注射用尼莫地平亚微乳中处方筛选及性质考察检测方案(匀浆机)

第6卷 第5期2008年 9月中国药剂学杂志Journal of PharmaceuticsVol.6 No.5Sep. 2008 p.234Chinese 第5期陈继平等：注射用尼莫地平亚微乳的处方筛选及性质考察235 文章编号：(2008)05-0234-08 注射用尼莫地平亚微乳的处方筛选及性质考察 陈继平，荣蓉，李建文，宁婷，冯海俊，何仲贵 (1.沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳110016；2.无锡华瑞制药有限公司，江苏无苏214092) 摘要：目的制备稳定的注射用尼莫地平亚微乳剂。方法以离心稳定常数(K)为指标，用正交设计法筛选尼莫地平注射用亚微乳的处方和工艺，测定制剂的zeta电位、粒径、pH值和相变温度。结果所制备的注射亚微乳外观为乳白色，略带蓝色乳光。3批样品的K。值分别为3.4、3.6、3.4； zeta电位分别为-33.2、-33.0、-35.8mV；平均粒径分别为153、154、150nm； pH值分别为7.24、7.197.23；相变温度为83℃。结论制备工艺可行，制剂物理稳定性较好， pH值符合静脉注射的要求。 关键词：药剂学；亚微乳剂；正交试验；尼莫地平；制备工艺；物理常数 中图分类号：R94 文献标志码：A 尼莫地平(nimodipine)是第二代二氢吡啶类钙离子拮抗剂，具有保护和促进记忆、促进智力恢复的作用，临床上用于预防蛛网膜下隙出血后的血管痉挛。市售剂型有片剂、胶囊剂和注射剂，其中片剂和胶囊剂口服生物利用度低，个体差异较大。尼莫地平溶解度低，其注射剂中加入了体积分数20%以上的乙醇作为助溶剂，注射时易产生局部刺激性，静脉注射稀释时会析出结晶。作者以离心稳定常数(K)为指标，用正交设计法筛选注射用尼莫地平亚微乳的处方和工艺，期望制备稳定的注射用尼莫地平亚微乳剂，增大尼莫地平的溶解度，降低毒性及不良反应。 1仪器与材料 LDZ5-2低速自动平衡离心机(北京医用离心机厂)， DF-101S 集热式恒温加热磁力搅拌器(河南巩义英峪予华仪器厂)， LS230激光粒度仪(美国贝克曼公司)， COULTER DELSA440 SXzet a 电位测定仪(美国贝克曼公司)，DDS-11C 电导率仪(上海雷磁仪器厂)， AH-100D 高压均质机(ATS工业系统有限公司)， WFZ800-D2紫外-可见分光光度计(北京第二光学仪器厂)， SZ-96 自动纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)， DT-100A 电子天平(沈阳杰龙仪器有限公司)， FA2104 电子天平(上海精密仪器科学有限公司)， FJ-200 高速分散匀质机(上海标本模型厂)。 尼莫地平原料药(济南东风制药厂有限公司，纯度质量分数为99.6%)，注射用大豆油(辽宁铁岭北亚药用油有限公司)、中链脂肪酸甘油酯(米格列醇812，辽宁铁岭北亚药用油有限公司)，大豆磷脂 (SPC， 上海太伟药业有限公司)，注射用甘油(浙江遂昌甘油厂)， Pluronic F-68 (poloxamer 188，德国 BASF)，油酸(天津博迪化工有限公司)，其他试剂(分析纯，市售)。 ( 收稿日期：2008-04-09 ) ( 作者简介：陈继平 ( 1982-)，男(汉族)，辽宁沈阳人 ， 硕士研究生， Tel. 13840395238， E-mail chenjp190@163.com； ) ( 何仲贵(1965- ) ，男(汉族)，宁夏盐池人，教授，博士，主要从事药物新剂型与制剂新技术研究， Tel. 024-23986321， E-mail hezhonggui@gmail.com. ) 2 方法与结果 2.1 亚微乳处方筛选 尼莫地平在大豆油中的溶解度<2.4gL"，在米格列醇812中的溶解度>9.9 goL"， 采用大豆油与米格列醇812质量比为1：4的混合油作为油相，用量为100g·L，尼莫地平用量为 0.2g·L，大豆磷脂与 Pluronic F-68做混合乳化剂。初步研究表明，大豆磷脂与 Pluronic F-68 质量比在3：1~1：1，混合乳化剂剂用量质量分数为 0.9%~1.5%，稳定剂油酸的用量质量分数在 0.1%~0.3%之间制备的初乳外观较好。 初乳的制备：将尼莫地平、大豆磷脂、油酸和维生素E在70℃下搅拌溶解于大豆油和米格列醇812的混合油中作为油相，另取 Pluronic F-68、甘油70℃下溶解于适量注射用水中，作为水相。在磁力搅拌、70℃下将水相滴加入油相中，22000 rmin高速搅拌10 min， 即得。 