生物药中氨基酸检测方案(氨基酸分析仪)

HitachiHighHechLC Application SheetIL-脯氨酸的检查试验(依据日本药典第16版)AS/AAA-011仪器配置：：L-8900型日立全自动氨基酸分析仪注意：本资料所示数据仅为测定例用数据而非可保证仪器性能的数据。Page.1(2013/05)Hitachi High-Technologies Corporation 在Application Sheet (AS/AAA-003、009、010)中，介绍了第16版日本药典新收录品种L-谷氨酸、L-丙氨酸、L-赖氨酸醋酸盐的检 查项目(有关物质)。此次，将为您介绍同样是新收录品种之一的L-脯氨酸的检查项目(有关物质)测定例。 通过向L-8900型日立全自动氨基酸分析仪中装入长度为80mm的高分离度色谱柱(3pm填充剂)，能够满足药典规定的试验条件。测定结果显示，能够测定相当于L-脯氨酸的约0.1%的其他氨基酸。另外，测定条件中记载的市售试剂(流动相·反应液)均与药典规定组成相同，无需配制，可直接使用。 标准样品测定例(系统适用性的确认) 氨基酸各0.2 nmol/20 uL 工ZA八 艹 A A 【药典规定浓度的标准溶液测定例】 <测定条件> 分析柱 ：#2622PH 4.6mm l.D.×80 mm 反应液 ： Ninhydrin Coloring Solution kit for Hitachi 除氨柱 ： #2650L 4.6mml.D.×60mm 反应液流速 ：0.24 mL/min 流动相 ：PH-Buffer -Kit 反应温度 ：130°C 流速 ： 0.2 mL/min 检测波长 ：VIS 570nm 柱温 ：57°C 进样量 ：20pL 系统适用性项目 0.2 nmol/20 pL的规定值 0.2 nmol/20 pL的测定结果 系统性能 Gly-Ala的分离度 1.2以上 2.1 系统的重现性 各氨基酸保留时间的相对标准偏差(n=6) 1.0%以下 0.02~0.16% 各氨基酸峰高的相对标准偏差(n=6) 5.0%以下 0.18~1.64% 【系统适用性】相对于规定值，分离度和相对标准偏差均得到了充分满足要求的结果。 ■L-脯氨酸药品模型样品测定例(有关物质的测定) 从 Pro： 173 nmol/20 pL (0.5 g/500 mL)(药典 规定浓度) Pro以外的氨基酸各0.1 nmol/20 pL(相当于Pro的约0.1%(质量比)) 0艹 ：A bv< 【L-脯氨酸(Pro)有关物质的确认】在日本药典第16版中，作为检查(7)有关物质的确认，规定“Pro以外的各氨基酸的量应在0.1%以下”。于是，向按照药典规定浓度配制的Pro中，分别添加约相当于其0.1%的氨基酸，作为了模拟样品。结果，得到了理想的峰高和分离度，可见本方法适用于有关物质的试验。 此外，本次使用常规试剂L-脯氨酸作为了药品模型样品。 【添加了氨基酸的L-脯氨酸测定例】 本方法以以典为基准，有效利用粒径3 um 的离子交换树脂/柱长80 mm 的高分离度色谱柱的性能，除L-脯氨酸(Pro)外，也可适用于日本药典第16版药品各条中收录的L-谷氨酸(Glu)、L-丙氨酸(Ala)、L-赖氨酸醋酸盐(Lys)的有关物质的试验。