食品中罗丹明B非法添加检测方案(激光拉曼光谱)

 引言 罗丹明B(Rhodamine B)又称玫瑰红B,或碱性玫瑰精，俗称花粉红，是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。实验证明罗丹明B会致癌，现在已不允许用作食品染色。但是不法商贩会利用消费者喜欢好卖相的心理，往花椒、辣椒、红辣椒油、红油豆制品等食品中添加罗丹明B来提高其红艳度。       经研究证明罗丹明B会直接危害到人体健康，具有潜在的致癌、致突变性和心脏毒性，是我国08年第一批列入《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》中的一种，是被监管部门严厉监察打击的。想要用肉眼分辩出罗丹明B其实很难，常用检测方式主要有GC和GC-MS联用法。       此检测方式需要大型仪器设备,价格昂贵。 使用拉曼光谱检测方式在分析化学等很多领域中得到了很好的发展和应用。结合表面增强拉曼技术可以显著提供高灵敏度,在食品安全和材料科学等领域已经得到了广泛应用。本文中通过拉曼光谱法只需要简单的样品前处理，可以在十几分钟内得到食品中是否含有非法添加罗丹明B的检测结果。  实验部分 1.实验试剂         工业色素罗丹明B1000ppm(mg/kg)、去离子水（二次蒸馏水）、增强试剂、促凝剂、乙腈、辣椒粉、乙腈 2. 实验仪器         EVA3000Plus、拉曼液体测量支架、超声波萃取机、离心机（1万转）、移液枪（1-1000ul,1-100ul，1-200ul规格） 3. 实验方法     测试标准样品：     step1、使用移液枪取1ul的罗丹明B1000ppm，取999ul的二次水，获得1ppm的罗丹明B标准样品     step2、使用移液枪取试剂A（金胶）500ul至试剂瓶     step3、使用移液枪取罗丹明标准样品50ul至试剂瓶     step4、使用移液枪取试剂B（促凝剂）100ul至试剂瓶，摇匀     step5、测试拉曼信号，设置200mw激光器，积分时间5秒中 注意事项：测试前需要摇匀，并在2-3分钟内完成样品测试       测试实际样品：     step1、取1g辣椒粉     step2、使用移液枪取50ppm罗丹明B100ul     step3、使用移液枪取100ul的乙腈稀释（得到浓度为5ppm的阳性样品）     step4、取3ml乙腈，摇匀后，超声10分钟，取上清液500ul     step5、取试剂A 100ul，离心机离心2分钟，液固分离，取上清液     step6、使用移液枪取试剂A（金胶）500ul至试剂     step7、使用移液枪取试剂样本样品50ul至试剂     step8、使用移液枪取试剂B（促凝剂）100ul至试剂瓶，摇匀     step9、测试拉曼信号，设置200mw激光器，积分时间5   结果与讨论     实验测试了1ppm的标准样品和5ppm的实际样品数据如下图所示，得到了罗丹明的表面增强后的拉曼光谱。下图为辣椒实际样品和标准样品的拉曼表面增强拉曼光谱（光谱平滑、基线扣除、归一化数据处理）： ​    得到辣椒实际样品和标准样品的拉曼表面增强拉曼光谱的相似度为0.8868，从特征峰来看，罗丹明的特征峰被检出，判断为阳性样品。  引言      罗丹明B(Rhodamine B)又称玫瑰红B,或碱性玫瑰精，俗称花粉红，是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。实验证明罗丹明B会致癌，现在已不允许用作食品染色。但是不法商贩会利用消费者喜欢好卖相的心理，往花椒、辣椒、红辣椒油、红油豆制品等食品中添加罗丹明B来提高其红艳度。      经研究证明罗丹明B会直接危害到人体健康，具有潜在的致癌、致突变性和心脏毒性，是被监管部门严厉监察打击的。想要用肉眼分辩出罗丹明B其实很难，常用检测方式主要有GC和GC-MS联用法。      此检测方式需要大型仪器设备,价格昂贵。 使用拉曼光谱检测方式在分析化学等很多领域中得到了很好的发展和应用。结合表面增强拉曼技术可以显著提供高灵敏度,在食品安全和材料科学等领域已经得到了广泛应用。本文中通过拉曼光谱法只需要简单的样品前处理，可以在十几分钟内得到食品中是否含有非法添加罗丹明B的检测结果。 实验部分1.实验试剂        工业色素罗丹明B1000ppm(mg/kg)、去离子水（二次蒸馏水）、增强试剂、促凝剂、乙腈、辣椒粉、乙腈2. 实验仪器        EVA3000Plus、拉曼液体测量支架、超声波萃取机、离心机（1万转）、移液枪（1-1000ul,1-100ul，1-200ul规格）3. 实验方法    测试标准样品：    step1、使用移液枪取1ul的罗丹明B1000ppm，取999ul的二次水，获得1ppm的罗丹明B标准样品    step2、使用移液枪取试剂A（金胶）500ul至试剂瓶    step3、使用移液枪取罗丹明标准样品50ul至试剂瓶    step4、使用移液枪取试剂B（促凝剂）100ul至试剂瓶，摇匀    step5、测试拉曼信号，设置200mw激光器，积分时间5秒中注意事项：测试前需要摇匀，并在2-3分钟内完成样品测试     测试实际样品：    step1、取1g辣椒粉    step2、使用移液枪取50ppm罗丹明B100ul    step3、使用移液枪取100ul的乙腈稀释（得到浓度为5ppm的阳性样品）    step4、取3ml乙腈，摇匀后，超声10分钟，取上清液500ul    step5、取试剂A 100ul，离心机离心2分钟，液固分离，取上清液    step6、使用移液枪取试剂A（金胶）500ul至试剂    step7、使用移液枪取试剂样本样品50ul至试剂    step8、使用移液枪取试剂B（促凝剂）100ul至试剂瓶，摇匀    step9、测试拉曼信号，设置200mw激光器，积分时间5  结果与讨论    实验测试了1ppm的标准样品和5ppm的实际样品数据如下图所示，得到了罗丹明的表面增强后的拉曼光谱。下图为辣椒实际样品和标准样品的拉曼表面增强拉曼光谱（光谱平滑、基线扣除、归一化数据处理）：   得到辣椒实际样品和标准样品的拉曼表面增强拉曼光谱的相似度为0.8868，从特征峰来看，罗丹明的特征峰被检出，判断为阳性样品。