水产品中丁香酚、甲基丁香酚、异丁香酚、甲基异丁香酚、乙酰基异丁香酚和乙酸丁香酚酯检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-427Excellence in Science Excellence in ScienceGCMS-388 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn GCMS 法测定水产品中6种丁香酚类麻醉剂的残留量 GCMS-388 摘要：：本文建立了一种气相色谱质谱法测定水产品中6种丁香酚类麻醉剂残留量的分析方法。水产品样品用乙腈提取，经乙腈饱和正己烷除脂净化，采用选择离子扫描模式(SIM)进行检测，外标法定量。结果表明，6种丁香酚类物质在5.0~200 ug/L 浓度范围内线性关系良好，标准曲线相关系数均大于0.999，检出限在0.029~0.254 ug/L。取校准曲线次低浓度点的标准品溶液连续进样6针，峰面积RSD 均小于5%。实际样品在含量为 0.04 mg/kg 的加标水平下，各组分的基质加标回收率为79.9~99.1%。该方法简单方便，能够快速有效的监测水产品中6种丁香酚类麻醉剂残留量。 关键词：气相色谱质谱联用仪水产品丁香酚 麻醉剂 鲜活水产品由于品种分布的多样性，产品需要跨地区、长时间的运输。为了保持水产品的鲜活、降低微生物感染概率，养殖业内普遍采取活鱼麻醉的方式来减缓其在运输途中的代谢及损伤。 丁香酚 (eugenol) 为苯丙素类化合物，自20世纪70年代初被发现对鱼类有强烈的麻醉作用后，由于其成本低、效果好、残留期短等特点而被广泛用于渔业生产、科学研究和活体运输等操作中。有数据显示，丁香酚类化合物(包括丁香油、丁香酚、甲基丁香酚、异丁香酚等)是致癌物或潜在的致癌物。世界癌症研究机构也因丁香酚具有潜在致癌性而将其划分为第3类致癌物。因此，建立水产品中多种丁香酚类化合物残留 实验部分 1.1仪器 GCMS-QP2020 NX 气相色谱-质谱联用仪 1.2分析条件 色谱柱： Rxi-5Sil MS (30 m×0.25mm× 0.25 um) 进样口温度：280°℃ 进样方式：不分流进样 进样量：1pL 柱温程序： 40℃(1min)_25C/min_140℃_10°C/min_200°C_25°C/min_300°C(2 min) 控制模式：恒线速度控制 的定性定量检测方法，对于保障水产品质量安全和人类身体健康有着重大的意义。 目前，我国暂无对丁香酚残留物检测的相关标准，只有补充检验方法 BJS201908《水产品及水中丁香酚类化合物的测定》，该方法中提供了样品的前处理和仪器测试方法。 本文参考补充检验方法 BJS201908《水产品及水中丁香酚类化合物的测定》，结合QuEChERS前处理技术，采用选择离子扫描模式 (SIM) 进行检测，建立一种水产品中6种丁香酚类化合物的分析方法，该方法操作简单，快速高效，灵敏度高，可为水产品中丁香酚类麻醉剂的检测提供参考。 线速度：36.1 cm/sec 离子化方式：El 离子源温度：230℃ 接口温度：280°℃ 采集模式： SIM 模式 检测器电压：调谐电压 +0.3kV 1.3样品前处理 图1 样品前处理流程 结果与讨论 2.1标准色谱图 标准色谱图如图2所示，化合物相关信息见表1，化合物质量色谱图见图3. 图2 6种丁香酚类物质标准色谱图(浓度为50 ug/L) 表1 6种丁香酚类组分信息 编号 中文名称 英文名称 CAS 保留时间 (min) 定量离子 (m/z) 定性离子 (m/z) 丁香酚 Eugenot 97-53-0 7.847 164 77、103 2 甲基丁香酚 Methyleugenol 93-15-2 8.225 178 107、147 3 异丁香酚 Isoeugenol 97-54-1 8.772 164 77、103 4 甲基异丁香酚 Methyl isoeugenol 93-16-3 9.182 178 107、163 5 乙酰基异丁香酚 Acetyl isoeugenol 93-29-8 9.381 164 149、131 6 乙酸丁香酚酯 Eugenol acetate 93-28-7 10.341 164 149、131 乙酰基异丁香酚 图3 6种丁香酚物质的质量色谱图(浓度为5.0 pg/L) 2.2标准曲线和检出限 分别称取不含目标物的空白水产品样品5g， 按1.3方法进行样品前处理，用基质提取液稀释标准溶液，目标组分浓度分别为5.0、10、20、50、100和200 ug/L。