肉制品中农兽药残留检测方案

Best Value Agela Technologies 动物尿液中3种β-受体激动剂残留量的测定 LC-MS/MS法 应用编号： AF10043 本文使用天津博纳艾杰尔科技有限公司的 Cleanert"PCX固相萃取柱，照中华人民共和国国家标准农业部1025号公告-11-2008公告《猪尿中β-受体激动剂多残留检测一液相色谱-串联质谱法》提供的方法，检测猪尿、牛尿和羊尿中的克仑特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇3种β-受体激动剂残留。 1.样品信息 克仑特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇等3种β-受体激动剂信息如表所示。 β-受体激动剂 英文名 结构式 克仑特罗 Clenbuterol NH2 OH 莱克多巴胺 Ractopamine HO OH 沙丁胺醇 Salbutamol 克伦特罗-D9 Clenbuterol-D9 CI HN D DD D 沙丁胺醇D3 Ractopamine-D3 DH OH 莱克多巴胺D3 Salbutamol-D3 HOP DD 2.样品提取及衍生 2.1样品酶解 取 5 mL尿样于 50mL离心管内，加入2 mol/L乙酸铵缓冲液(pH=5.2) 0.5 mL；再加入β-盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶 40pL，涡旋混匀，于37℃下避光水浴振荡约16h(过夜)。 2.2提取 酶解后添加100 ng/mL内标混合工作液(克伦特罗-D9、莱克多巴胺 D3、沙丁胺醇 D3) 100 uL 于待测样品中，涡旋混匀，10000 rpm 离心 10 min；转移上清液于另一 50 mL离心管内，用5 mol/L NaOH 溶液调pH至9.8±0.2；加入异丙醇-乙酸乙酯混合溶液(6+4，V/V) 10mL， 再加入固体氯化钠粉末1.5~2g饱和水相，涡旋后振摇10 min； 55000 rpm 离心10 min， 取上清液于 50 mL鸡心瓶内，再用异丙醇-乙酸乙酯溶液(6+4) 10 mL 重复提取一次；合并上清液，50℃下旋转蒸干，用2 mol/L 乙酸铵缓冲溶液 (pH=5.2)5mL溶解，备用。 2.3净化处理 固相萃取 PCX 小柱(60mg/3mL) MCX 柱子依次用甲醇3mL，水3mL预洗活化；取全部备用液过柱，再依次用水3mL、2%甲酸水溶液3mL、甲醇3mL淋洗，减压抽干；用5%氨水甲醇溶液 5 mL 进行钥脱；洗脱液在50℃下用氮气吹干，残余物用甲醇-0.1%甲酸水溶液(5+95， V/V) 0.5mL溶解，过滤膜后供高效液相色谱-串联质谱仪测定。 3.检测方法 按照中华人民共和国国家标准农业部1025号公告-11-2008公告《猪尿中β-受体激动剂多残留检测一液相色谱-串联质谱法》提供的方法进行检测。 4.实验结果 结果如下列附图所示。 结论 本实验选用 Cleanert PCX固相萃取柱 (60mg/3mL)，按照农业部1025号公告-11-2008公告《猪尿中β-受体激动剂多残留检测一液相色谱-串联质谱法》提供的方法，验证测定猪尿、牛尿和羊尿中的3种β-受体激动剂残留回收率。 通过不同基质的样品添加回收率实验，结果显示天津博纳艾杰尔科技有限公司的 CleanertPCX 固相萃取柱性能良好，完全能够符合兽药残留检测的要求并应用在动物产品的残留监控工作中。 5.订货信息 产品名称 规格包装 订货号 Cleanert"PCX 固相萃取柱 60mg /3mL，50支/包 CX0603 针式过滤器(Nylon) 0.22um，直径13mm，200个/pk AS021320 ·次性无针头注射器 5 mL，100/pk ZSQ-5ML 1.5 mL样品瓶 棕色，100/pk 1109-0520 1.5 mL样品瓶盖 100/pk 0915-1819 甲醇 4×4L/箱 AH230-4 附图 3种β-受体激动剂特征离子质量色谱图 图1混合标液中3种β-受体激动剂 (5 ng/mL)特征离子质量色普图 图2空白白尿添加试液中3种β-受体激动剂 (0.5 ng/mL)特征离子质量色谱图 100 1.22e5 beeta 1.60 1.80 2.00aaagonist-FJ-urine201303082 100 1.92 52.202.40 2.6o 2.803.co 1：MRMof 9 Chaiannels ES+ 11r1mllhlitma240.1>222(salbutamol) 1.29e5 1.60 1.80 2.00 2.2o 2.40 2.60 2.80 )3.00 betaagorniisst-FJ-urine 201300308 1： MRM of 9 Channels ES+ 100 1.92 240.1>147.9(salbutamol) 2.66ee5 1.601.80 202202402602803.00 lrr Time betaagonist-F 100- rine20201303082 2：MRM of 10 Channels ES+308.2：168(ractopaminne--De6) 9.56e 04 3.00aagonist-FJ-ur b 3.203.40201303082 3.60 3.80 4.004.20 10 4.60：MRM of 10 Chaiannels ES+ 100 302.15164(ractoppamine1 013.003.203.40 betaagonist-FJ-urine201303082 3.80 3.80 400420 11 2：MRMo 4.60 nf100Chi iannels ES+ 100 302.1>106.9 (ractopamine) 5.02e4 0 3.00betaagonistt-FJ-uri rin 3.203.40ne2013030830832 3.60 3.80 D 4.004.20 4404.602：：MRMof10 ClChnnels ES+286204 (clenbuterol-D99) 100 erc 1n1.74el 3.003.20 3.40betaagonist-FJ-urine201303C3082.42100 3.60 3.80 4.00 4.20 4404.602：MRM of 10 Ch：annels ESh277259 (clenbuterol)842e=4 3.00 betaaa t-FFjJ-u 3.203.40 -urine201303( 3.603.804.004.20 1494.60： MRM of 10 Cha neels ES+ 100 77 -202.9 (clenbuterol 1.33e 3.00 3.20 40 3.60 3.80 4.00 4.20 440 4.60 Time 图3空白牛尿添加试液中3种β-受体激动剂(0.5 ng/ mL)特征离子质量色谱图 Best Value Guaranteed Product Quality 表1猪肉、猪肝、牛肉和羊肉添加(0.5、1、10ng/g)批内回收实验结果 样品名称 药物名称 回收率1 回收率2 回收率3 回收率4 回收率5 平均值% RSD 猪尿 克仑特罗 96.5 97.7 98.3 94.8 98.1 97.08 1.50 沙丁胺醇 98.7 99.9 100.1 95.5 100.2 98.88 2.01 莱克多巴胺 95.4 96.6 97.2 93.7 95.3 95.64 1.41 牛尿 克仑特罗 96.8 97.7 98.6 93.6 100.2 97.38 2.52 沙丁胺醇 99.8 101.2 102.4 96.3 103.5 100.64 2.77 莱克多巴胺 95.4 96.6 97.2 93.7 97.0 95.98 1.51 羊尿 克仑特罗 95.4 96.6 97.2 94.7 97.0 96.18 1.12 沙丁胺醇 97.6 97.7 99.3 95.1 99.5 97.84 1.81 莱克多巴胺 94.5 95.7 96.4 93.6 96.2 95.28 1.5 注：以上数据保留三位有效数字 本手册所有应用均可在博纳艾杰尔官方网站以应用编号搜索下载! www.agela.com.cn—