白酒中邻苯二甲酸酯类物质检测方案(气相色谱仪)

2 3 吕建霞梁立娜 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 Key words： GC-FID； distilled spirit； PAEs 摘要 建立了白酒中16种邻苯二甲酸酯类物质的气相色谱检测方法。样品去除乙醇后采用正己烷提取，使用GC-FID检测。在0.10~4.0mg/L范围内，目标物的峰面积与其质量浓度的线性关系良好(R²>0.99)。在0.10、0.30mg/L的添加水平，样品添加平均回收率为87.7-108%，相对标准偏差(RSD，n=5) 为0.8-8.8%。方法检出限除邻苯二甲酸二壬酯为50pg/L外，其余15种化合物为1.0~5.0ug/L，定量限为3.0~15 ug/L。该方法具有灵敏、简单快速、准确、线性范围宽等优点，，可满足白酒中邻苯二甲酸酯类物质的检测需要。 引言 邻苯二甲酸酯类化合物(Phthalate Acid Esters，缩写PAEs， 又称酞酸酯，俗称塑化剂)，普遍用于塑料工业的主要增塑剂和软化剂，其作用是增大塑料的可塑性和韧性，提高塑料强度。PAEs是一种环境激素，可以模拟体内的天然荷尔蒙，会干扰正常荷尔蒙的作用，影响身体内的最基本的生理调节机能，具有致癌、致畸、致突变性作用，对人体健康已构成危害。2011年6月1日卫生部发布公告，邻苯二甲酸酯类物质被明确为违禁添加的非食用物质，禁止在食品中使用。PAEs主要通过食品包装材料进入食品，而白酒中的乙醇对PAEs具有很好的溶解性，因此白酒中也存在这类化合物污染的风险。2012年11月19日，有媒体报道称，据第三方检测显示，国内某知名品牌的白酒中的塑化剂含量超标高达260%，存在意想不到的致命危险。 目前国内颁布了GB/T 21911-2008《食品中邻苯二甲酸酯的测定》检测方法。本实验根据此标准，进行优化，采用去除乙醇庙IP正己烷提取，气相色谱仪检测，建立了白酒中邻苯二甲酸酯类物质残留的检测方法。该方法具有灵敏、快速、准确、线性范围宽等优点，可满足白酒中邻苯二甲酸酯类物质的检测需要。 主要仪器设备与试剂 仪器： Trace 1310气相色谱仪(ThermoFisher)，配FID检测器。 试剂：正己烷，色谱纯(ThermoFisher)；16种邻苯二甲酸酯标准混合溶液(美国o2si公司)。 样品：8种品牌白酒，购于超市。 准确量取5.0mL白酒样品于10mL具塞玻璃离心管中，在沸水浴中加热除去样品中的乙醇，冷却至室温后加入2.0mL正己烷，振荡提取，静置后取上清液检测。 样品的测定 仪器条件见表1。 表1仪器参数设置 色谱柱及柱温 TR-35MS， 30m， 0.25mm， 0.25um柱温：80℃(1min)， 10℃/min到280℃，保持10min。 检测器类型、工作参数 FID， 温度250℃，空气流量350mL/min，氢气流量35.0mL/min， 尾吹气为高纯氮，流量15.0mL/min。 载气类型及流速 氦气，恒流模式，流速： 1mL/min 进样方式及进样体积 PTV进样口，进样模式： splitless，进样口温度：50℃保持0.05min，14.5℃/min升到240℃，保持1min；进样体积：1pL 结果与讨论 样品提取条件的选择 白酒中含有30~60%vol的乙醇，由于乙醇对邻苯二甲酸酯类化合物的溶解性很好，因此在使用正己烷溶剂萃取白酒中的邻苯二甲酸酯类化合物时，效果较差。采用先除去酒中乙醇后再用正己烷提取分析测定可避免乙醇带来的误差。准确量取5.0mL白酒样品，添加水平为0.80mg/L，平行3次，采用去除乙醇和不去除乙醇两种提取方法做样品加标回收实验，添加回收实验结果见表2。实验结果表明，采用去除乙醇提取法的样品添加回收实验具有较好的回收率。 化合物 简称 不去除乙醇 去除乙醇 回收率(%) 回收率(%) 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 62 104 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 28.7 102 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 99.5 94.4 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 102 101 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 DMPP 99.7 95.1 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 4.04 87.8 邻苯二甲酸二戊酯 DAP 105 104 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 12.7 103 邻苯二甲酸二己酯 DHP 103 101 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 85.24 107 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 102 108 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 83.5 104 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 94.6 102 邻苯二甲酸二正辛酯 DOP 101 106 邻苯二甲酸二苯酯 DPP 74.1 109 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 109 106 方法的线性关系、检出限和定量限 配置系列浓度0.10、0.20、0.40、0.80、1.00、2.00、4.00mg/L的混合标准溶液，由低浓度至高浓度依次进样检测，以质量浓度与峰面积作标准曲线线性回归。结果表明，在0.10~4.00mg/L范围内15种邻苯二甲 酸酯类物质显良好线性关系。DNP响应较差，线性范围为0.40~4.00mg/L。采用样品添加目标化合物的方法，依据特征离子子量色谱峰信噪比Rs/m=3计算方法检出限，Rsn=10计算方法定量限，结果见表3。 