肉制品中青霉素检测方案

Shanghai Nano Instrument Co.，Ltd. 厂‘纳铭仪器nano instrument 纳铭仪器nano instrument 上海总部地址：上海市闵行区莲花南路1388弄8号1503-1504室 浙江办事处：杭州市莫干山路425号瑞祺大厦814室电话：021-609008296090083061131051 电话：0571-81954578 传真：0571-81954579邮箱： info@nano-instru.com 江苏办事处：苏州市金门路158号协和大厦2107室传真：021-61131052 电话：0512-87772272 传真：0512-87772270邮编：201108上海纳诺仪器有限公司Shanghai Nano Instrument Co.，Ltd.网址： http：//nanoinstru.instrument.com.cnhttp：//www.nano-instru.c 瑞士万通785DMP自动电位滴定仪检测青霉素含量 明文庆，钱志平 (安徽省兽药饲料监察所，安徽合肥230022) [摘 要]采用瑞士万通公司生产的785DMP型自动电位滴定仪，按照《中国兽药典》2000年版一部电位滴定法测定青霉素含量，经反复试验，并与《中国兽药典》1990年版一部规定的酸碱中和法定量结果比较，证明785DMP自动电位滴定仪检测青霉素含量方法可行，并得出785DMP自动电位滴定仪应设定的相关参数，供同行参考。 [关键词] 785DMP 自动电位滴定仪；青霉素；参数 注射用青霉素钾、钠兽药产品是目前养殖业中应用极为广泛的抗生素药物，其含量测定方法从最初的微生物效价法逐渐被简便快捷的羟胺法、碘量法、咪坐法和中和法等化学方法所取代。《中华人民共和国兽药典》2000年版一部]又进一步将青霉素的含量测定方法修订为硝酸汞电位滴定法，此法的突出优点是，准确、快捷和不需采用对照品，而直接根据消耗的硝酸汞滴定液的摩尔数计算青霉素含量的方法，精密度好，结果可靠。为此许多检验部门购置了瑞士万通785DMP自动电位滴定仪。但据笔者了解，将该仪器应用于青霉素含量测定的单位不多，且瑞士万通公司在中国的代表处也没有做过青霉素含量测定的针对性试验。为此，笔者经过反复试验并与中和法进行了比较，说明用785DMP 自动电位滴定仪测定青霉素含量的方法可 仪器与试剂 行1仪器785DMP自动电位滴定仪，瑞士万通公司；AE240电子天平，梅特勒-托利多(上海)有限公司；可控硅控温水浴锅，通州长江医疗器械厂；电热恒温水浴锅，江苏南通竹行医疗器械厂；酸式滴定装置；电炉。 1.2 试剂青霉素钾对照品：批号0437-9501，含 量99.9%，中国药品生物制品检定所提供；注射用青霉素钾：批号20010815，1×10°万IU，安徽雉河动物药业有限公司生产；蒸馏水；0.01、0.1、1 mol/L氢氧化钠溶液；1 mol/L 硝酸溶液 ；pH 4.6醋酸盐缓冲液；0.02 mol/L硝酸汞滴定液；酚酞指示液；0.1mol/L 盐酸滴定液。 2方法与结果 2.1 电位滴定法 2.1.1 785DMP自动电位滴定仪参数的设定 2. 1.1.1 总青霉素测定的参数设定开机后，按“MODE"键选择“MET”U”滴定模式。按“PARAM”键，进行参数设定，见表1。按 DEF 键，进行公式设定： formula RS1=EP1 XC01 XC02 XC03/CO0 RS1 text RS1 RSl decimal places 2 RSl unit： %RSl cimit control： OFFreport report COMl ：full ；curve 按C-FMLA键，输入已知值： ( C-fmla ) 滴定参数 Titration parameters 停止条件 stop con ditions 等当点判别 EPC 30 mv 体积增量V step 0. 10 nL 停止体积方式 stop V abs. 等当点识别 EP recognition last 配加速率 dos. rate max. mL/min 体积停止 Stop V 8mL 固定测量值 Fix EP 1 at U OH mv 漂移信号 Signal drift 10 mv/ min 电位停止 Stop U Off mv 评估 pk/HNP： OFF 平衡时间 equilibr. Time 20 s 终点停止 Stop EP 9 预选顺序 preselections 起始体积 Start V off 充液速率 Fillingrate max. mL/min 提示样品识别 req. ident： off 等待时间 pause 10 s 统计 statistios 提示样品量 req. smplsize： all 测量输入 meas. Input 1 状态 status： off 样品量限制 Limits mpl size： off 温度设定 temperature 由室温定 等当点评估 evaluation 远程插座激活 Activate pulse： off 003 100 按“USER METH"键，保存方法，文件名为Qmsl”，即为总青霉素测定的参数，每次检测总青霉素只要调出“Qmsl”即可。 2.1.1.2降解物测定的参数设定将测定参数中部分参数修改为： titration parameters V step 0.02 ml 其余参数与总青霉素测定的参数一致。按“USER METH”键，保存方法，文件名为“Qms2”，即为降解物测定的参数，每次检测降解物只要调出“Qms2”即可。0 注：EP1为终点；C01为每毫升硝酸汞滴定液(0.02 mol/L)相当于总青霉素和降解物的毫克数；c02为硝酸汞滴定液(0.02 mol/L)的F值；Co3为百分比；CO0为样品重。 2.1.2操作方法按《中华人民共和国兽药典》2000年版一部弭]青霉素钾含量测定方法进行检测。 2.2中和滴定法按《中华人民共和国兽药典》1990年版一部[2]青霉素钾含量测定方法进行检测。 2.3两种方法检测结果及比较见表2，表3. 表2青霉素钾化学对照品所测结果比较 试验次数 电位滴定法 中和法/% 对照品标示量/% 总青霉素/% 降解物/% 含量/% 1 99.97 0 100.0 100.4 99.9 2 99.89 0 99.9 100.7 3 100.01 0 100.0 100.1 表3注射用青霉素钾(20010815)所测结果比较 试验次数 电位滴定法 中和法/% 总青霉素/% 降解物/% 占标示量的百分比/% 1 99.71 0.18 99.5 100.5 2 99.35 0.13 99.2 99.7 3 99.22 0.12 99.1 99.9 4 99.57 0.15 99.4 100.7 5 99.61 0.16 99.5 100.0 6 99.60 0.16 99.4 100.4 7 99.63 0.16 99.5 99.9 8 99.70 0.15 99.6 99.9 9 99.57 0.20 99.4 99.8 10 99.54 0.18 99.4 100.0 3 结论与讨论 3.1从表1可见，785DMP电滴滴定法结果与对照品标示量接近，说明785DMP电位滴定法的准确度高，可用于青霉素的含量测定。 3.2 从表2可算出785DMP电位滴定法结果的标准偏差为0.15，而中和法结果的标准偏差为0.33，显然785DMP电位滴定法的精密度要比中和法的精密度高。 3.3 参数设定的改变会影响结果的可靠性和试验的合理性。如：EPC变大会缩短滴定时间，变小会 延长滴定时间； stop EP设为“1”，就会找不到第二个终点，设为“9”是为了曲线更加圆滑、完美。dos.rate 设为最大只是为了缩短进液的时间。 3.4 试验表明，采用 785DMP自动电位滴定仪按上述参数设定进行青霉素测定，其效果令人满意。 ( 参考文献： ) ( [1]中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典二○○C年版一 部[S].北京：化学工业出版社. ) ( [2]中国兽药典委员会.中华人民共和国兽药典一九九●年版一部[S].北京：农业出版社 )