琥乙红霉素中线性扫描极谱法研究检测方案(电化学工作站)

第26卷 第3期2007年9月延安大学学报(自然科学版)Journal of Yanan University (Natural Science Edition)Vol26 No 3Sept. 2007 第3期张著森拓宏桂：琥乙红霉素的线性扫描极谱法研究43 琥乙红霉素的线性扫描极谱法研究 张著森，拓宏桂 (龙岩学院化学与材料工程系，福建龙岩364000) 摘 要：用线性扫描极谱法研究琥乙红霉素的电化学行为，在0.1 mol·L’KH， PO NaHPO缓冲溶液中(pH7.46)，乙乙红霉素于-1.6V (vs. SCE)处产生一灵敏的氢催化波，其峰电流与琥乙红霉素浓度在 10-800mg·L范围内呈良好的线性关系，相关系数 r=0.9959，检出限为7.5mg.L。对100 mg·L琥乙红霉素溶液进行6次平行试验，RSD为0.53%。回收率在 98.2%-100.9%之间。该法可用于测定片剂中琥乙红霉素的含量。 关键词：琥乙红霉素；线性扫描极谱法；氢催化波 中图分类号：0656.3 文献标识码：A 文章编号：1004-602X(2007)03-0042-03 琥乙红霉素(Erythromyc in Ethylsuccinate)商品名利君沙，其分子式为C43 H7sNO16，是大环内酯类抗生素。化学结构与红霉素相似，是红霉素的乙酰琥珀酸酯。其药理作用也与红霉素相似，但对胃酸稳定性优于红霉素，对葡萄球菌属(耐甲氧西林菌株除外)各组链球菌和革兰阳性杆菌均具抗菌活性，抗菌谱广，疗效确切。中国药典推荐用微生物检定法，文献报道的分析方法有微生物检定法、离子抑制谱法和高效液相色谱法法等，但电化学分析法未见相关报道。本文利用线性扫描极谱法测定琥乙红霉素，该方法灵敏、重现性好，可用于测定药物片剂中琥乙红霉素的含量。 试验部分 1.11仪器与试剂 LK98BⅡ型微机电化学分析系统(天津市兰力科化学电子高技术有限公司，中国科学院研究生院应用化学研究所)；LK98A型电极工作台(天津市兰力科化学电子高技术有限公司)；WS-992型静汞电 ( 收稿日期：2007-03-18 ) 极(山东济宁万寿万盛分析仪器有限公司)； PHS-3CT型数字 pH计(上海伟业仪器厂)。 1.000g.L 琥乙红霉素标准溶液：准确称取0.1000g琥乙红霉素(中国药品生物制品检定所)加入50mL无水乙醇溶解，并用二次蒸馏水定溶于100mL容量瓶中。其余试剂均为分析纯，纯氮除氧，实验用水为二次蒸馏水。 1.2 试验方法 取适量琥乙红霉素的标准溶液液25mL比色管中，加入1mol·LKHPH Na PHO缓冲溶液1.0mL(pH7.46)，加水稀释至10 mL，匀，转移至电解池中，通氮气除氧5min后，于三电极体系中，起始电位在0.000V，终止电位为-1.800V，扫描速度为0.800V/S进行阴化扫描，记录-1.64V处一次微分极谱峰电流。 2 结果与讨论 2.1 支持电解质的选择 取 100mg·L'琥乙红霉素标准溶液，分别试验了 ( 基金项目：福建省教育厅自然科学科研课题 (JA03165) ) ( 作者简介：张著森(1970-)，男，福建上杭人，龙岩学院实验师。 ) 在 B-R， HOAcNaOAc， NH NHCl，KH，PO4-NazHPO4等缓冲体系中的极谱行为，结果表明，琥乙红霉素在KHPO4 NazHPO4缓冲体系中，于-1.64V处出现还原峰，峰形较好。如图1所示，一次微分线性扫描描谱如图2.试验试择KH，PO4-Naz HPO4缓冲溶液为支持电解质。 图 琥乙红霉素的极谱图 U/V 图2 琥乙红霉素的一次微分极谱图 2.2 介质 pH的选择 试验了不同 pH值的 KH， PONaHPO4缓冲溶液对乙红霉素还原峰电流和峰电位的影响。pH在6.83-9.34之间时，随着 pH的升高，峰电流降低，pH为7.46时峰形好，灵敏度较高。以 pH值对峰电位作图，其斜率为0.04246，峰电位随 pH的升高而正移，这是中性盐增加了电双层电容的缘故。试验选择缓冲溶液的 pH值为7.46. 2.3 介质浓度的选择 取 100mg·L'琥乙红霉素标准溶液，分别试验了 KH， PO NaHPO缓冲溶液(pH7.46)浓度在0.01-0.25mo1·L之间时对峰电流和峰电位的影响，随着 KH， PO4 Na HPO缓冲溶液浓度的增大，峰电流增大，大于0.10 mol·L以后峰电流基本不变，峰电位随缓冲溶液浓度的增大而正移。试验选择 KH，PO4 NaHPO4缓冲溶液浓度为0.10 mol·L'(pH7.46)。 2.4 温度的影响 在3.5-20℃，一次微分峰电流的温度系数为α=12.1%/℃；温度高于20℃后，峰形改变，峰电流 降低。试验结果表明，温度系数较大，符合催化波的特征。 2.5下体系的稳定性及重现性 在0.10 mol·LKH， PO NaHPO4缓冲溶液(pH7.46)中，琥乙红霉素浓度在 10-800 mg·L范围，溶液放置 1h，峰电流和峰电位均无明显变化，对100mg·L琥乙红霉素进行6次测定 RSD 为0.53%。 2.6干扰实验 试验表明，取100mg·L'琥乙红霉素，200倍的淀粉、葡萄糖、尿素，50倍的草酸、抗坏血酸对琥乙红霉素的测定没有干扰。 2.7 线性范围及检出限 在试验条件下，一次微分线性扫描峰电流与琥乙红霉素浓度在 10-800mg·L范围内呈良好的线性关系，线性方程为 i(nA.S)=0.07479 +0.95145C(mg·L)(r=0.9959，n=8)，检出限为7.5mg.L. 2.8 样品分析及回收试验 取5片琥乙红红素片(标示量为125mg/片)在研钵中研磨均匀，称取样品0.1000g用 50mL无水乙醇溶解，用蒸馏水定容于100L容量瓶中。