表3方法线性关系、检出限、定量限 化合物 保留时间min 线性范围mg/L 相关系数r 检出限pg/L 定量限pg/L DMP 12.32 0.1-4 0.9993 2.5 7.5 DEP 13.78 0.1-4 0.9985 2.0 6.0 DIBP 16.36 0.1-4 0.9996 1.0 3.0 DBP 17.43 0.1-4 0.9996 1.0 3.0 DMPP 18.25/18.06 0.1-4 0.9990 2.0 6.0 DMEP 18.44 0.1-4 0.9998 5.0 15 DAP 19.12 0.1-4 0.9969 3.0 9.0 DEEP 19.27 0.1-4 0.9994 5.0 15 DHP 20.69 0.1-4 0.9999 3.0 9.0 BBP 21.68 0.1-4 0.9981 2.0 6.0 DEHP 22.13 0.1-4 0.9986 2.0 6.0 DBEP 22.23 0.1-4 0.9983 3.0 9.0 DCHP 23.50 0.1-4 0.9993 3.0 9.0 DOP 24.54 0.1-4 0.9984 3.0 9.0 DPP 24.94 0.1-4 0.9998 3.0 9.0 DNP 25.2-25.6 0.4-4 0.9988 50 150 方法精密度和回收率的测定 称取白酒样品，分别添加2个水平浓度的标准品，每 108%，相对标准偏差(RSD，n=5)为0.8-8.8%。回收率个浓度水平平行测定5次。结果表明，平均回收率为87.7- 和精密度数据结果见表4。 表4方法回收率和精密度数据 化合物 添加水平 (0.1 mg/L) 添加水平(0.3mg/L) 回收率(%) RSD(%) 回收率(%) RSD(%) DMP 94.8 3.4 98.0 4.1 DEP 105 2.5 107 5.8 DIBP 101 3.6 103 4.2 DBP 103 4.3 101 8.4 DMPP 106 6.4 105 4.1 DMEP 87.7 6.3 88.2 4.6 DAP 107 4.5 103 3.6 DEEP 105 5.6 104 1.4 DHP 102 5.2 108 5.0 BBP 108 2.5 105 5.4 DEHP 103 1.8 104 5.5 DBEP 104 0.8 108 2.0 DCHP 103 2.3 102 6.6 DOP 106 1.6 107 3.3 DPP 108 1.7 103 5.3 DNP 105 8.8 102 6.0 对市售8个白酒样品中邻苯二甲酸酯类物质的测定 按上述前处理方法测定了8个市售白酒样品中的邻苯二甲酸酯类物质残留量，测定结果见表5。样品测定结果表明， DIBP、DBP、DEHP在白酒中普遍存在， DIBP和DBP含量较高。 GB9685-2008《食品容器、包装材料用 添加剂使用卫生标准》规定了DEHP、DINP、DBP的最大残留量分别为1.5mg/Kg、9.0mg/Kg、0.3mg/Kg。有3个样品中DBP的含量超过规定，最高的样品中DBP含量达0.989mg/L，超标230%。 表5白酒样品中邻苯二甲酸酯类物质含量(mg/L) 化合物 样品1 样品2 样品3 样品4 样品5 样品6 样品7 样品8 DMP ND 0.316 ND ND 0.008 ND ND 0.036 DEP ND ND ND ND 0.016 ND ND ND DIBP ND 1.323 ND 1.132 0.116 ND ND ND DBP ND 0.989 0.045 0.537 0.163 ND 0.469 0.076 DMPP ND ND ND ND ND ND ND ND DMEP ND ND ND ND ND ND ND ND DAP ND ND ND ND ND ND ND ND DEEP ND ND ND ND ND ND ND ND DHP ND ND ND ND ND ND ND ND BBP ND ND ND ND ND ND ND ND DEHP 0.106 0.046 0.010 0.187 0.024 0.006 0.017 0.025 DBEP ND ND ND ND ND ND ND ND DCHP ND ND ND ND ND ND ND ND DOP ND ND ND ND ND ND ND ND DPP ND ND ND ND ND ND ND ND DNP ND ND ND ND ND ND ND ND 备注： ND为未检出 标准品、样品添加谱图见图1。 1样品加标与标准溶液谱图比较 结论 本方法采用去除乙醇后正己烷提取，气相色谱仪检测的技术，建立了白酒中16种邻苯二甲酸酯类物质残留的分析方法。在0.1、0.3mg/L两个添加水平下，回收率为87.7-108%，相对标准偏差(RSD， n=5)为0.8-8.8%；方法检出限除邻苯二甲酸二壬酯为50 pg/L外，其余15种化合物为1.0~5.0pg/L，定量限为3.0~15pg/L。该方法具有灵敏、简单快速、准确、线性范围宽等优点，可满足白酒中邻苯二甲酸酯类物质的检测需要。 thermoscientific.com ( C 2012 T h e rmo Fishe r Scie n tific Inc . Al l ri g hts reserved. All trademarks are the pro p erty of Thermo Fisher Scientific Inc. a nd its s ubsidiaries. Specifications， terms a nd p r icin g are subject to change. Not all products are available in all countries. Please consult your ) local sales representative for details. 上海 北京 免费服务热线：上海浦东新金桥路27号6号楼 北京东城区安定门东大街28号 8008105118邮编：201206 雍和大厦西楼F座7层702-715室 4006505118电话：021-68654588 邮编：100007传真：021-64457830 电话：010-84193588传真：010-88370548 ThermoFisherSCIENTIFIC hermo Fisher Scientific，San Jose， CA USA is ISO Certified.SCIENTIFIC 本方法采用去除乙醇后正己烷提取，气相色谱仪检 测的技术，建立了白酒中16种邻苯二甲酸酯类物质残 留的分析方法。在0.1、0.3 mg/L两个添加水平下，回 收率为87.7-108%，相对标准偏差（RSD, n=5）为0.8- 8.8%；方法检出限除邻苯二甲酸二壬酯为50 µg/L外， 其余15种化合物为1.0～5.0 µg/L，定量限为3.0～15 µg/ L。该方法具有灵敏、简单快速、准确、线性范围宽等 优点，可满足白酒中邻苯二甲酸酯类物质的检测需要。