血液样本中喹硫平检测方案(液相色谱仪)

thermoscientific Ultimate 3000 液相在精神类药物快速分析方面的应用——喹硫平 郑喆，曹建明，赛默飞世尔科技(中国)有限公司 关键词： 摘要 本文基于赛默飞Ultimate 3000液相色谱DGLC Online-SPE 平台针对血液样本中喹硫平建立了快速检测方法。喹硫平在其适宜的浓度范围内线性关系良好(QTP： 50-3000ppb， 相关系数>0.998)，主峰与前后杂质峰分离度大于2.0，最低浓度点信噪比12.3。同时为高通量快速分析的客户提供了两套各有侧重的分析方案。运用本方法对血液样本中喹硫平快速检测具有指导意义。 1.引言 治疗药物监测(therapeutic drug monitoring，简称TDM)是指在临床进行药物治疗过程中，观察药物疗效的同时，定时采集患者的血液(有时采集尿液、唾液等液体)，测定其中的药物浓度，以便根据患者的具体情况，借助先进的分析技术，并利用药代动力学原理和公式，使给药方案个体化。从而达到满意的疗效。 奎硫平是一种不典型抗精神病药物，主要用于精神分裂症。口服吸收良好、代谢完全，其有效剂量可能较一般人低。 该药品临床表现个体差异显著，为了有效治疗，采用TDM的方式更有利于达到满意治疗效果。本文设计两种血液样本中喹硫平的快速检测方法，具有指导意义。 No Flow %B Time [ml/min] 1 0.000 2 0.000 1.000 32.8 3 0.600 1.000 32.8 4 5.500 1.000 58.3 5 5.600 1.000 95.0 6 11.100 1.000 95.0 7 11.200 1.000 32.8 8 14.200 1.000 32.8 表2.(反冲方法)SPE泵梯度洗脱程序 No Time Flow [ml/min] %B 1 0.000 2 0.200 1.000 10.0 3 0.600 1.000 32.8 4 0.700 1.000 32.8 5 0.900 1.000 10.0 6 1.700 1.000 10.0 7 2.400 1.000 10.0 8 2.500 1.000 10.0 9 3.300 1.000 10.0 阀切换方法：见表5，表6 表5.(反冲方法)阀切换方法 No Time ValveLeft 1 {Initial Time} 10_1 2 0.610 12 3 12.000 10_1 表4.(正冲方法)SPE泵梯度洗脱程序 时间 流速 9B [ml/min1 0.000 0.000 1.000 10.0 0.300 1.000 10.0 2.200 1.000 48.0 2.300 1.000 52.0 3.200 1.000 52.0 3.300 1.000 95.0 6.300 1.000 95.0 6.400 1.000 10.0 表6.(正冲方法)阀切换方法 序号 1 2 3 时间 ValveLeft 初始时间} 10_1 2.200 1 2 3.200 101 2.4方法原理 Dual-Gradient Pump 图1Online-SPE-LC反冲原理图 图2Online-SPE-LC正冲原理图(样品净化阶段和分离/再生阶段) 请注意：图2与图1的差异在于分析泵与阀的连接孔位不同，而自动进样器以及SPE小柱与阀连接孔位保持不变。 3.实验结果与讨论 3.1反冲方法 采用图1反冲原理，反冲方法，对QTP进行线性范围测试，标准工作曲线溶液为客户自行配制， QTP线性相关系数r2为0.998，线性关系良好，截距0.78。标准工作曲线浓度见表7，标曲线性叠图见图3 # 名称 保留时间 评估类型 标准品方法 校正类型 级别"1 级别"2 级别"3 级别 *4 级别"5 级别“6 级别7 浓度单位 因子- 1 IS 3.258 峰面积 ISTD 内标 Lin. WithOffset. 1/A2 1.00 1.00 11.00 1.00 1.00 1.00 1.00 ppb 1.00 2 QTP 5.311 峰面积 内标 IS Lin， WithOffset， 1/A2 50.00 100.00 150.00 300.00 500.00 1000.00 3000.00 ppb 1.00 表7.标准工作溶液配制表 图3标曲线性叠图(7个浓度点) 图4QTP线性曲线(7个浓度点) 图5标曲50ppb谱图放大图 最低浓度50ppb的QTP峰与前后色谱峰分离度分别为2.0和1.5，谱图基线平稳。LOD=12.2ppb， LOQ=40.7ppb。 3.2正冲方法 采用图2正冲原理，正冲方法，对QTP样品进行测试。相比于反冲方法，整体分析时间由14.2分钟缩短为9分钟，效率提升，结果准确。见图6. 图6反冲方法下图，正冲方法上图，叠图谱图放大图 而且灵敏度、柱效也有所提升，见图7，表8. 图7反冲方法上图，正冲方法下图谱图放大叠图 进样进样名称 保留时间序号J所选： minUV_VIS_1 QTP 峰高mAUUV_VIS_1 QTP 类型 UV_VIS_1QTP 峰宽(50%)不对称度 分离度(EP)塔板数min EP EPUV_VIS_1 UV_VIS_1 UV_VIS_1 UV_VIS_1QTP QTP QTP QTP 77sd1 01 5.313 0.75 BMB 0.047 1.24 2.04 69584 104内标和主峰低脓度 5.315 0.95 BMB 0.033 1.36 2.07140578 表8.序号77为反冲方法谱图数据，序号104为正冲方法谱图数据 ( 仅用于研究目的。不可用于 诊 断目的。 ◎2020 Thermo Fisher Scientific Inc. 保留所有权利。 所有商标均为 Thermo Fisher Scientific Inc. 及其子公司的资产，除 非 另有指明 。 ) 治疗药物监测（therapeutic drug monitoring,简称TDM）是指在 临床进行药物治疗过程中，观察药物疗效的同时，定时采集患 者的血液（有时采集尿液、唾液等液体），测定其中的药物浓 度，以便根据患者的具体情况，借助先进的分析技术，并利用 药代动力学原理和公式，使给药方案个体化。从而达到满意的 疗效。