东曹GPC与光散射检测器联用测定琥珀酰明胶的绝对分子量

琥珀酰明胶是通过明胶的琥珀酰化而得到的改性明胶，是临床使用最为广泛的血浆代用品之一，具有扩容和抗休克效果好、免疫源性低及无干涉凝血等优点。主要用于增加血容量，放置失血性休克，降低血液粘度，改善微循环，防止血栓形成等。本应用中使用东曹HLC-8320GPC凝胶渗透色谱系统和LenS3光散射检测器联用，配合TSKgel G3000SWXL色谱柱对琥珀酰明胶样品的绝对分子量进行测定。琥珀酰明胶的绝对分子量测试 【样品信息】 琥珀酰明胶是通过明胶的琥珀酰化而得到的改性明胶，是临床使用最为广泛的血浆代用品之一，具有扩容和抗休克效果好、免疫源性低及无干涉凝血等优点。主要用于增加血容量，放置失血性休克，降低血液粘度，改善微循环，防止血栓形成等。 【分析条件】 色谱柱 ：TSKgel G3000SWXL (7.8 mm I.D. × 30 cm, 5 μm) 流动相 ：磷酸盐缓冲液 流速 ：1.0 mL/min 进样量 ：100 μL 温度 ：室温 装置 ：HLC-8320GPC & LenS3 【样品前处理】 流动相配制：取磷酸二氢钾 3.52 g（Mw 136）12.9 mM、磷酸氢二钠（Mw 141.959）8.08 g，28.458mM，加入 2 L超纯水，超声溶解，使用 0.22 μm孔径的亲水性过滤膜真空抽滤 3遍。 样品制备：使用流动相将琥珀酰明胶注射液稀释成浓度约 20 mg/mL的溶液，使用 0.22 μm孔径， PES材质的亲水性针式过滤器过滤，得到待测样品溶液。 【分析结果】 Time (min) 琥珀酰明胶多检测器测试谱图 （紫色曲线为示差（RI）检测器信号，蓝色曲线为 90º角光散射（RALS）检测器信号） 琥珀酰明胶的RI（紫色）&RALS（蓝色）和分子量随流出时间曲线（绿色）琥珀酰明胶测试数据 Peak 1 LS Distribution Analysis by LALS dn/dc (Used) [mL/g] Mw [Da] Mn [Da] Mz [Da] Mp [Da] Mw/Mn 8,235 5,296 112,815 5,999 1.555 0.19 【结论】 采用HLC-8320GPC高效凝胶渗透色谱和 LenS3光散射检测器，配合使用 TSKgel G3000SWXL 色谱柱可以对琥珀酰明胶样品的绝对分子量进行测定。