克莱保健烟贴中尼古丁检测方案(毛细管电泳仪)

第29卷2001年12月分析化学(FENXI HUAXUE) 来稿摘登Chinese Joural of Analytical Chemistry第12期1485 .L5 高效毛细管电泳检测克莱保健烟贴中的尼古丁 熊 辉 李向军 袁倬斌* (中国科技大学研究生院，北京100039) 1 引 商 尼古丁是一种生物碱，尼古丁的检测方法有薄层色谱法、容量法、电导滴定法等。本文研究了用毛细管电泳技术分离测定克莱保健烟贴中的尼古丁，获得了比较满意的结果， 2实验部分 2.1 仪器与试剂 1229型高效毛细管电泳仪(北京新技术应用研究所)，固定波长紫外检测器，ACS2000 高压电源、ACS2000色谱工作站(中国科学院研究生院应用化学研究所)，石英毛细管 50 m(id) x60 cm，有效长度约44.5 cm(河北永年光导纤维厂)，pH-HJ90B型酸度计(上海雷磁仪器厂)。尼古丁(nicotine)标样(中国生物制品检定所)，克莱保健烟贴(北京克莱斯瑞控释药业有限公司)，其它试剂均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水，样品溶液及缓冲溶液均用孔径为0.45pm滤膜过滤。用甲醇制备标准贮备液(10 g/L)，使用前用二次蒸馏水稀释成浓度为0.06~0.5 g/L的工作液、 2.2 实验方法 (1)样品处理 取烟贴一张，弃去保护防粘层后置入一具塞小试管中，加氯仿3mL 充分振摇，使药膜溶解，精密加入10 mL的 0.01mol/L HCl溶液充分振摇，静置使溶液分层，取上层盐酸液离心使澄清，吸取上层清液进行分析。(2)操作过程 实验前，用0.1 mol/l. NaOH、二次蒸馏水依次冲洗毛细管5 min，然后用缓冲溶液冲洗平衡10 min，最后施加电压预预衡10min，两次样品分析之间用缓冲溶液冲洗。采用重力进样方法，进样端高出口端10 cm，进样时间30 S. 3结果与讨论3 缓冲溶液浓度的影响 缓冲溶液浓度是一个重要参数，必须对其进行优化选择。缓冲溶液浓度对分析的影响实际上是缓冲溶液强度的影响。缓冲溶液浓度小时，迁移时间短，浓度增加，迁移时间增长，这是由于浓度增加使缓冲溶液离子强度增加，Zeta 电位和电渗流降低，从而导致迁移时间延长。缓冲容随缓冲溶液浓度增加而增大，但增加浓度，电流会增大，产生大量的焦耳热，对分离产生不利影响。综合考虑，本实验选用0.05 mol/L NaH，PO，-10%CH，OH。 3.2 缓冲溶液 pH对分离效果的影响 在毛细管电泳中，组分的分离是基于其有效迁移率的不同，组分的电离程度则由其pK，值决定，pH值的优化选择是保证 pK，值不同的一个重要条件。尼古丁是一种生物碱，呈碱性，在酸性条下，它以离子状态存在，有利分离并产生比较好的峰形。因此，本实验选用 pH=4.8， 3.3 工作电压对分离的影响 毛细管两端的工作电压是组分迁移的原动力。对于既定的柱长，工作电压增大可使电渗流和离子的电泳率都增大。由于电渗流远大于离子的电泳率，故工作电压增大仍可使离子的有效迁移率增大。这可使分析时间缩短，减小组分蜂展宽，有利分离。但工作电压过大又可使系统产生严重的焦耳热，引起组分峰展宽，柱效下降。在保证柱效的情况下，为节省分析时间，选用操作电压为 25 kV， 3.4 标准曲线的测定精密移取尼古丁储备液用甲醇配成浓度为0.06~0.5 g/L标准溶液系列，在选定的实验条件下进样。以峰面积为纵坐标对浓度作图。度回归方程为：Y=1359000X-1994(r=-0.9992)。当信噪比 S/N=2时，测得尼古丁的最低检测浓度为 0.002 g/L， 3.5 样品的测定与回收率 在0.05 mol/L NaH，PO，-10%CH，OH(pH=4.8)、操作电压为 25 kV的条件下，将处理好的样品溶液进样测定，测定值为0.16g/L，相对标准偏差为2.6%，高效液相色谱的测定值为 0.18 g/L，二者结果比较一致，同时进行标准加人回收率实验，得平均回收率为96%。 据方 ( 2001-01-20收稿：2001-05-26接受 )