生活饮用水标准之微生物的检测方法

检测依据：      GB/T 5750.2-2006 生活饮用水标准检验方法 水样的采集和保存      GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 微生物指标生活饮用水中的微生物指标菌落总数水样在营养琼脂上有氧环境下，37℃培养48h后，所得1mL水样所含菌落的总数。检测意义：作为一般性污染的指标，即评价被检样品的微生物污染程度和安全性。水样菌落总数越多，说明水被微生物污染程度越严重，病原微生物存在的可能性越大，但不能说明污染的来源。总大肠菌群指一群在37℃培养24h能发酵乳糖，产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。检测意义：作为粪便污染的指标。水样总大肠菌群的含量，表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。耐热大肠菌群指一群在44-44.5℃培养24h能发酵乳糖，产酸产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。我国习惯上称之为“粪大肠菌群"。微生物指标常规检验流程图一、水样采集采样原则：所采集的样品具有代表性。采样容器：不能是新的污染源：不吸收或吸附某些待测组分不与待测组分发生反应。保证从采样到分析期间样品各组分的浓度不发生改变。微生物样品必须按一般无菌操作的基本要求采集，并保证在运送、贮存过程中不受污染。自来水水样：先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌再开放水龙头使水流5min(经常用水的水龙头放水1~3min)后，采集水样于无菌玻璃瓶，约占瓶容量80%，以便摇匀水样。水源水水样：选有代表性的地点及可疑地方，一般距水面下10-15cm采集，采样后在水中改好盖子，再从水中取出。注意事项1. 严格无菌操作。2. 做好标记：采得水样后应立即记录水样名称、地点、时间等内容。3. 从速送检。水样从采集到检验不应超过2h，在4℃下保存不应超过24h。二、菌落总数测定所需培养基和试剂：营养琼脂、9mL无菌生理盐水管。自来水水样检测操作步骤：1. 以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌平皿中。2. 倾注约15mL已融化井冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿；使水与培养基充分混匀（每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平只倾注营养琼脂养基作为空白对照）3. 待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于36℃±1℃培养箱内培养48h，进行菌落计数，即为水样1mL中的菌落总数。4. 培养完成后，用眼睛直接观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏。结果分析与报告：计算平均菌落数，若菌落总数(CFU/mL)当检样的菌落数为1~100时，按实有数报告；大于100时，采用二位有效数字报告。国家标准(GB5749-2006)规定生活饮用水菌落总数每毫升不得超过100个。水源水检测操作步骤：1. 以无操作方法吸取1mL充分混匀的水，注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:10稀释液。2. 吸取1:10的稀释液1mL，注入盛有9mL灭菌生理盐水的试管中，混匀成1:100稀师液，按同法依次稀释成1:1000，1:1000释液等备用（如此递增稀释一次，必须更换一支1m灭菌管）。3. 然后用无菌极管取稀释的水样和2个~3个适释度的水样1mL，分别注入灭菌平皿内。之后操作同自来水水样的检验步骤。结果分析与报告：计算平均菌落数，首先选择平均菌落在30~300之间者进行计算。一般水源水中菌落总数与水清洁程度的关系：注意事项1. 菌落总数测定中，应选择合适的稀释度进行(生活饮用水，国家标准规定每毫升不得超过100个，因此以直接吸取1毫升到平板进行培养)2. 各稀释管、相应半皿做好标记。包括：水样名称、稀释度、时间、小组。3. 严格无菌操作进行水样稀释时，每一稀释度均需更换吸管。4. 倾注时，要注意营养琼脂的温度。5. 倾入琼脂后要混匀，待琼脂凝固后倒置培养。三、总大肠菌群测定所需培养基和试剂：乳糖蛋白胨培养液、双料乳糖蛋白胨培养液、伊红美蓝培养基。多管发酵法步骤：初步发酵试验：采用乳糖蛋白培养液36℃±1℃培养24h观察产酸产气情况。平板分离：对阳性管培养物，接种于伊红美蓝培养基观察菌落特征，并进行革兰氏染色和镜检。复发酵证实试验：对典型和可疑菌落，接种于乳糖蛋白胨培养液，进行复发酵证实试验。结果报告(MPN)：根据 GB 5750.12-2006 所附检索表报告结果。四、耐热大肠菌群测定所需培养基和试剂：乳糖蛋白胨培养液、EC肉汤、伊红美蓝培养基多管发酵法步骤：初步发酵试验：采用乳糖蛋白培养液36℃±1℃培养24h观察产酸产气情况。耐热培养：阳性管接种在EC肉汤管中，44.5℃培养24h观察产酸产气情况。平板培养：阳性管接种在EMB平板上，36℃±1℃培养24h。结果报告(MPN)：根据 GB 5750.12-2006 所附检索表报告结果。