老鼠脑肝脾中脂质介质-DHA代谢物检测方案(液相色谱仪)

LAAN-A-LM-C013 ApplicationnNo.C102Newshttp：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行日：2015年3月 ApplicationNews LC/MSLiquid Chromatography Mass Spectrometry No1..C102 使用三重四极杆LC/MS/MS 同时分析158种脂质介质成分 Simultaneous Analysis of 158 Lipid Mediator Components Using Triple Quadrupole LC/MS/MS 脂质介质是具有生理活性脂质的总称。产生于人体内，影响着人体的各种生理机能。因其对糖尿病等与生活习惯有关的各种疾病产生的影响备受瞩目。近年来，随着 LC/MS 分析系统的快速化和高灵敏度化，可以对100种成分以上的脂质介质相关物质同时进行分析。因为脂质介质不仅分子量相同，而且 MS/MS 光谱中也存在很多相同的异构体，所以需要通通 LC分离和保留时间进行识别，以进行定性分析，得到脂质谱。 为了满足上述需求，岛津公司开发了使用高效三重四极杆质谱联用仪LCMS-8050 对脂质介司同时进行分析的方法包-“LC/MS/MS方法包 质质介质 Version2”。本方法包包括下述列表中158种成分的最佳MRM 参数、LC条件和保留时间。在此列举目标成分列表及其应用示例。列表中包括花生四烯酸代谢物(包含花生四烯酸的87种成分)、EPA代谢物(包含EPA的18种成分)、DHA代谢物(包含 DHA的16种成分)、乙醇酰胺类11种成分、其他脂肪酸代谢物23种成分、Azelaoyl-PAF、PAF 和 Lyso-PAF。 ■化合物一览表 List of Compounds(分类缩写 LA：linoleic acid，ALA： a-linolenic acid， EDA：eicosadienoic acid， AA： arachidonic acid， ADA： adrenic acid，DGLA： ( dihomo-Y-linolenic acid， EPA： eicosapentaenoic acid， DHA：docosahexaenoic acid， E A： ethanolamide ) ( 成分名缩写 PG： prostaglandin， LT： leukotrien，DiHOME： dihydroxyoctadecenoic acid， HODE： hydroxyoctadecadienoic acid，Hp： hydro p eroxy， KODE： ) 根据内标16种成分将脂质介介158种标准样品成分进行分组。通过对接近保留时间的内标峰进行校正，可实现高精度的峰识别。图1为从大鼠脑组织中检测识别的8-iso-PGF2a、8-iso-15(R)-PGF2a、PDE：和 PGD1的色普图。 上方为标准样品混合溶液的色谱图。经比较可知，内标样品的保留时间差与生体样品中基本相同，说明峰识别精度高。 图1标准样品混合溶液与老鼠脑脂质萃取溶液的8-iso-PGF2a (左)与PGD1(右) MRM色谱图MRM Chromatograms of 8-iso-PGF2a (left) and PGD1 (right) from the Analyses of Standard Mixture and Murine Brain Tissue Extracts 摘出大鼠的脑、肝脏和脾脏后用液氮速冻，分别称量冰冻组织，再向组织中添加甲醇与内标混合溶液以进行脂质萃取。用甲酸稀释萃取溶液，通过固相萃取精制和浓缩后进行同时分析。图2为3种组织中检测到的78种成分的脂质谱。对所有成分绘制标准曲线，将所得定量值以对数方式标注在纵轴。纵轴单位是组织每 单位重量的含量(fg/mg tissue)。由图可知，肝脏的 PGE2 为 0.10pg/mg tissue， 脑的 PGD2为 143 pg/mg tissue， 表明在低浓度范围可得到动态范围大的脂质谱。 图2大鼠脑、肝脏和脾脏的脂质谱 Lipid Mediator Profiling for a Brain， Liver and Spleen Tissue from a Mouse 岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司 ( 免责声明： ) *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ( *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 ) ( 如有变动，恕不另行通知。 ) 岛津公司开发了使用高效三重四极杆液质联用仪对脂质介质同时进行分析的方法包。方法包包括158种成分非常好的MRM参数，LC条件和保留时间。成分包括花生四烯酸代谢物、EPA代谢物、DHA代谢物、乙醇酰胺类成分、其他脂肪酸代谢物等。本文介绍了方法包标准样品示例，并检测了老鼠脑、肝脏、脾脏样品。