鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留检测方案(液质联用仪)

thermoscientific 热线8008105118电话4006505118www.thermofisher.com 全新一代三重四极杆液质联用TSQ Quantis检测鸡蛋中氟虫腈及其代谢物残留 王伟吕辰 赛默飞世尔科技(中国)有限公司色谱质谱部 关键词： Thermo ScientificTM TSQTM TSQ Quantis，固相萃取 SPE，氟虫腈及其代谢物，鸡蛋 氟虫腈又名锐劲特曾是广泛用于农业生产的一种苯基吡唑类高效杀虫剂，但近年来在禽类和蛋鸡上的非法使用，会导致禽肉和鸡蛋中氟虫腈残留，同时环境中残留的氟虫腈通过生物富集作用可以进入食物链，最终都会给人类健康带来潜在的危害，因此我国规定2009年10月1日起禁用氟虫腈。世界卫生组织将它列为“对人类有中度毒性”的化学品，大量进食含有高浓度氟虫腈的食品，会损害肝脏、甲状腺和肾脏。欧盟法律规定，氟虫腈不得用于人类食品产业链中的畜禽。但近日受杀虫剂氟虫腈污染的“毒鸡蛋”】风波在欧洲愈演愈烈，西欧多国均遭波及，民众甚至“谈蛋色变”，而国内现行的检测氟虫腈的标准方法不适用于鸡蛋样品，因此建立简便、高效、准确的鸡蛋中氟虫腈及其代谢物的检测方法具有重要的现实意义。 2.实验条件 2.1仪器装置 LC-MS/MS分析采用 Thermo ScientificTM VanquishTM BinaryHorizon 超高压液相色谱串联 TSQ Quantis 质谱仪。 2.2仪器方法 2.2.1液相色谱方法 本实验结合鸡蛋的成分特点，同时为了提高目标物的提取效率和最大限度的降低动物源性基质所带来的干扰，开发了SPE 快速前处理方法结合 LC-MS/MS 仪器的检测方法。结果表明，该方法中氟虫腈及其代谢物在浓度 5pg/mL~100ng/mL的范围内线性关系良好，线性相关系数(R²)均大于 0.995，检出限均为5 pg/mL，回收率范围为：88%~110%。利用该方法能够针对鸡蛋中氟虫腈及其代谢物开展日常残留检测工作。 色谱柱：Thermo ScientificTM HypersilTM Gold(100mm×2.1 mm， 1.9um) 柱温：30℃；进样量：5uL 流动相A为水，B为甲醇，梯度洗脱条件见表1。 Time(min) Flow Rate (mL/min) A% B% 0.0 0.3 90 10 0.5 0.3 90 10 2.5 0.3 5 95 4.0 0.3 5 95 4.1 0.3 90 10 6.0 0.3 90 10 2.2.2质谱方法 电喷雾离子源(ESI)：负离子模式；监测模式：选择反应监控(SRM)；喷雾电压：2800V；鞘气压力：40 Arb；辅助气压力：5 Arb；蒸发温度：400℃；离子传输管温度： 230℃；碰撞气压力：2.0 mTorr。 选择反应监测离子对条件见表2。 2.3样品前处理 称取2.5g鸡蛋，加入水5mL涡旋分散均匀，依次加入10mL 0.1%甲酸乙腈，2g氯化钠，充分涡旋1min 超声波提取 15 min， 10000 r/min 低温4℃下离心5 min ， 待净化。 取Thermo HyperSep Retain-PEP 固相萃取柱(依次用3mL甲醇，3mL水活化)，待水流尽后取2 mL 上清液上样，收集中后段滤液，准确取0.5 mL至进样小瓶，再加0.5 mL水，涡旋混匀后进 LC-MS/MS 分析。 图1.氟虫腈及其代谢物 5 pg/mL 选择离子流提取图。 Compound Precursor Product CE RF Lens (m/z) (m/z) (V) (V) 249.917 27 Fipronil 氟虫腈 434.912 330.030* 16 136 Fipronil desulfinyl 282.042 31 氟甲腈 386.912 351.042* 13 152 Fipronil sulfide 418.912 382.988 13 171 氟虫腈亚砜 261.958* 28 Fipronil sulfone 氟虫腈砜 450.912 243.988 48 200 414.988* 16 注：标、“*”为定量离子 2.4样品基质溶液 按照2.3的程序处理鸡蛋样品，得到基质样品溶液。 2.5标准溶液的配制 取适量的氟虫腈类化合物标准品混合储备液，用样品基质溶液稀释成标准系列溶液，浓度分别为： 5 pg/mL， 10 pg/mL，50 pg/mL， 100 pg/mL，1 ng/mL， 50 ng/mL， 100 ng/mL。 3.结果与讨论 3.3回收率 3.1灵敏度测试 采用上述仪器分析方法，氟甲腈、氟虫腈砜、氟虫腈亚砜、氟虫腈四种化合物的检出限均为5 pg/mL，提取离子流图见图1。 Thermo ScientificTM HyperSepTM Retain-PEP 固相萃取柱可有效去除鸡蛋提取液中脂肪和磷脂等杂质，利用该方法检测鸡蛋中氟虫腈及其代谢物，回收率在88%~110%，加标样品浓度 12 pg/kg 的提取离子流图见图3。 3.2线性范围测试 采用上述仪器分析方法，氟虫腈砜、氟甲腈、氟虫腈亚砜、氟虫腈四种化合物的线性范围均为 5 pg/mL~ 100 ng/mL，线性相关系数分别为 0.9981、0.9966、0.9980、0.9956，线性关系良好，线性方程见图2。 图2.氟虫腈及其代谢物线性范围。 图3.鸡蛋基质加标浓度提取离子流图。 thermoscientific 4.结论 本文建立了固固萃取 SPE 前处理方法结合三重四极杆液质联用仪(TSQ Quantis)分析鸡蛋中氟虫及及其代谢物的快速检测方法。该方法前处理简单便捷可以有效去除基质干扰满足高通量分析要求，此外由实验结果可以看出，基于 TSQQuantis 建立的检测方法具有优异的灵敏度，可用于鸡蛋中氟虫腈及其代谢物的日常分析检测。 口背 口 赛默飞色谱 与质谱中国 本文建立了固相萃取 SPE 前处理方法结合三重四极杆液质 联用仪（TSQ Quantis）分析鸡蛋中氟虫腈及其代谢物的快 速检测方法。该方法前处理简单便捷可以有效去除基质干扰 满足高通量分析要求，此外由实验结果可以看出，基于 TSQ  Quantis 建立的检测方法具有优异的灵敏度，可用于鸡蛋中 氟虫腈及其代谢物的日常分析检测。