以大豆磷脂与 Pluronic F-68 的质量比(A)、乳化剂的用量(B)、油酸的用量(C)为考察因素，以K为评价指标，考察各因素对初乳稳定性的影响，以筛选最优处方。正交试验设计见表1。按“2.4.1”条方法测定K。值，结果见表2 Table 1 Factor-level table of orthogonal test for formulation optimization Level Factor A B C m(soybean phospholipids)： w(emulsifier)/% w(oleic acid)/% m(Pluronic F-68) 13：1 0.9 0.1 22：1 1.2 0.2 31：1 1.5 0.3 对表2的正交试验结果进行极差分析，各影响因素对乳剂的K。影响大小为 B>C>A，最佳处方组合为AB2C2，即大豆磷脂与 Pluronic F-68 的质量比为3：1，混合乳化剂的用量质量分数为1.2%，油酸加入量质量分数为0.2%。 2.2 亚微乳工艺筛选 选择优化的处方进行工艺筛选。经预试验确定初乳的制备温度(E)、初乳制备时的搅拌时间(F)、高压均质压力(G)为工艺考察的因素，均质次数为6次。以K。和乳剂平均粒径为评价指标，考察各因素对终乳的影响。正交试验设计及结果见表3、4。 Table 2 Results of orthogonal test for formulation optimization Factor No. · K/% B C 42.1 2 2 2 31.2 3 3 3 40.9 4 2 2 35.3 5 2 2 3 42.5 6 2 3 53.4 7 3 34.4 8 3 2 47.6 9 3 3 2 52.6 K 38.1 37.3 47.7 K2 43.7 40.4 39.7 K 44.9 49.0 39.3 R 6.80 11.70 8.43 Table 3 Factors and levels of orthogonal test for preparation process optimization Factor Level E F G 0/℃ t/min p/MPa 160 5 80 2 70 10 100 3 80 15 120 Table 4 Results of orthogonal test for preparation process optimization No. Factor K/% d(particle)/nm E F 26.1 172 2 2 2 11.1 165 3 20.2 177 4 2 2 15.7 167 5 2 6.3 171 6 2 3 16.8 167 7 3 3 21.3 175 8 3 2 13.6 170 9 3 2 17.9 164 K K 19.1 21.0 18.8 K2 12.9 10.3 14.9 K 17.6 18.3 15.9 R 6.20 10.70 3.93 K 171.3 171.3 169.7 d(particle)/nm K2 168.3 168.7 165.3 K 169.7 169.3 174.3 R 3.00 2.67 9.00 对表4的正交试验结果进行极差分析，各因素对K。的影响大小为F>E>G， 最佳组合为 EF2G2；各因素对平均粒径的影响大小为 G>E>F， 最佳组合为 EF2G2， 即制备初乳时搅拌温度为70℃，搅拌时间为10 min， 高压均质的压力为100 MPa。 2.3 亚微乳的制备 处方组成见表5。 Table 5 Formulation of nimodipine submicro emulsion for iv injection Ingredient m/g Nimodipine 0.02 Soybean oil 2.00 Miglyol 812 8.00 Soybean phospholipids 0.90 Pluronic F-68 0.30 Glycerin 2.25 Vitamine E 0.05 Oleic acid 0.20 Water for injection added to 100 mL 避光操作。将处方量的尼莫地平、大豆磷脂、油酸和维生素E在70℃下搅拌溶解于大豆油和米格列醇812的混合油中作为油相；另取处方量 Pluronic F-68、甘油70℃下溶解于适量注射用水中，作为水相。在磁力搅拌、70℃下将水相滴加入油相中，22000 rmin"高速搅拌 10 min， 制得初乳，用0.1 molL氢氧化钠调节 pH 值至7.5，注射用水稀释定容至处方量，转移至高压均质机中，室温条件下，以100MPa 压力均质6次，过0.8 um滤膜，灌装，充氮，100℃流通蒸汽灭菌 45 min， 即得。 