柴胡中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的测定

柴胡中柴胡皂苷a和柴胡皂苷d的测定 前言 柴胡始载于《神农本草经》，列为上品。用于感冒发热、寒热往来、疟疾、肝郁气滞、胸肋胀痛、脱肛、子宫脱落、月经不调。本实验采用日立超高效液相色谱仪 ChromasterUltra Rs 转换药典方法，对柴胡中的主要成分柴胡皂苷a 和柴胡皂苷d进行分析。 分析条件与仪器配置 样 品 柴胡(100mg/mL，甲醇溶解) 方法来源 2010年版《中国药典》一部修改 仪器设备 日立UPLC-ChromasterUltra Rs： 6170泵，6270自动进样器，6310柱温箱，6430 DAD 二极管阵列检测器 色谱柱 Hitachi LaChromUltraI C18 (2*100mm，1.9um) 检测波长 210 nm 柱 温 25°℃ 流动相 A-乙腈； B-水 梯度方法 0-8.5min，30-82%A； 8.5-9.2 min，82-87% A； 9.2-9.3min，87-30% A；9.3-10.2 min， 30%A 流 速 0.5 mL/min 进样量 1.6 pL 前处理 样品0.5 g， 精密称定5%浓氨试液的甲醇25 mL超声30 min 溶解过滤，20mL分2次洗涤容器及药渣合并后蒸干 5 mL 甲醇溶解残渣，，滤过 样品来源：、：中国食品药品检定研究院 供试品测定谱图 结果 名称 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 最高反压 min uV*sec uV MPa 柴胡皂苷a 3.707 316970 151377 74984 67 柴胡皂苷d 4.788 289909 129059 104429 67 注意事项 样品较复杂，分析完成后及时冲洗色谱柱。 总结 采用日立超高效液相色谱仪 ChromasterUltra Rs 和日立 LaChromUltra II C18色谱柱，微调流动相比例，转化药典方法分析柴胡，柴胡皂苷a和柴胡皂苷d出峰时间分别为3.707 min 和4.788 min， 理论塔板数分别为74984 和104429，满足分析要求，顺利地完成了从 HPLC 到 UHPLC 的方法转换，实现了柴胡中主要成分的快速、高效的分离分析。