食盐替代物中咸度检测方案(感官智能分析)

食品m址科技分析检测·Vol.38，No.04，2017 食品工科技分析检测Science and Technology of Food Industry 电子舌与感官评定对咸度评价的比较 黄孝闯张雅玮任晓，朱玉霞，刘世欣，鲍英杰，刘成花李顺彭增起(南京农业大学食品科技学院江苏南京210095) 摘 要：本文以氨基酸、有机酸与氯化钠的混合溶液为研究对象，利用电子舌和感官评定方法对该混合溶液的咸度等味道进行评定。电子舌同时对溶液的咸、酸、苦、涩、甜五种味道进行评定，感官方法只对溶液的咸度进行评定。通过对电子舌评定结果和感官评定结果进行主成分分析和相关性分析发现两者呈现显著正相关(r=0.969 p<0.01)。由此可知电子舌可以对溶液的的度进行客观准确地评定。 关键词：电子舌感官评定，咸度相关性分析 Comparison of electronic tongueand sensory on evaluation of saltiness HUANG Xiao-chuang ，ZHANG Ya-wei ，REN Xiao-pu ZHU Yu-xia， LIU Shi-xin ，BAO Ying-jie LIU Cheng-hua ，LI Shun ，PENG Zeng-qi( College of Food Science and Technology Nanjing Agricultural University Nanjing 210095 ，China) Abstract： The saltiness of the mixtures of amino acid ，organic acid and sodium chloride was evaluated by electronic tonguesystem and sensory evaluation method. The saltiness sourness ，bitterness astringent and sweetness of the solution were evaluatedby electronic tongue system but only the saltiness was evaluated by sensory evaluation method.Based on Principal componentanalysis and Pearson correlation analysis it was found that the results evaluated by electronic tongue were almost similar to theresults by sensory evaluation. There were significant positive correlation(r=0.969p<0.01) between the saltiness results ofelectronic tongue and sensory evaluation. Accordingly ，electronic tongue system could evaluate the saltiness of solutionsaccurately and objectively. Key words： electronic tongue； sensory evaluation； saltiness； correlation analysis 中图分类号：TS201.1 文献标识码：A 文章编号：1002-0306(2017)11-0285-06 食盐是人们日常生活所必需的调味品，氯化钠是其主要成分。氯化钠具有维持细胞外液渗透压和调节体内酸碱平衡的作用，是人体必不可少的重要物质。然而食盐的过量摄入会诱发一系列疾病，如高血压和心血管疾病等11-3]，严重威胁人们的身体健康。为了减少氯化钠的摄入量，关于食盐替代物的研究越来越多。为了开发新型的食盐替代物，国内外有许多关于酸、甜、苦等其他味道对氯化钠咸度的影响的研究[4。 Prescott 等研究发现0~18 mmol/L柠檬酸对0.15 mol/L 和0.3 mol/L氯化钠溶液的咸度有增强作用，而0~19 mg/mL 蔗糖对1.5~40 mg/mL氯化钠溶液的咸度却没有影响161鲜味物质谷氨酸钠(MSG) 也可以增强食物的咸度”。