2.4 亚微乳物理常数的测定 2.4.1 Ke的测定 量取新制初乳3 mL 于离心试管中，4000 r.min"离心15 min， 取下层液0.05 mL， 用蒸馏水稀释至50mL， 在波长500nm 处测定吸光度(A)，取离心前的乳液 0.05 mL 同法操作测定吸光度(4)2.K=4-Ao//4x100%。按照优化的处方和工艺制备3批亚微乳，测得的K。值分别为3.4、3.6、3.4。Ke均较小，表明制备的乳剂较稳定。 2.4.2 Zeta电位的测定 测定3批亚微乳的 zeta 电位分别为-33.2、-33.0、-35.8mV。 2.4.3 粒径的测定 取3批自制亚微乳剂，稀释适当的倍数，测定其粒径和粒度分布。3批样品的平均粒径分别为(153±38、 (154±35)、150±22)nm。粒径测定结果见图1. Fig.11Mean particle size(d) of three batches of nimodipine submicron emulsion for i v injection 2.4.4 pH 值的测定 测定3批亚微乳的 pH值分别为7.24、7.19、7.23，符合静脉注射的要求。 2.4.5 相变温度的测定 取同一批尼莫地平亚微乳样品适量，置50℃水浴中保温，待样品温度恒定时，将水浴温度调至90℃，将电导仪和温度计放入待测样品中，在一定时间记录样品的温度和电导率。以样品的温度(0)为横坐标，电导率(A)为纵坐标绘制电导率-温度曲线，结果见图2。 Fig.22CConductivity-temperature curve of nimodipine(NMD) submicron emulsion 尼莫地平亚微乳温度达70℃(初变温度)后，体系的电导率急剧下降，83℃时基本下降至最低点，表明尼莫地平亚微乳的相变温度为83℃。相变温度较高，表明稳定性较好。 3 讨论 a.尼莫地平在米格列醇812中的溶解度大于其在大豆油中的溶解度。但实验中发现，当油相全 部用米格列醇812时，制得的乳剂外观发黄，加入少量大豆油能够改善乳剂的外观，故选用大豆油与米格列醇812质量比为1：4作为混合油油。 b.载药脂肪乳中由于药物的加入使得乳剂更不稳定，因此需采用乳化能力更强的乳化剂。作者在制备尼莫地平亚微乳时使用复合乳化剂以增加乳化效果。Pluronic F-68中的高分子链自由舒展31，能在油水界面与磷脂形成复合凝聚膜，增加了界面膜的柔韧性，使乳剂更为稳定。实验中，在乳化剂总量不增加的前提下，使用混合乳化剂增大乳化剂的乳化能力以使乳剂更稳定。 c. 油酸作为稳定剂的作用为[4：双键参与形成复合凝聚膜，增大乳化膜强度；增高乳剂表面的zeta 电位绝对值；辅助乳化。但油酸具有溶血作用，用量不能太多图。 d.灭菌后乳剂中的乳化剂和大豆油会发生少量降解，使乳剂的 pH值下降而显酸性，而大豆磷脂在酸性条件下不稳定，不利于乳剂的贮藏。因此，实验中在高压均质前用 0.1 m olL"NaOH 将乳剂的pH调至7.5，处方中加入少量的维生素E也有利于乳剂的稳定。 e..一般情况下，相变温度越高，分散体系越稳定。电导率-温度曲线越光滑，分散体系的粒度越均匀。在本研究中，初始升温时，乳剂的电导率随温度上升而增大，这是由于荷电粒子迁移速率随温度升高而加快所致。到达70℃(初变温度)后，体系的电导率下降，原因是此时临近相转变温度，制剂中的油性成分等非导电粒子凝聚、上浮的速率加快。到达相变温度时，体系的电导率降至最低点。本研究中尼莫地平的相变温度为83℃，提示稳定性良好。 4 结论 用高压均质法制备了尼莫地平亚微乳，外观为乳白色，略带蓝色乳光。3批样品的K值分别为3.4、3.6、3.4； zeta 电位分别为-33.2、-33.0、-35.8mV；平均粒径分别为153、154、150nm； pH值分别为7.24、7.19、7.23；相变温度为83℃。该制备工艺可行，制剂物理稳定性较好， pH 值符合静脉注射的要求。 ( 参考文献： ) ( [1 ] 韦曦，谭强， 李 慧.尼莫地平也液配伍稳定性及输液器对其吸附性实验[J].中国新药杂志，2002，11(1)：80-81 ) ( [2]李桂玲，苏德森，林瑞红，等.新型麻醉药异丙酚静注乳剂的制备及其物理性质的测定[].