藜蒿中黄酮类化合物检测方案

微波辅助萃取与醇溶剂提取藜蒿中黄酮类化合物比较研究 颜流水* 陈燕清 黄智敏 胡臻恺 (南昌航空工业学院环境与化学工程系，江西南昌330034) 摘要 本文分别采用 WX—3000 型微波辅助萃取和醇溶剂提取藜蒿中黄酮类化合物。固定微波照射时间12min，对溶剂浓度、微波照射功率、固液比以及温度为因素，正交实验优化微波辅助提取藜蒿茎中黄酮类化合物工艺，得到微波提取藜蒿茎的最佳条件为：70%的乙醇浓度，800W 的照射能量，1：20的料液比和80℃的照射温度，藜蒿茎的黄酮得率为 6.43%；固定溶液 pH为 10的条件下，对醇溶剂提取的提取温度、溶剂百分数，提取时间，料液比四个因素做正交实验，得到醇溶剂提取的最佳条件为：温度为90℃，乙醇浓度为70%，提取时间为100 min， 料液比为1：40，藜蒿茎的黄酮得率为6.11%。微波辅助萃取与传统的醇溶剂提取比较，提取率有显著优点是方法的提取率增加 0.32%，提取时间缩短为原来的1/8。 关键词 微波辅助提取， 醇溶剂提取， 正交实验， 藜蒿， 黄酮类化合物 引言 藜蒿[1.2]为菊科多年生宿根性草本植物，远在唐代，孙思邈就记载了藜蒿的药用价值。其主要生长在江西鄱阳湖一带，在南昌被誉为“鄱阳湖的草，南昌人的宝”。近年来研究发现，黄酮类化合物是是蒿中主要药用活性成分。黄酮类物质具有抗心肌缺氧、缺血、抗心率失常、降低血清胆固醇、抑制血小板凝聚、抗溃疡、抗肿瘤、抗炎、抗过敏、抗衰老、增增免疫力等4。从天然产物提取黄酮类化合物已有大量报道[5，6]，也有报道藜蒿中的黄酮类成分具有抗氧化作用。为了充分利用藜蒿中的黄酮类物质，研究藜蒿中黄酮的提取工艺、确定藜蒿中黄酮类总量具有现实意义。 2 实验部分 2.1.1 微波辅助提取条件 12min萃取时间下做4因素3水平(L(3)4)的正交实验，正交实验因素和水平表见1。 表1L1正交实验因素水平表 因素 Factor 水平D温度A乙醇浓度 B 照射功率 C料液比 (%) (W) (g.ml) (℃) 1 70% 600 1：15 60 2 80% 700 1：20 70 3 90% 800 1：30 80 2.1.2 藜蒿茎正交实验结果及结果分析 藜蒿茎按Lg(3)*正交实验条件所做的实验结果及分析如表2所示： 表2藜蒿茎中黄酮正交实验结果 因素 A B C D 总黄酮提取率 5.34 2 2 2 6.05 3 3 3 6.34 4 2 2 3 4.86 5 2 2 3 4.80 6 2 2 5.37 7 3 3 2 3.48 8 2 3 4.51 9 3 2 4.74 K1 17.73 15.56 15.21 14.88 K2 15.03 15.36 15.64 14.90 K3 12.73 16.45 14.63 15.71 R1=K1/3 5.91 5.19 5.07 4.96 R2=K2/3 5.01 5.12 5.21 4.97 R3=K3/3 4.24 5.48 4.88 5.24 S=Rmax-Rmin 1.67 0.36 0.33 0.28 由极差分析结果可知，影响微波提取藜蒿中黄酮得率的各因素的主次为：乙醇浓度>照射能量>料液比>温度，得出的最佳实验条件为70%的乙醇浓度，800W 的照射能量，1：20的固液比和80℃的萃取温度。 经再次实验测得该最佳条件下牛蒿茎总黄酮提取率为6.43%。 2.2.1醇溶剂提取条件 固定溶液 pH 为10的条件下，对提取温度、溶剂百分数，提取时间，料液比四个因素做正交实验，每个因素做三个水平。正交实验因素和水平表见3。 表3正交因素和水平 影响因素 水平 提取温度/℃ 乙醇浓度 提取时间/min 料液比 1 70 50 60 30 2 80 65 100 35 3 90 75 150 40 2.2.2醇溶剂提取结果 醇溶剂提取正交实验条件所做的实验结果及分析如表4所示。 表4乙醇萃取藜蒿干粉正交实验结果 影响因素 实验序号萃取率(%)A BC D 温度/℃ 溶剂百分数 萃取时间/min 料液比 1 1(70) 1(60) 1(60) 1(1：25) 5.23 2 1 2(70) 2(100) 3(1：35) 5.70 3 1 3(80) 3(150) 2(1：40) 5.12 4 2(80) 1 2 2 5.69 5 2 2 3 1 5.41 6 2 3 1 3 5.34 7 3(90) 1 3 3 6.05 8 3 2 1 2 6.12 9 3 3 2 1 5.98 K1 16.05 17.18 16.87 16.79 K2 16.44 17.41 17.54 17.11 K3 18.71 16.61 16.79 17.30 R1=K1/3 5.35 5.73 5.62 5.60 R2=K2/3 5.48 5.80 5.85 5.70 R3=K3/3 6.24 5.53 5.60 5.77 S=Rmax-Rmin 0.89 0.27 0.25 0.17 由极差分析结结可知，各因素的主次为： A>B>C>D，最佳条件为AsB2C2D即即温度为90℃，乙醇浓度为70%，提取时间为100 min，料液比为1：40。在最佳条件下，重复三次实验，黄酮类化合物平均提取率为6.11%。 3 结论 实验结果表明，在微波辅助提取的最佳条件下，藜蒿总黄酮得率为 6.43%，而在醇溶剂提是的最佳条件下，藜蒿总黄酮得率为 6.11%。 与传统的醇溶剂提取比较，微波提取不仅所需时间大大缩短，且黄酮提取率提高0.32%，方法重现性好，所需能量少，提取物中的杂质含量少。 ( 参考文献 ) ( 1.任纪武.拉汗药用植物名称和检索手册.中国医药科技出版社，1998， 135. ) ( 2 . 中国科学院植物研究所.中国高等植物图鉴.1987，(4)：540. ) ( 3 . 江苏新医学院.中药大辞典.上海科技出版社，690~691 ) ( 4 . 许实波，梅雪婷，许东晖，唐栩.中药材2003，26(1)：46~54 ) ( 5.胡静丽，陈健初.食品科学，2003，24(1)：96~99 ) ( 6.郭振库，金钦汉.分析科学学报，2001，17(6)：505~509 ) ( 7.杨安树，邓丹雯，郑功源.食品科学，2003，24(7)：67~70 ) ( 8. Ganzler k， Salgo A， Valko K J. Chromatogr.A， 1986，371：299~306 ) ( 9. 李 核，李攻科，张展霞.分析化学，2003，31(10)：1261~1268 )