五、大肠埃希氏菌测定所需培养基和试剂：EC-MUG培养基多管发酵法步骤：耐热培养：将总大肠菌群初发酵中产酸或产气的管进行大肠埃希氏菌检测，接种此类试管中的液体到EC-MUG管中，在培养箱或恒温水浴中44.5℃培养24h。如使用恒温水浴，在接种后30min内进行培养，使水浴液面超过EC-MUG管的液面。结果报告(MPN)：   将培养后的EC-MUG管在暗处用366nm紫外灯照射，如有蓝色荧光，则表明水样中含有大肠埃希氏菌。   计算EC-MUG阳性管数，根据GB 5750.12-2006所附检索表报告结果。HK环凯生物HuanKal Blology当前位置：不锈钢多联过滤系统 用途 MFS系列不锈钢过滤系统是广泛应用于研究单位、检验检疫机构、质量监控机构、天然矿泉水行业、饮用水行业、制药行业、饮料行业等部门的滤膜法微生物检测、悬浮固形物检测、样品纯化的抽滤设备。 原理 真空泵形成负压环境，待检测液体样品通过微孔滤膜的过滤，把大于滤膜微孔的微生物或固形物分离开来，以便下一步的检测分析。 产品特点 ·快接式模块化设计 ●整机可快捷拆卸，包括滤头和滤管，更方便清洗消毒内部残留物。 ●滤头快接设计，方便多样品抽滤时更换灭菌滤头，实现多样品快速抽滤。 ●可任意选择左右侧连接硅胶管，根据具体实验室情况放置真空泵。 ●独立开关，可独立进行单个样品过滤，也可同时过滤多个样品。 《GBT 8538-2008 饮用天然矿泉水检验方法》中检测微生物的抽滤设备 ●可加配快接真空表，可测试抽滤的真实真空度。 ●专利产品：专利的“三爪式”不锈钢滤膜扣具设计，不需要额外的夹具，可单手操作和滤膜的取放，操作简单，使用效率更高。(专利号：ZL 2009 20057893.8) ·不锈钢滤杯和塑料滤杯两种材质可选：根据不同的实验情况选择不同的滤杯材质。滤杯内壁带有清晰的容量刻度线，方便定量加样。 ●科学细致的设计：率先采用优质316L烧结不锈钢滤膜支撑垫，确保滤膜在抽滤过程中不会破裂或穿孔，保障样品检测的准确性，更可使得被截留的微生物在滤膜表面分布均匀一致，便于实验结果的观察。 ·防止二次污染：本过滤系统在不锈钢滤杯的上盖设有通气孔，可选配安装空气过滤器，避免抽滤中的二次污染。 ●多种灭菌方式：不锈钢滤杯和滤头灭菌消毒方式可采用121℃湿热灭菌15分钟，180℃干热灭菌120分钟、亦可采用过滤系统选配的火焰灭菌器，用高温灼烧达到灭菌目的。 ●经久耐用的材质：滤器、滤器连接件、滤器支架、滤器上盖、滤膜支撑垫等主要配件均采用316优质不锈钢生产，不易损坏。 适用标准 ●GB8538-2016 饮用天然矿泉水检验方法 ●GB/T5750.12-2006生活饮用水标准检验方法微生物指标 ●GB/T18204.5-2013公共场所卫生检验方法(军团菌) ●GGB/T19298-2014包装饮用水 ●2020版中国药典微生物限度检查法 技术参数 型号 MFS-1A-250/500-KMFS-1B-500-K MFS-3A-250/500-KMFS-3B-500-K MFS-6A-250/500-KMFS-6B-500-K MFS-10A-250/500-KMFS-10B-500-K 滤杯容量 标配不锈钢滤杯，容量250/500ml 燃烧架 无 1个 滤杯和杯盖 1套 3套 6套 10套 型号 MFS-1A-DN-K MFS-3A-DN-K MFS-6A-DN-K MFS-10A-DN-K 配套滤杯 一次性无菌塑料滤杯，容量100/250ml(另购) 联数 单联 三联 六联 十联 适配滤膜 A型： 47mmx0.45um/0.22um 滤膜取出器(选配) 连片膜：中47×0.45um/0.22um(配套滤膜取出器使用) 过滤系统火焰灭菌器(选配) PT-220(使用丁烷气体) 尺寸 250×160×205mm 450×160×205mm 810×160×205mm 1290×160×205mm 气液两用隔膜真空泵 原理及应用领域 气液两用膈膜真空泵利用隔膜运动、挤压排除空气、能够保障过滤介质不受污染的同时，有效避免设备运行产生油雾等污染粒子对洁净室环境造成污染。适用于水、饮料、药剂等需要通过膜过滤法测定微生物的样品检查实验，可与我公司生产的不锈钢多联过滤系统套件联合使用，符合DIN EN ISO 8199-2008的标准。也可用于液相色谱分析中的流动相过滤及除气。气液两用膈膜真空泵能够有效提高过滤效率、加强脱气效果。 产品特点 ·直排式设计： SZKB-6系列气液两用隔膜真空泵(直排泵)，过滤后的液体直接通过泵，不需要真空贮液瓶，简化了过滤系统的配置，节省工作空间，操作更方便快捷； ●维护简单：消除了普通膈膜真空泵、活塞式真空泵等需要的防护空气过滤器，维护更简单； ●气液两用：允许抽入气体和无固体颗粒状的液体； ●方便清洗：ABS塑料外壳，耐腐蚀性好，设计紧凑，容易清洁； ●无油设计：不污染环境，可在无菌室使用； ·采用无刷电机：长寿命，低干扰；工作效率高、噪音低；日常运行免维护，更可持续24小时运转。 技术参数 型号 SZKB-6A SZKB-6B SZKB-6C 极限真空度 650 mbar 780 mbar 最大速率(L/min) 6L/min(气)3L/min(液) 12L/min(气)6L/min(液) 6L/min(气)3L/min(液) 适用类别 气体、液体 贮液瓶、缓冲瓶 5L废液收集瓶 外形尺寸 230×268×170(mm) 电源 DC 24V 3A