在食盐替代物的研究过程中必不可少的就是对咸度的评定，通过反 复的评定最终筛选出咸度适宜的最佳低低盐配比。目前检测食品质量和味道的方法主要有感官评定法和电子舌评定法。上述研究中均是采用感官评定方法，由专业的感官评定人员对样品的咸度进行评定。感官评定需要经过长期训练、拥有特殊味觉判别能力的专业人士来进行判断。此外，人的感觉器官在分辨力、敏感度、稳定性等方面存在个体差异，并且很容易受外界因素的干扰8。而电子舌是模仿人体味觉机理研制出来的一种智能识别电子系统，是近年来发展起来的一种分析、识别液体味道的新型检测手段19-10]。相比之下电子舌检测技术的结果输出比传统感官评定结果输出更加快速、稳定和标准。电子舌检测技术在饮料鉴别与区分、酒类产品(啤酒、清酒、白酒和红酒)[12-15]区分与品质检测、农产品 ( 收稿日期：2016-12-27 ) ( 作者简介：黄孝闯(1991-)男 硕 士研究页研究方向：畜产品加工与质量控制，E-mail：2014108047@njau.edu.cn. ) ( * 通讯作者：彭增起(1956-)男博士教授，研究方向：畜产品加工与质量控制 ，E-mail： zqpeng@ njau.edu.cn。 ) 表1氯化钠和氨基酸、有机酸的浓度(mg/mL) Table 1Levels of sodium chloride amino acid and organic acid( mg/mL) 浓度水平 氯化钠 L-谷氨酸 L-赖氨酸 柠檬酸 苹果酸 1 1.83 0.38 0.23 0.26 0.19 2 3.66 1.54 0.94 1.03 0.76 3 7.31 7.68 4.68 4.14 3.02 4 14.63 - 5 29.25 一 - 识别与分级[16-17]、航天医学检测18、制药工艺研究[19-20]、环境监测211等中有较多应用。牛云蔚[221等对五种不同樱桃酒的属性(酸、甜、苦、涩)进行感官评价和电子舌分析，利用主成分分析对电子舌区分樱桃酒的能力进行了评价，发现感官评价结果与电子舌分析结果之间具有较高的相关性。 然而关于电子舌在食盐替代物研究中对咸度的评定却鲜有报道。因此，本实验采用日本 INSENT公司的 SA402B电子舌，以添加氨基酸、有机酸的氯化钠混合溶液为研究对象，对其咸度进行评定，并与感官评定结果进行比较，探究电子舌在咸度评定上的适用性以及在食盐替代物研究中的应用前景。 1 材料与方法 1.1 材料与仪器 氯化钠、氨基酸，有机酸均为食品级 购买于Sigma 公司。 电子舌(型号： SA402B) 日本INSENT公司。 AL104型电子天平 上海Mettler Toledo 公司。 1.2 氯化钠混合溶液的配制 本文选取L-谷氨酸(L-Glu)、L-赖氨酸(L-Lys)、L-柠檬酸(L-Citric)、L-苹果酸(L-Malic)为研究对象，以 0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.50 mol/L(即1.83、3.66、7.31、14.63、29.25 mg/mL)的氯化钠作为反应浓度123-24]。将不同浓度的谷氨酸、赖氨酸、柠檬酸、苹果酸(表1所示)分别添加至1.83、3.66、7.31、14.63、29.25 mg/mL的氯化钠溶液当中配制成4组不同的溶液。 1.3 感官评定 溶液咸度的感官评价采用9分制定量描述性评分法(9=非常强烈，7=强烈，5=适中，3=微弱，1=几乎感觉不到)。以纯净水(咸度分数为1)和0.625 mol/L 氯化钠溶液(分度分数为9)为参比液【623]。在参加正式实验之前，感官评定人员先对0.2%、0.4%、0.8%、1.0%和1.5%(w/v) NaCl 溶液的咸度进行评定并按照咸度依次增加的顺序进行排列。最终筛选出15名排列正确的人员其中8名女生年龄在20~30岁之间125]。在进行感官评定实验之前至少1h之内，除纯净水外感官评定人员不得进食其他食物和饮料。所有评定人员只对溶液的咸度进行评分不考虑其他的味道。每次品尝量为5mL，每次评定结束后用去离子水漱口，且两次评定之间间隔60s.混合溶液在评定前24h完成配制，放置在4℃条件下[26-27]，于感官评定之前取出，待溶液温度至室温后再进行感官评定。 1.4 电子舌评定 味觉信号采用日本 INSENT 公司的 SA402B电子舌系统进行检测。