食品中喹硫磷检测方案(气质联用仪)

thermoscientific应用指南 基于赛默飞 TraceFinder 工作站实现高通量大规模化合物快速筛查及定量的分析流程 关键词：农药残留、筛查、高通量分析、TSQ 8000 Evo、TraceFinder 工作站 随着分析仪器硬件组件的快速发展，质谱扫描速度和数据采集速度都有了大幅提高。与此同时，大数据带来的高通量分析与数据处理却常常占用分析工作者大量的时间和精力，已经成为阻碍实验室效率提高际面临的最大问题。TSQ 8000Evo三重四极气质联用质谱仪的设计与推出，旨在提高实验室的效率，只有与 TraceFinder 工作站的结合，才可实现快速筛查及定量的高通量分析。 以农药残留分析为例，，GGB2763-2014《食品中农药最大残留限量》规定了387种农药在284种(类)食品中3650项限量指标。即便如此，我国现有的农残限量指标分别是日本的9.5%，美国的7.2%，而农药种类分别是日本的60.4%，美国的31.5%。与此同时，农业部计划到2020年使我国农药残留限量标准及其配套检测方法标准达到10000项以上。可见，农残检测面临着不断增加的农药种类以及越来越多的样品带来的挑战。残留量低且基质复杂，则使农残分析更加困难。 TSQ 8000 Evo 具备专利的快速碰撞池技术，结合 Timed-SRM 扫描方式，，可在 35 min 内实现 5496个离子对的同时 分析及数据采集。而在完成数据采集的同时而仪器性能，包括灵敏度和稳定性完全不受影响。 TraceFinder 工作站具有非常强大的 QAQC 质量控制功能，通过对保留时间、定量/定性离子对及离子对比率等关键定性指标及相关辅助定量指标设置适当的阈值，友好的 Flag 功能通过不同颜色的反馈可以直观的显示是否符合要求。由此，分析人员可从大量化合物或者大量样品中，快速筛查出可疑的阳性化合物及阳性样品。 本文使用 TSQ 8000 Evo 三重四极杆气质联用仪，结合TraceFinder 工作站，建立了高通量筛查和定量分析的高效工作流程。 1 实验部分 1.1仪器 TSQ 8000 Evo 三重四极杆气质联用仪、TraceFinder 工作站 1.2分析条件 GC 气相色谱条件 色谱柱： TG-pesticide lI 30 m×0.25 mmx0.25 pm进样口： SSL进样口 恒流模式： 1.2 mL/min 进样体积： 1 uL 升温程序： 40 ℃ (1.5 min)_25℃/min_90℃ (1.5 min)_25℃/min_180℃_5℃/min_280℃ _10℃/min_300℃ (5 min) MS质谱条件 离子源温度：300 ℃采集方式：T-SRM扫描 2结果与讨论 2.1方法建立 赛默飞拥有多达1175种农药及其他常见有机污染物的 SRM参数数据库，每种化合物均包括保留时间、离子对及碰撞能等信息。只需从数据库中挑选要做的化合物，直接导入到仪器方法中，即可完成方法建立。当然，如果数据库中全部化合物都导入到方法里，则可实现数据库内全部化合物的筛查分析。Timed-SRM 扫描功能可大大提高保留时间漂移的容忍度。 保留时间校准功能(可选件)可将当前色谱条件下的保留时间校准到与数据库里的基本一致。一般而言，两者相差不会超过 0.1 min。而数据采集方法无需做任何改动(详见应用文集《Thermo Retention time alignment 软件功能介绍》)。 传输线温度：280℃ 图2. 应用 RT Alignment 软件校准后的结果 图3.赛默飞1175种化合物的数据库 2.2筛查方法阈值设置 多化合物筛查分析时，-一般是依据化合物保留时间、定量/性离子对、离子对比率进行判断是否检出。 TraceFinder 工作站可以对其进行设置，如下： Instrument Method：Pesticide Analyzer Method For TS一 图4.相关筛查阈值设置 关于离子对比率计算方法，软件提供了 manual、average、weighted average 及 level 四种计算方式，可根据实际情况进行选择。关于离子对比率允差设置，软件提供了 relative、absolute 两种计算方式及允差范围设置，，I可根据实际情况进行选择。 2.3 QAQC阈值设置 在定量分析中，可以选择性的设置一些阈值，使软件按照阈值自动判断诸如标准曲线、定量结果等数据的质量，从而节省数据浏览的时间和精力。 任何一项超出设置范围， TraceFinder 工作站会通过相应的Flag 显示。详见2.4部分。 任何一项超出设置范围， TraceFinder 工作站会通过相应的Flag 显示。详见2.4部分。 