以浓度为横坐标，定量离子峰面积为纵坐标进行线性拟合，各组分标准曲线如下所示。以3倍信噪比 (S/N)计算各目标物的检出限，各物质检出限和标准曲线相关系数如下表2所示： 图4 6种丁香酚类物质标准曲线 表26种丁香酚类物质相关系数、检出限 NO. 组分名称 相关系数(R) 检出限((ug/L) 丁香酚 0.9996 0.236 2 甲基丁香酚 0.9995 0.254 3 异丁香酚 0.9993 0.207 4 甲基异丁香酚 0.9995 0.049 5 乙酰基异丁香酚 0.9995 0.052 6 乙酸丁香酚酯 0.9995 0.029 2.3重复性实验 取校准曲线浓度系列中的次低浓度点10 pg/L标准溶液，重复进样6次，考察仪器重复性，各组分峰面积及 RSD% 见表 3。 表3 6种丁香酚类物质的重复性结果 No. 组分名称 峰面积 21 2 3 6 RSD (%) 2 丁香酚 3174 2915 3089 2932 2900 2984 3.66 甲基丁香酚 2562 2420 2563 2647 2726 2432 4.66 异丁香酚 6953 6412 6706 6957 6771 6839 2.99 甲基异丁香酚 2704 2642 2703 2947 2606 2805 4.54 5 乙酰基异丁香酚 3270 3555 3567 3506 3385 3552 3.45 6 乙酸丁香酚酯 5533 5379 5484 5957 5444 5649 3.74 2.4样品加标回收率 取5g均质后的空白样品，添加6种丁香酚类物质标准溶液，加标量为 0.04 mg/kg，按照上述前处理方法处理后上机，平行处理3份，样品加标测定结果及加标回收率结果见表 4。 表4 样品加标回收率结果 No. 化合物名称 测定结果(mg/kg) 平均回收率 1 2 3 (%) 1 丁香酚 0.031 0.029 0.041 84.6 2 甲基丁香酚 0.033 0.029 0.034 79.9 3 异丁香酚 0.039 0.038 0.040 97.4 4 甲基异丁香酚 0.035 0.033 0.042 91.9 5 乙酰基异丁香酚 0.030 0.035 0.042 88.7 6 乙酸丁香酚酯 0.038 0.037 0.043 99.1 2.5实际样品测试 取某超市采购的市售鱼肉，采用1.3前处理方法进行6种丁香酚类物质的检测，得到该样品色谱图，如图5，样品中均未检测出6种丁香酚类物质残留。 图5 鱼肉样品色谱图 结论 本方法采用岛津 GCMS-QP2020 NX气相色谱-质谱联用仪检测水产品中6种丁香酚类物质，在5.0~200ug/L浓度范围内标准曲线线性良好，相关系数R均在0.999以上，检出限在0.029~0.254 ug/L。取校准曲线浓度系列的次低浓度标准溶液连续进样6针，峰面积RSD 均小于5%，精密度良好。在 0.04 mg/kg 的空白样品加标水平下，各组分的基质加标回收率为79.9~99.1%。该方法简单方便，灵敏度高，能够有效监测水产品中6种丁香酚类麻醉剂的残留量。 岛津应用云 本方法采用岛津GCMS-QP2020   NX气相色谱-质谱联用仪检测水产品中6种丁香酚类物质，在5.0~200   μg/L浓度范围内标准曲线线性良好，相关系数R均在0.999以上，检出限在0.029~0.254   μg/L。取校准曲线浓度系列的次低浓度标准溶液连续进样6针，峰面积RSD均小于5 %，精密度良好。在0.04   mg/kg的空白样品加标水平下，各组分的基质加标回收率为79.9~99.1 %。该方法简单方便，灵敏度高，能够有效监测水产品中6种丁香酚类麻醉剂的残留量。