采用同人舌头味觉细胞工作原理相类似的人工脂膜传感器技术，选用CAO、COO、AE1、AAE、CTO5个传感器阵列和一个参比电极(Ag/AgCl) ，可以将电信号强度转换为对应的味觉信号强度，从而能够数字化的评价样品的酸味、苦味、涩味、鲜味、咸味5个基本味觉感官指标，同时分析出苦的回味、涩的回味和鲜的回味(丰富度)【28-291。CAO获取的电信号强度对应转换为样品的酸味强度 ，COO反映样品的苦味强度 ，AE1 反映样品的涩味强度 AAE反映样品的鲜味强度 ，CTO 反映样品的咸味强度。在正式测定前传感器和参比电极需要进行前处理、校准、初始化过程，以此确保数据的稳定性和可靠性。每个样品均采集4次，采用最后三次的数据。 1.5 数据处理 将电子舌所测得的的、酸、苦、涩、鲜五组数据和感官咸度评定数据进行主成分分析(PCA)，采用Pearson 相关性分析对电子舌咸度评分和感官咸度评分进行相关性分析，用邓肯多重比较法( Duncan'sMultiple-rang test) 进行差异显著性分析。 2结果与讨论 2.1 氨基酸与氯化钠混合溶液减度的评定 2.1.1 L-谷氨酸与氯化钠混合溶液咸度的评定E电子舌除了对溶液的咸度进行评定以外，还对溶液的酸、苦、涩、鲜四种味道进行评定。将电子舌所测得的咸、酸、苦、涩、鲜五组数据和感官咸度评分共六个因素进行主成分分析(PCA)得到主成分载荷图18](图1)。由图1可以看出，PC1 和 PC2累积方差贡献率为80.644%反映了样品的大部分信息。在图上距离越近，因素间的相关性越强。妆图1所示，“感官咸度评分”与电子舌输出数据“咸”距离最近，而与电子舌其他数据“酸'、“苦”、“涩’、“鲜”距离很远，说明电子舌对溶液咸度的评分“咸”与感官咸度评分相关性较高。 图2是L-谷氨酸与氯化钠混合溶液减度的感官评定结果，可以看出在相同的氯化钠浓度水平下，混合溶液与氯化钠溶液的咸度差异不显著(p>0.05)；图3是电子舌对溶液咸度的评定结果，混合溶液与氯化钠溶液的咸度有显著性差异(p<0.05)在1.83、7.31 mg/mL氯化钠水平下，混合溶液的咸度低于氯化钠溶液的咸度，而在3.66、14.63、29.25 mg/mL氯化钠水平下，混合溶液的咸度高于氯化钠溶液的咸度。 图1 L-Glu 与 NaCl 混合溶液电子舌评定与感官评定结果相关性 PCA分析图 Fig.1 PCA plot of correlation between electronic tongueand sensory evaluation in L-Glu and NaCl mixtures 低浓度氯化钠水平下，谷氨酸对其咸度有抑制效果，但在3.66 mg/mL氯化钠水平下，谷氨酸对其咸度却有增强作用，而在高浓度氯化钠水平下，谷氨酸对其咸度有增强作用。谷氨酸对氯化钠咸度的作用效果受物质浓度的影响，Kempl30研等研究发现低浓度的谷氨酸钠对氯化钠咸度无影响，高浓度的谷氨酸钠则对氯化钠的咸度有增强作用。将L-谷氨酸与氯化钠混合溶液减度的感官评定结果和电子舌评定结果进行相关性分析，发现其相关性系数 r=0.993(p <0.01)。 图2 L-Glu 与 NaCl 混合溶液咸度感官评分 Fig.2The saltiness of L-Gluand NaCl mixtures by sensory evaluation 注： a~d： 不同字母表示相同氯化钠浓水水平下各组数据差异显著(p<0.05)图3、图5、图6、图8、图9、图11、图12同. 图3 L-Glu 与 NaCl 混合溶液咸度电子舌评分 Fig.3 The saltiness of L-Gluand NaCl mixtures by electronic tongue 2.1.2 L-赖氨酸与氯化钠混合溶液咸度的评定 对L-Lys 与 NaCl 混合溶液的感官评度评分和电子舌所 测得的、酸、苦、涩、鲜五组数据进行主成分分析，如图4所示，PC1和PC2累积方差贡献率为81.219%，“感官咸度评分”和电子舌数据“咸”在图上位置重合，而与电子舌其他数据“酸”、“苦”、“涩”、“鲜”距离很远说明电子舌对溶液咸度的评分“咸”与感官咸度评分相关性较高。 图4 L-Lys 与 NaCl 混合溶液电子舌评定与感官评定结果相关性 PCA 分析图 Fig.4 PCA plot of correlation between electronic tongueand sensory evaluation in L-Lys and NaCl mixtures 图5是L-Lys 与 NaCl 混合溶液咸度的感官评定结果，可以看出在相同的氯化钠浓度水平下，整体上混合溶液与氯化钠溶液的咸度差异不显著(p>0.05)；图6是电子舌对溶液咸度的评定结果在相同的氯化钠浓度水平下，混合溶液的咸度显著高于氯化钠溶液的的度(p<0.05)。