Method View Acquisition Limits Calibration Chk Std Matrix BlankISTD Solvent Blank Threshold RT Compound LOD (Detectionlimit) limit). LOQ (Quantitation LOR ULOL (Linearity limit) Carryoverlimit 1.000 3.000 0.000 1e2 Oe0 Processing 1 9.40 Acephate Compounds 2 24.35 Acrinathrin 1.000 3.000 0.000 1e2 Oe0 3 15.05 Aldrin 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 QAQC Groups 4 56 16.22 8.43 18.17 Allethrin (Bioallethrin)-1，2 Allidochlor Aramite peak 1 检出限 3.000 0.000 1e2 0e0 3.0003.000 0.000 0.000 标曲最高浓度 7 18.49 Aramite peak 2 1.000 3.000 0.000 Oe0 8 24.40 Azinphos-ethyl 1.000 定量限 0.000 1e2 0e0 9 13.49 Benfuresate 1.000 0.000 1e2 0e0 10 11.74 BHC， Alpha 1.000 0.000 1e2 Oe0 11 12.20 BHC， Beta 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 12 12.97 BHC， delta 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 13 12.42 BHC， gamma 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 14 22.62 Bifenox 1.000 3.000 0.000 1e2| Oe0 15 22.15 Bifenthrin 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 16 21.29 Bioresmethrin 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 17 27.07 Boscalid (Nicobifen) 1.000 3.000 0.000 1e2| 0e0 18 14.49 Bromacil 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 19 13.67 bromobutide 1.000 3.000 0.000 1e2 Oe0 20 16.72 Bromophos-ethyl 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 21 15.51 Bromophos-methyl (Bro... 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 22 22.11 Bromopropylate 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 17.02 Butachlor 1.000 3.000 0.000 1e2 0e0 Limits Calibration Chk Std Matrix Blank ISTD Solvent Blank Threshold RT Compound R^2 threshold Max RSD (%) Min RF Max Amt Diff (%) CV Test (%) 卜 1 9.40 Acephate 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 2 24.35 Acrinathrin 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 3 15.05 Aldrin 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 4 16.22 Allethrin (Bioallethrin)-1，2 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 5 8.43 Allidochlor 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 6 18.17 Aramite peak1 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 7 18.49 Aramite peak 2 线性相关系数 0 0 0.000 20.00 5.000 8 24.40 Azinphos-ethyl 0.000 20.00 5.000 9 13.49 Benfuresate 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 10 11.74 BHC， Alpha 0.9900 理论值与计算 20.00 5.000 11 12.20 BHC， Beta 0.9900 值的偏差 20.00 5.000 12 12.97 BHC， delta 0.9900 20.00 5.000 13 12.42 BHC，gamma 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 14 