沈阳药科大学学报， 1999，16(2)：92-94. ) ( [3]JU M AA M， MuL L ER B W. The st a bilization of pare n teral fat emulsion us i ng non-ionic ABA copolymer surfactant [] . Int J Pharm， 1998， 174：29-37. ) ( [4] LEVY M Y ， SCHUTZE W， FUHR E RETC， et al. Cha r ac t erization of d iazepam sub m icron emulsion int e rface： R o le of oleic acid [J]. J Microencapsulation， 1 994，1 1 (1)：79-92 . ) ( [5] ROW ER C ，S HESKEYP J， WELLERPJ. 药用辅料手册 [ M].第4版.郑俊民译.北京：化学工业出版社，2005： 475-477. ) ( [6]陈允发，陆敏，张兵.依托咪酯脂肪乳注射液稳定性的研究[].中国医药工业杂志，2005，36(5)：275-277. ) Formulation optimization and characterization of nimodipinesubmicron emulsion for intravenous injection CHEN Ji-ping'， RONG Rong， LI Jian-wen’， NING Ting， FENG Hai-jun， HE Zhong-gui (1. School of Pharmacy， Shenyang Pharmaceutical University， Shenyang 110016， China； 2.Sino-SwedPharmaceutical Corp. Ltd，Wuxi 214092， China) Abstract： Objective To prepare st able nimodipine (N MD) sub micron em ulsion for i.v. injection byoptimizing fo rmulation a nd pre paration proc ess an d det ermining the p hysical co nstants. MethodsSubmicron emulsion was prepared using high pressure homogenization method. Taking centrifugal stabilityconstant Ke as an in dex， ort hogonal design was em ployed to optimize the formulation a nd preparati onmethod of nimodipine submicron emulsion for i v. injection. Physical parameters such as Ke， zeta potential.particle size， pH value and phase transition temperature were determined. Results The appearance ofthesubmicron emulsion prepared was ivory with a little bluish opalescence. The Ke values of t hree batcheswere 3.4， 3.6 and 3.4， zeta potential -33.2，-33.0 and-35.8 mV， mean particle size 153nm， 154 nmand 150 nm， and the pH values were 7.24， 7.19 and 7.23， respectively. The phase transition temperaturewas 83 ℃. Conclusions The preparation process is feasi ble to prepare submicron emulsion w ith goodphysical stability. The pH value met the requirement of iv injection. Key words： pharmaceutics； subm icron em ulsion； orthogona 1 te st； nim odipine； prepar ation process；physical constant ( (责任编辑高 明) )