化学药中有效成分含量分析检测方案

泼尼松龙检测中的应用——Venusil MP C18 1. 摘要 本案例表明Venusil MP C18（3µm）分离泼尼松龙和杂质A（氢化可的松）的峰谷比达6.7（欧洲药典规定值≥3），Brand A（2µm）分离泼尼松龙和杂质A的峰谷比仅1.02，Brand B（2.7µm）则未能分离该杂质。 2. 引言 泼尼松龙（prednisolone）是一种肾上腺皮质激素类药物，具有抗炎、抗过敏作用，能抑制结缔组织增生，降低毛细血管和细胞膜的通透性，减少炎性渗出，并能抑制组胺及其他毒性物质的形成和释放，常用于多种严重疾病的治疗，如细菌感染性疾病、严重变态反应性疾病。[5] 结构上，杂质A（氢化可的松）仅比泼尼松龙少一个双键，分离困难，Venusil MP C18成功解决了泼尼松龙杂质分离的难题。通过优化的质量控制方案，MP C18在泼尼松龙分离上也表现出良好的批次重现性。 3. 样品信息 样品名称 结构式 分子式 分子量 CAS号 泼尼松龙 Prednisolone C21H28O5 360.4 50-24-8 氢化可的松（杂质A） Hydrocortisone C21H30O5 362.5 50-23-7 4. 色谱条件 4.1 标准测试方法 仪 器：Agilent 1200； 色 谱 柱：Venusil MP C18，3µm，100Å，4.6×150mm； 流动相A：水； 流动相B：乙腈-甲醇（50:50）； 梯 度 表： 时间（min） A% B% 0-14 60 40 14-20 60-20 40-80 20-25 20 80 流 速：1.0ml/min； 柱 温：40℃； 进 样 量：10μL； 检测波长：254nm。 4.2 UHPLC结果 仪 器：UltiMate 3000 色 谱 柱：Brand A，2µm，100Å，2.1×100mm；Brand B，2.7µm，120 Å，2.1×100mm 5. 实验结果 色谱柱类型 Venusil MP C18 Brand A Brand B 峰谷比 6.7 1.02 na. 图1. Venusil MP C18分离泼尼松龙和杂质A谱图，峰谷比=6.7（欧洲药典7.5版规定峰谷比≥3） 图2. Brand A分离泼尼松龙和杂质A谱图，峰谷比=1.02 图3 Brand B分离泼尼松龙和杂质A谱图，无分离 订货信息 比表面 380m2/g;孔径：100Å 产品名称 订货号 规格 报价(元) Venusil MP C18 VA931505-0 4.6x150mm, 3µm 100Å 3900 保护柱套 SH-100 4.6x10mm 1200 保护柱芯 VA930105-0S 4.6x10mm, 4支/包 1500 3. 注射用盐酸表柔比星有关物质分析——Venusil® ASB C1 表柔比星是目前临床上最有效的抗肿瘤药物之一。与普通的C1色谱柱相比，ASB C1检测盐酸表柔比星有关物质分析具有分离度高、柱效高、重现性好和使用寿命长等优势。 全文见制药手册28页 注射用盐酸表柔比星有关物质分析——Venusil ASB C1 1. 摘要 结果表明：与普通的C1色谱柱相比，ASB C1具有分离度高、柱效高、重现性好和使用寿命长等优势：（1）ASB C1测试表柔比星的柱效可达4474，Brand A C1柱仅1174；（2）ASB C1对注射用表柔比星主峰前杂质对的分离度可达0.82，而Brand A C1柱分离度为0.42；（3）ASB C1进样200针后，保留时间和分离度有所下降，其中保留时间由18.662分钟下降至12.027，分离度由0.82下降至0.67，Brand A C1柱仅20针就出现保留时间由17分钟延长到20分钟，分离度由0.42变为无分离的情况。 2. 引言 表柔比星是目前临床上最有效的抗肿瘤药物之一，主要对各种实体瘤有效，其作用机制主要是直接嵌入DNA核碱对之间，干扰转录过程，阻止mRNA的形成，从而抑制DNA和RNA的合成。[6] 目前中国药典、美国药典、欧洲药典、英国药典和日本药典均收录该品种，且均使用相同的液相方法用于表柔比星的含量测定和有关物质检查。 3. 样品信息 样品名称 结构式 分子式 分子量 CAS号 盐酸表柔比星 Epirubicin Hydrochloride C27H30ClNO11 579.98 56390-09-1 4. 色谱条件 仪 器：Agilent 1100； 色 谱 柱：Venusil ASB C1；Brand A C1； 流 动 相：乙腈：水：甲醇：85%磷酸=290:540:170:1，另加0.2%的十二烷基硫酸钠； 流 速：2.0 ml/min； 柱 温：35℃； 检测波长：254nm。 5. 实验结果 色谱柱类型 进样次数 保留时间 柱效 主峰前杂质对 分离度 Venusil ASB C1 1 18.662 4474 0.82 200 12.027 913 0.67 Brand A C1 1 17.032 1174 0.42 20 20.237 1787 na 图1 Venusil ASB C1分析注射用盐酸表柔比星第1针谱图 图2 Venusil ASB C1分析注射用盐酸表柔比星第200针谱图 图3 Brand A C1柱分析注射用盐酸表柔比星第1针谱图 图4 Brand A C1柱分析注射用盐酸表柔比星第20针谱图 订货信息 比表面 200m2/g;孔径：150Å 产品名称 订货号 规格 报价(元) Venusil ASB C1 VS152505-0 4.6x250mm, 5µm 150Å 3200 保护柱套 SH-100 4.6x10mm 1200 保护柱芯 VS150105-0S 4.6x10mm, 4支/包 1200