22.62 Bifenox 0.9900 20.00 0.0 5.000 5.000 15 22.15 Bifenthrin 0.9900 20.00 0.0 续多次进样的 5.000 16 21.29 Bioresmethrin 0.9900 20.00 0.0 17 27.07 Boscalid (Nicobifen) 0.9900 20.00 0.0 18 14.49 Bromacil 0.9900 20.00 0.0 5.000 20.00 5.000 19 13.67 bromobutide 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 20 16.72 Bromophos-ethyl 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 4 21 15.51 Bromophos-methyl (Bro... 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 Acquisition Analysis 22 22.11 Bromopropylate 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 Method Development 17.02 Butachlor 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 24 26.07 Butafenacil 0.9900 20.00 0.000 20.00 5.000 2.4 Flag 设置 2.2及2.3部分介绍了在筛查分析及日常定量分析中，TraceFinder 工作站能够给分析人员提供的一些必要判断标准的选择。TraceFinder 工作站允许分析人员根据实际需要对这些阈值规则进行修改并选择不同形式的 Flag 显示。具体设置界面如图6. 本文中，为了描述方便，仅对 confirming ions coelution、lonratio failure、NF ( peak not found ) 等设定了相应的 Flag. 软件会自动帮分析人员快速的进行判断筛选，最终通过 Flag形式显示出来。 由图7的一系列图可以直观的看出，有602种化合物未检出，24种化合物可疑，44种化合物确认检出。 当目标化合物数目少于样品数目时，可采用 CompoundView 功能查看，，可以快速的进行不同样品间比较。见图8.也可以同时结合色谱峰进行比较查看，见图9。 图 6. Flag 设置界面 2 aE 品 图9.色谱峰视图 3结论 通过介绍 TraceFinder 工作站的强大功能，包括QAQC，Flag， 适当阈值参数的设置，建立了快速筛利用功能强大的TraceFinder 数据处理方法，结合 TSQ 8000 Evo 出色的硬件性能，可显著提高筛查及高通量定量分析的效率。TSQ 8000 Evo 能够在保证良好的方法学指标和仪器性能的基础上，35 min 内完成数据库里5496个离子对和所有目标化合物的分析。在此基础上， TraceFinder 工作站可以预先设置相关的阈值，通过 Flag 功能直观显示出来，辅助分析人员快速的进行筛选判断，大大提高了实验室的整体工作效率。 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 www.thermofisher.com 随着分析仪器硬件组件的快速发展，质谱扫描速度和数据采集速度都有了大幅提高。与此同时，大数据带来的高通量分析与数据处理却常常占用分析工作者大量的时间和精力，已经成为阻碍实验室效率提高际面临的最大问题。TSQ 8000Evo 三重四极气质联用质谱仪的设计与推出，旨在提高实验室的效率，只有与 TraceFinder 工作站的结合，才可实现快速筛查及定量的高通量分析。以农药残留分析为例， GB2763-2014《食品中农药最大残留限量》规定了 387 种农药在 284 种（类）食品中 3650 项限量指标。即便如此，我国现有的农残限量指标分别是日本的 9.5%，美国的 7.2%，而农药种类分别是日本的 60.4%，美国的 31.5%。与此同时，农业部计划到 2020 年使我国农药残留限量标准及其配套检测方法标准达到 10000 项以上。可见，农残检测面临着不断增加的农药种类以及越来越多的样品带来的挑战。残留量低且基质复杂，则使农残分析更加困难。TSQ 8000 Evo 具备专利的快速碰撞池技术，结合 Timed-SRM 扫描方式，可在 35 min 内实现 5496 个离子对的同时分析及数据采集。而在完成数据采集的同时而仪器性能，包括灵敏度和稳定性完全不受影响。TraceFinder 工作站具有非常强大的 QAQC 质量控制功能，通过对保留时间、定量/定性离子对及离子对比率等关键定性指标及相关辅助定量指标设置适当的阈值，友好的 Flag 功能通过不同颜色的反馈，可以直观的显示是否符合要求。由此，分析人员可从大量化合物或者大量样品中，快速筛查出可疑的阳性化合物及阳性样品。本文使用 TSQ 8000 Evo 三重四极杆气质联用仪， 结合TraceFinder 工作站，建立了高通量筛查和定量分析的高效工作流程。