水体、乳品等样品中高氯酸根和氯酸根检测方案(液相色谱仪)

· AgilentTrusted Answers 应用简讯 Agilent食品与环境 Trusted Answers 采用两性离子型亲水作用色谱柱(HILIC-Z)分析高氯酸根和氯酸根 作者 前言 雷启福 安捷伦科技(中国)有限公司 随着色谱技术的发展，亲水作用色谱 (HILIC)模式不仅适合分析强极性有机化合物，也可以用于分析无机离子。高氯酸盐和氯酸盐在食品、环境、制药领域的检测越来越受到关注。当需要检测微量或痕量高氯酸根离子时，通常会用到高灵敏度检测器。与之配套的色谱系统(如离子交换色谱)由于存在兼容性问题，可能使分析难以实施，因此开发高氯酸根和氯酸根的高灵敏度色谱分离方法尤为重要。 本文采用硅胶表面键合两性离子的亲水作用色谱柱 (Poroshell HILIC-Z)，开发出一种LC-QQQ 方法。该方法可快速、高灵敏度地检测高氯酸和氯酸根离子，适用于对水体、乳品等样品中的微量高氯酸根离子进行分析。 Poroshell HILIC-Z 固定相表面键合的两性离子不仅有利于增强亲水相互作用，还有利于增强离子间静电作用力，提高色谱柱的选择性。甲酸铵或乙酸铵体系通常是 HILIC 模式下添加剂的首选"，离子强度即浓度变化通常会影响亲水作用色谱分离的峰形和保留。 在本应用色谱条件方法开发过程中，氯酸根保留和峰形都很好，但高氯酸根的保留与流动相 pH、有机相比例等有关。比如，调节流动相体系至中性时(10 mmol/L甲酸铵，pH6.7)时，调整有机相(乙腈)比例至90%，高氯酸根依然在死时间附近出峰，结果如图3所示。因此，利用 HILIC 模式开发液相方法时，可以通过pH、盐浓度(离子强度)和有机相等的的优化来调整选择性，以获得更好的保留和分离。 HILIC 模式下通常使用高比例有机相以提高质谱检测的灵敏度，本实验采用70%乙腈作为起始流动相。该方法使高氯酸根和氯酸根在 0.1-100 ng/mL 范围内获得了良好的线性，RSD<3%(n=5)。 HPLC 条件 (Agilent 1260 RRLC) 色谱柱 InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z， 2.1×100 mm(部件号：685775-924) 流动相A 0.05%甲酸 流动相B 乙腈 梯度 0-2.5 min 70% B； 2.5-5 min 70%-60% B； 5-10 min 60% B；后运行： 3min 流速 0.5 mL/min 柱温 35°C 进样量 3pL 运行时间 10 min 溶剂t 乙腈：水=50：50 表2.质谱条件 MRM 离子对/设置 (Agilent 6460 三重四杆杆质谱仪) MRM 离子对/设置 (Agilent 6460 三重四杆杆质谱仪) 化合物/目标物 母离子(m/z) 子离子(m/z) 碎裂电压 碰撞能量 碰撞池加速器电压 电离模式 cIo" 101 85 135 10 3 负 clo 99 83* 135 10 3 负 clo， 85 69 135 10 3 负 clo， 83 67* 135 10 3 负 *定量离子对 氯酸根校正曲线 250 图2.高氯酸根 (0.1-100 ng/mL) 和氯酸根(0.2-200 ng/mL)的校准结果 图3.高氯酸根和氯酸根在 HILIC-Z 色谱柱上的保留(流动相：水(含10mmol/L甲酸铵)：乙腈=10：90) ( 参考文献 ) ( 1 . Anne Mack， 亲水相互作用色谱法分析金 属 、卤化物和无机离 子 (5991-8602ZHCN) ) Poroshell HILIC-Z 固定相表面键合的两性离子不仅有利于增强亲水相互作用，还有利于增强离子间静电作用力，提高色谱柱的选择性。甲酸铵或乙酸铵体系通常是 HILIC 模式下添加剂的首选，离子强度即浓度变化通常会影响亲水作用色谱分离的峰形和保留。在本应用色谱条件方法开发过程中，氯酸根保留和峰形都很好，但高氯酸根的保留与流动相 pH、有机相比例等有关。比如，调节流动相体系至中性时（10 mmol/L 甲酸铵，pH 6.7）时，调整有机相（乙腈）比例至 90%，高氯酸根依然在死时间附近出峰。因此，利用 HILIC 模式开发液相方法时，可以通过 pH、盐浓度（离子强度）和有机相等的的优化来调整选择性，以获得更好的保留和分离。HILIC 模式下通常使用高比例有机相以提高质谱检测的灵敏度，本实验采用 70% 乙腈作为起始流动相。该方法使高氯酸根和氯酸根在 0.1–100 ng/mL 范围内获得了良好的线性，RSD < 3% (n = 5)。