将L-赖氨酸与氯化钠混合溶液咸度的感官评定结果和电子舌评定结果进行相关性分析，发现其相关性系数 r =0.989(p<0.01)。 图5 L-Lys 与 NaCl 混合溶液度度感官评分Fig.5 The saltiness of L-Lysand NaCl mixtures by sensory evaluation 2.2 有机酸与氯化钠混合溶液咸度的评定 2.2.1 L-Citric 与 NaCl 混合溶液咸度的评定 对L-Citric与 NaCl 混合溶液的感官平度评分和电子舌所测得的咸、酸、苦、涩、鲜五组数据进行主成分分析。如图7所示 ，PC1 和 PC2累积方差贡献率为97.981%，“感官咸度评分”和电子舌数据“咸”在图上位置相近说明电子舌对溶液液度的评分“同”与感官咸度评分相关性较高。在 PCA 分析图上，“感官咸度评分”除了与电子舌数据“减”在图上位置相近之外，还与电子舌数据“苦”有着非常近的距离。文中主要研究的是两种方式对溶液咸度的评定，而没 图6 L-Lys 与 NaCl 混合溶液咸度电子舌评分 Fig.66The saltiness of L-Lys and NaCl mixtures by electronic tongue 有将苦味的感官评定和电子舌评定进行比较。在L-Citric与 NaCl 混合溶液味道的电子舌评定中，“苦”味可能受到其他味道的干扰而判断有误，导致其在PCA图上与“感官咸度评分”相距很近，但不影响对“感官咸度评分”和“咸”之间相关性的分析。 图7L-Citric 与 NaCl 混合溶液电子舌评定与感官评定结果相关性 PCA分析图 Fig.7 PCA plot of correlation between electronic tongueand sensory evaluation in L-Citric and NaCl mixtures 图8是L-Citric 与 NaCl 混合溶液咸度的感官评定结果。在相同的氯化钠浓度水平下添加0.26 mg/mLL-柠檬酸的混合溶液与氯化钠溶液的咸度殳有显著差异(p>0.05)，添加1.03、4.14 mg/mLL-柠檬酸的混合溶液的咸度则显著高于氯化钠溶液的的度(p<0.05)；但是在 29.25 mg/mL氯化钠浓度下添加4.14 mg/mL L-柠檬酸时，混合溶液的咸度则受到抑制不同的味道在口中具有不同的传导途径，当氯化钠和柠檬酸的浓度过高时，柠檬酸会对氯化钠的味觉传导途径产生影响，阻碍了氯化钠咸度的感知[311。 图9是电子舌对溶液咸度的评定结果。在1.83、3.66 mg/mL的氯化钠浓度下，混合溶液的咸度显著高于氯化钠溶液(p<0.05)，但随着氯化钠浓度的升高混合溶液的度有所下降。感官评定和电子舌评定均表明添加1.03、4.14mg/mL的L-柠檬酸对1.83、3.66 mg/mL 氯化钠溶液的有度有增强作用，随着氯化钠浓度的升高，柠檬酸对咸度的增强作用逐渐减弱并转变成对咸度的抑制作用。将L-柠檬酸与氯化钠混合溶液咸度的感官评定结果和电子舌评定结果进行相关性分析，发现其相关性系数r=0.966(p<0.01). 2.2.2 L-Malic 与 NaCl 混合溶液咸度的评定 对 图8 L-Citric 与 NaCl 混合溶液咸度感官评分 Fig.8 The saltiness of L-Citricand NaCl mixtures by sensory evaluation 图9L-Citric 与 NaCl 混合溶液咸度电子舌评分 Fig.9The saltiness of L-Citric and NaCl mixtures by electronic tongue L-Malic与 NaCl 混合溶液的感官咸度评分和电子舌所测得的咸、酸、苦、、五五组数据进行主成分分析(如图10所示)。PC1和 PC2累积方差贡献率为81.818%，“感官咸度评分”和电子舌数据“咸”在图上位置相近表明电子舌对溶液夜度的评分“咸”与感官咸度评分相关性较高。 