移取一定体积的样液若干份，按试验方法测定琥乙红霉素样品溶液的一次微分线性扫描峰电流值。由标准曲线求得样品中琥乙红霉素的含量。测得片剂中琥乙红霉素含量分别为i((mg/片)：123.6，123.5.124.3，125.3，125.8，125.6；平均含量为124.7mg/片，RSD为 0.82%。在样品中进行加入标准回收试验，回收率为98.2%-100.9%。 3 机理研究 3.1 电毛细管曲线 由电毛细管曲线试验表明，在0.800-1.800V电位范围内，琥乙红霉素明显使汞滴表面张力降低，表明琥乙红霉素在汞滴上有吸附。 3.2 富集时间 取 100mg·L'琥乙红霉素，峰电流随富集时间的延长而增大，当富集时间达15s后峰电流基本保持不变，达到吸附平衡，表明琥乙红霉素在汞滴上有吸附。 3.3 表面活性剂的影响 试验了3种表面活性剂对峰电流的影响。结果表明，加入非离子表面活性剂(吐温80)，阳离子表 面活性剂(十六烷基三甲基溴化铵)，峰电流迅速下降；阴离子表面活性剂(十二烷基苯磺酸钠)对峰电流影响不大，表明琥乙红霉素在汞滴上以荷正电荷的形式吸附。 3.4 还原波特征 在试验选定的条件下，于 0.000-1.800V范围内作琥乙红霉素的循环伏安图。除氧5min后，阴极化扫描时得到一个还原峰，阳极化扫描时出现二个氧化峰(图3)。阴极峰与阳极峰的峰电位相差较大，阳极峰的峰电流明显大于阴极峰电流。在400-1500mV·s的扫描速度范围内，峰电流随电位扫速v的增大而增大，由Randles-Sevick公式，i=2.69×10m3D12AC，以 --v作图，在低扫速时为直线，反应物受扩散控制；在高扫速时曲线上翘，反应物有吸附。峰电位随扫描速度的增大而负移。表明琥乙红霉素在-1.64V处的还原波是有吸附性的准可逆波。 图 3 循环伏安图 用汞池作为工作电极，控制阴极电位为-1.70V，对含 100 mg·L琥乙红霉素的 KH， PO4-NaHPO缓冲溶液(pH7.46)进行3h的电解试验，电解前后琥乙红霉素还原波峰电流几乎没有发生变化，另外，试验过程观察到电极表面有少许微小气泡产生。以上试验现象和特征说明琥乙红霉素在-1.64V的还原波为催化氢波。 ( [1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典(二部)[M].北京：化学工业出版社.2005，677. ) ( [2]储小曼，刘敏，周燕，等.琥乙红霉素咀嚼片剂型的生物利用度研究[J].中国临床药理学杂志，2000，16(3)：195-197. ) ( [3]雷嘉川，梅之南，余建清，等.离子抑制色谱法测定琥乙红霉素的含量及有关物质[J].药学学报，2000，35(7)：514-5161. ) ( [4]王家蕊，陈立清，董伟林，等.免血清中琥乙红霉素的 HPLC测定及药代动力学研究[J].药物分析杂志，2000，20(1)：46-48 ) ( [5]杨丽珠，林丽，叶晓霞，等.硒(Ⅳ)铜(Ⅱ)体系的催化吸附波研究及应用[J].分析试验室，2005，24，(5)：30. ) ( 责任编辑 贺小林] ) On the L inear Scann ing Polarographic M ethodof Erythromycin Ethylsucc ina te ZHANG Zhu-sen， TUO Hong gui (Department of Chem istry， Longyan College，Longyan， Fujian 364000) Abstract： The Electrochem ical behavior of Erythrom y cin Ethylsuccinate had been studied in linear scaning polaro-graphic method In an pho sphate buffer of PH 7. 46， a sensitive catalytic hydrogen wave of Erythrom yc in Ethylsuccirnate appeared at -1. 64V (vs SSCE). The linear relationship between the peak current and the Erythromycin Ethyl-succinate concentration in the range of 10 mg-800 mg L-1(r=0. 9959， n=8)were observed Thedetection lim it ofthe method was 7. 5 mg·L. RSD found from the data of6 independent detem inations at the of 98%-100. 9%.this method had been applied to the analysis of Erythromycin Ethylsuccinate in tablets Key words： Erythromyc in Ethylsuccinate； linear scanning polarographic； Catalytic hydrogen wave ◎China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http：//www.cnki.nei