄素的含量 吕洪艳，李丹，付彬 (河南羚锐制药股份有限公司信阳分公司河南信阳464000) 更多内容，关注“大昌华嘉科学仪器部”微信公众号 选择大昌华嘉，就是选择仪器应用专家Think Asia. Think DKSH.www.dksh-instrument.cn 电话： 邮箱： ins.cn@dksh.com 目的:研究测定虎杖中大黄素的含量；虎杖属于蓼科虎杖属植物，干燥的根具有祛风利湿散瘀定痛止咳化痰功效，是传统中药，其化学成分复杂，所含有的主要成分大黄素具有抗肿瘤抗病毒抗菌抗炎平喘等作用。方法:采用双波长薄层扫描法，波长扫描条件：硅胶G薄层板，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（15:2:1）为展开剂，双波长反射法锯齿扫描，λs=440nm，λr=660nm，线性参数为3，光束狭缝：2mm×2mm 结果: 点样量0.202ug-1.010ug,线性关系良好，Y=1424.926X+440.17,r=0.9992;平均回收率为98.04%，RSD=1.47%(n=6)结论:方法简便准确，可用于本品质量控制