图10 L-Malic 与 NaCl 混合溶液电子舌评定与感官评定结果相关性 PCA分析图 Fig.10 PCA plot of correlation between electronic tongueand sensory evaluation in L-Malic and NaCl mixtures 图11是 L-Malic 与 NaCl 混合溶液咸度的感官评定结果。在1.83、3.66 mg/mL的氯化钠浓度下，添加0.76、3.02 mg/mLL-苹果酸的混合溶液的咸度显著高于氯化钠溶液(p<0.05)；在29.25 mg/mL氯化钠浓度下添加3.02 mg/mL L-苹果酸的混合溶液的咸度显著低于氯化钠溶液(p<0.05)。图12是电子舌对溶液咸度的评定结果。在1.83，3.66 mg/mL的氯化钠浓度下混合溶液的咸度显著高于氯化钠溶液 (p<0.05)；而在其他氯化钠浓度下，混合溶液的咸度显著低于氯化钠溶液(p<0.05)其中在7.31 mg/mL的氯化钠浓度下，添加3.02 mg/mL L-苹果酸的混合溶液的减度显著高于其他两组混合溶液，但仍显著低于氯化钠溶液(p<0.05)。将L-苹果酸与氯化钠混合溶液咸度的感官评定结果和电子舌评定结果进行相关性分析，发现其相关性系数r=0.984(p<0.01)。 图11 L-Malic 与 NaCl 混合溶液咸度感官评分 Fig.11 The saltiness of L-Malicand NaCl mixtures by sensory evaluation 图12 L-Malic 与 NaCl 混合溶液咸度电子舌评分 Fig.122The saltiness of L-Malicand NaCl mixtures by electronic tongue 在氨基酸与氯化钠混合溶液咸度的评定中，感官评定结果表明L-谷氨酸和L-赖氨酸的添加整体上对氯化钠的咸度无显著影响；而在电子舌评定结果中可知，L-谷氨酸对低浓度氯化钠的咸度有抑制效果而对高浓度氯化钠的咸度有增强作用，但是在3.66mg/mL 的低氯化钠水平下，谷氨酸对其咸度却有增强作用；L-赖氨酸对氯化钠溶液的咸度有增强作用。感官评定结果和电子舌评定结果存在一定的差异。因为感官评定是符合韦伯-费希纳定律的一般情况下当物理刺激量呈几何级增长时才会引起味觉感知量的数学级增长，即感知量的增加小于物理量的增加；而电子舌捕获的仅仅是物理量的改变，这种改变程度与感官评定中味觉感知量的改变是不一样的。在L-柠檬酸与氯化钠混合溶液咸度的评定中，电子舌与感官评评结果均表明添加1.03、4.14 mg/mLL-柠檬酸对1.83、3.66 mg/mL氯化钠溶液的咸度有增强作用；在L-苹果酸与氯化钠混合溶液减度的评定中，电子舌与感官评定结果均表明添加0.76、3.02 mg/mL L-苹果酸对1.83、3.66 mg/mL 氯化钠溶液的洞度有增强作用。L-柠檬酸与L-苹果 酸本身没有咸味，但它们的添加对氯化钠溶液的咸度有增强作用这与 Prescott 和王仕钰等人的研究结果一致。 Prescott20]等研究发现0~18 mmol/L柠檬酸对0.15 mol/L 和0.3 mol/L 氯化钠溶液的咸度有增强作用，王仕钰1321等通过研究L-苹果酸、珀酸、柠檬酸、富马酸等有机酸味剂与低钠盐的复配效果，发现添加1.6%L-苹果酸的复配溶液咸味纯正，增咸效果可达1.33倍。因此可以推测L-柠檬酸、L-苹果酸与氯化钠之间存在交互作用，该作用增强了氯化钠溶液的咸度。 对以上四组混合溶液的咸度电子舌评定结果和感官评定结果进行相关性分析得到相关性系数r=0.969(p<0.01)。根据主成分分析和相关性分析结果，可知电子舌对溶液咸度的评定结果与感官评定结果有着显著的正相关。 3 结论 本文以氨基酸、有机酸与氯化钠混合溶液为研究对象利用电子舌和感官评定方法对混合溶液的咸度进行评价。在对L-柠檬酸与氯化钠、L-苹果酸与氯化钠的混合溶液咸度的评定中，电子舌和感官评定结果均发现L-柠檬酸、L-苹果酸的添加对1.83、3.66 mg/mL氯化钠溶液的有度有增强作用。研究结果发现电子舌系统对溶液咸度的评定结果与感官评定结果呈现显著正相关(r=0.969 p<0.01)。本文为今后电子舌在食盐替代物研制中关于咸度评定提供了理论依据，电子舌可以实现对咸度的快速有效的评定。 ( 参考文献 ) ( [ 1 ] In ter s alt Cooperative ResearchGroup. 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