采用TSKgel色谱柱参考GB/T 40486-2021测定蜂毒干粉中蜂毒溶血肽含量

蜂毒肽（Melittin）是蜂毒的主要成分和主要生物活性物质，约占蜂毒干重的40%~50%，是由26个氨基酸残基组成的多肽，分子式为C131H229N39O31，相对分子量为2846.46。参照国标《GBT 40486-2021蜂毒干粉中蜂毒溶血肽含量的测定高效液相色谱法》，使用C18色谱柱TSKgel ODS-100Z（4.6 mm I.D.×15 cm，5μm）对蜂毒肽标准品进行定量分析，其浓度-峰面积的校正曲线优异，可满足该国标中的测试要求。采用 TSKgel 色谱柱参考 GB/T 40486-2021蜂毒干粉中蜂毒溶血肽含量的 测定高效液相色谱法 【基本信息】 蜂毒肽（Melittin ）是蜂毒的主要成分和主要生物活性物质，约占蜂毒干重的 40%~50%，是由 26个氨基酸残基组成的多肽，分子式为 C131H229N39O31，相对分子量为 2846.46。蜂毒肽 呈强碱性（pH=10），易溶于水，它在蜂毒中起主要的药理作用，是目前人类所知抗炎性最强 的物质之一。它具有类似激素的作用，却不具有激素的不良反应。此外，亦具抑菌、抗辐射、抗病毒等作用。蜂毒肽还可以刺穿艾滋病毒的保护外层，毁灭艾滋病毒，但又不伤及周围正 常细胞。近年来又有对其抗癌作用进行研究的报道。但是其临床应用却有很多局限，主要原 因是现有技术难以将蜂毒中有致敏反应并与蜂毒肽分子量接近的磷脂酶 A2完全去除。 【溶液的配制】 标准曲线的配制：称取适量蜂毒肽标准品，用纯水溶解至约 1 mg/mL ，并用纯水逐级稀释至 20μg/mL 、50 μg/mL 、100 μg/mL 、200 μg/mL 、500 μg/mL 、1000 μg/mL 作标准曲线。 流动相 A ：0.1%三氟乙酸水溶液 流动相 B ：0.08%三氟乙酸乙腈溶液 【分析条件】 仪器： Thermo Ultimate 3000 色谱柱：TSKgel ODS-100Z （4.6 mm I.D.×15 cm ，5 μm ） 流速： 0.8 mL/min 柱温： 25℃ 进样量：5 μL 检测器：UV@220nm 【分析结果】 图 1 蜂毒肽的色谱图（约 993.29 μg/mL ） 峰序号 名称 RT（Min） As 分离度Rs 理论塔板数 1 蜂毒肽 6.877 1.09 - 32970 蜂毒肽浓度 -峰面积校正曲线 【结论】 使用 TSKgel ODS-100Z （4.6 mm I.D.×15 cm ，5μm ）对蜂毒肽标准品进行定量分析，其浓度 -峰面积的校正曲线优异，可满足 GBT 40486-2021蜂毒干粉中蜂毒溶血肽含量的测定高效液相色谱 法中的测试要求。