饲料中磺胺类药物检测方案(匀浆机)

上海安谱科学仪器有限公司Tel：021-54890099Fax： 021-54248311Shanghai ANPEL Scientific Instrument Co.， Ltd. 网站：：www.anpel.com.cn 题目：饲料中磺胺类药物的测定(SPE-HPLC) 方法概要：饲料中的磺胺类药物用乙腈提取，经CNWBOND Alumina-B碱性氧化铝小柱净化后，用 Cnwsil C18 液相色谱柱测定。 关键词：饲料，磺胺嘧啶磺胺甲恶唑磺胺喹恶啉磺胺间甲氧嘧啶磺胺二甲氧嘧啶，CNWBOND Alumina-B碱性氧化铝小柱， Cnwsil C18柱 参考方法： GB/T 19542-2007 方法步骤： 1、、证试剂和耗材：HPLC级乙腈(CAEQ-4-003306-4000)； HPLC级甲醇(CAEQ-4-003302-4000)； HPLC级冰醋酸(乙酸，CAEQ-4-011245-0500)；磺胺嘧啶磺胺甲恶唑磺胺喹恶啉磺胺间甲氧嘧啶磺胺二甲氧嘧啶标准品(德国Dr) 12、、提取：称取2g(精确到0.001g)饲料各两份，分别加入5种磺胺(Dr公司)的储备液各500uL，(另各取 500pL用流动相定容到50mL，作为标准溶液使用)分别加入35mL 乙腈旋涡震荡(美国，TALBOYS)提取30分钟，离心后取上清液至50mL容量瓶中，沉淀物用10mL乙腈分3次洗涤后转入50mL容量瓶，用乙腈定容到50mL 做待净化液。 3、 净化： 1g/3mL 的 CNWBOND Alumina-B碱性氧化铝小柱(SBEQ-CA1949，1g/3mL)用 5mL乙腈淋洗活化，加入4mL 待净化液保持流速2-3mL/分钟，待试液全部流出以后，低真空抽干小柱，用两次2mL液相色谱流动相(见4.2)洗脱，收集洗脱液，定容到4mL，用有机相滤头(安谱 SCAA-10313mm×0.45um)过滤以后，j，上机测试。 4、HPLC测定方法： 4.1色谱柱： Cnwsil C18， 250×4.6mm， 5pm (LAEQ-1825004605) 4.2流动相：750mL去离子水中加入3mL的冰醋酸， 与250mL的乙腈混匀，过 0.45um的有机滤膜后超声脱气。流速1.0mL/min，温度25℃。 4.3进样量：20uL，五种磺胺标准液的浓度分别为：10.80PPM、11.86PPM、10.40PPM、7.33PPM、10.20PPM。 4.4检测波长： UV270nm 上海安谱科学仪器有限公司 5、结果分析： 5.1、分析图谱 5.2、结果分析 用 Cnwsil C18 250×4.6mm， 5pm 柱子分析五种磺胺，分离效果良好，峰形对称，重复性好。如果考虑更快速的分离，可以用 150mm 的柱子。 五种磺胺的回收虑分别是：96.9%/94.9%；97.2%/94.9%： 97.3%/94.8%；96.6%/95.0%；89.1%/87.3%.从对照平行样品来看，回收率高而且稳定，饲料中在12.5分钟的时候有个比较大的杂质峰。