高速涡旋振荡器在细菌内毒素动物细胞培养过程中生化参数的测定方法-细菌内毒素的测定中的作用

高速涡旋振荡器在细菌内毒素动物细胞培养过程中生化参数的测定方法-细菌内毒素的测定中的作用（根据中华人民共和国国家标准GB/T 38506-2020）一、原理当细菌死亡或自溶后便会释放内毒素，通过用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应来定性检测或半定量检测细菌内毒素。二、实验仪器1. 试剂 凝胶法鲎试剂2. 恒温箱3.微量移液器 20ul~200ul、100ul~1000ul4.旋涡混合器三、分析步骤1.将细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素检查用水溶解，在WIGGENS DPM24 数字式脉冲高速涡旋振荡器混匀15min，然后制成2、1、0.5和0.25四个浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步在旋涡混合器上混匀30s。取分装有0.1ml鲎试剂18支，其中16支用SOCOREX 826可调微量移液器 分别加入0.1ml不同浓度的内毒素标准溶液，每一个内毒素浓度平行4支。另外2支加入0.1ml细菌内毒素检查用水做阴性对比。2.将试管中溶液轻轻混匀后，封闭管口，垂直放入37℃±1℃的WIGGENS WH-650 恒温培养箱中，保温60min±2min。3.将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转80°，若管内形成凝胶，并且凝胶不变形、不从管壁滑脱则为阳性；未形成凝胶或形成凝胶不坚实、变形并从管壁华拖着为阴性。四、得出结论计算结果表示到小数点后一位。五、注意事项1.操作过程中应防止内毒素的污染2.保温和拿取试管过程中应避免受到振动，造成假阴性结果3.严格按照实验操作流程，遵守实验室规章。高速涡旋振荡器在细菌内毒素动物细胞培养过程中生化参数的测定方法-细菌内毒素的测定中的作用 (根据中华人民共和国国家标准 GB/T38506-2020) 一、原理 当细菌死亡或自溶后便会释放内毒素，通过用堂试剂与细菌内毒素产生凝集反应来定性检测或半定量检测细菌内毒素。 二、实验仪器 1.试剂凝胶法宣试剂 2.恒温箱 3.微量移液器 20ul~200ul、100ul~1000ul 4.旋涡混合器 SOCOREX 826 可调微量移液器 WIGGENS WH-650 恒温培养箱 WIGGENS DPM24 数字式脉冲高速涡旋振荡器 三、分析步骤 1.将细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素检查用水溶解，在 WIGGENS DPM24 数字式脉冲高速涡旋振荡器混匀 15min， 然后制成2、1、0.5和0.25四个浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步在旋涡混合器上混匀30s。取分装有0.1ml莲试剂18支，其中16支用SOCOREX826可调微量移液器分别加入0.1ml 不同浓度的内毒素标准溶液，每一个内毒素浓度平行4支。另外2支加入0.1ml细菌内毒素检查用水做阴性对比。 2.将试管中溶液轻轻混匀后，封闭管口，垂直放入37℃±1℃的 WIGGENS WH-650 恒温培养箱中，保温60min±2min。 3.将试管从恒温器中轻轻取出，缓缓倒转80°，若管内形成凝胶，并且凝胶不变形、不从管壁滑脱则为阳性；未形成凝胶或形成凝胶不坚实、变形并从管壁华拖着为阴性。 四、得出结论 式中X为反应终点浓度的对数值(lg)。反应终点浓度是指系列递减的内毒素浓度中最后一个呈阳性结果的浓度：n 为每个浓度的平行管数。 当入在0.5~2入(包括0.5入和2入)时，方可用于细菌内毒素检查，并以标示灵敏度入为该批数试剂的灵敏度。 计算结果表示到小数点后一位。 五、注意事项 1.操作过程中应防止内毒素的污染 2.保温和拿取试管过程中应避免受到振动，造成假阴性结果 3.严格按照实验操作流程，遵守实验室规章。