酸枣仁中中药检测方案(免疫亲和小柱)

背景我国是中药材生产和应用的大国，发霉现象在中药材的种植、加工、贮藏等系列环节中普遍存在，由此导致的真菌毒素污染会严重影响中药的质量及安全，虽然可以通过一系列的防治技术来避免中药材被真菌毒素污染，但有效的检测方法也是控制中药材质量安全必不可少的环节。纳谱分析紧跟药典要求，推出了适合中药材中黄曲霉毒素总量供试品制备的SelectCore AFT Total免疫亲和柱及适合黄曲霉毒素检测的ChromCore 120 C18色谱柱。适用范围本方法参照中国药典 2020版 2351 真菌毒素测定法 黄曲霉毒素测定法 第一法（液相色谱法），适用于远志、大枣、肉豆蔻、决明子、麦芽、陈皮、使君子、柏子仁、胖大海、莲子、桃仁、槟榔、酸枣仁、薏苡仁、水蛭、地龙、全蝎、蜈蚣、僵蚕等多种中药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的提取与检测。实验结论本文按照中国药典2020版要求，对酸枣仁供试品溶液进行制备，并进行了液相色谱分析，谱图基线稳定，两个相邻色谱峰的分离度均大于1.5，酸枣仁供试品加标回收率也满足检测要求。Detection： Ex： 360 nm Em： 450nm 酸枣仁中黄曲霉毒素总量的提取与检测 背景 我国是中药材生产和应用的大国，发霉现象在中药材的种植、加工、贮藏等系列环节中普遍存在，由此导致的真菌毒素污染会严重影响中药的质量及安全，虽然可以通过一系列的防治技术来避免中药材被真菌毒素污染，但有效的检测方法也是控制中药材质量安全必不可少的环节。纳谱分析紧跟药典要求，推出了适合中药材中黄曲霉毒素总量供试品制备的 SelectCore AFT Total 免疫亲和柱及适合黄曲霉毒素检测的ChromCore 120 C18色谱柱。 适用范围 本方法参照中国药典2020版2351真菌毒素测定法黄曲霉毒素测定法第一法(液相色谱法)，适用于远志、大枣、肉豆蔻、决明子、麦芽、陈皮、使君子、柏子仁、胖大海、莲子、桃仁、槟榔、酸枣仁、薏苡仁、水蛭、地龙、全蝎、蜈蚣、僵蚕等多种中药材中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的提取与检测。 实验步骤 1、溶液配制 淋洗缓冲液：称取8.0 g氯化钠、1.2g磷酸氢二钠、0.2g磷酸二氢钾、0.2g氯化钾，加水990 mL使溶解，用盐酸调节pH值至7.0，加水稀释至1000mL，即可。 2、样品制备 取供试品粉末约5g(过二号筛)，精密称定，置于50mL离心管中，加入氯化钠1g，精密加入70%甲醇水溶液25 mL， 高速搅拌2分钟(搅拌速度大于11000 r/min)，离心5分钟(离心速度4000r/min)， 精密量取上清液15 mL， 置 50mL量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，离心10分钟(离心转速4000r/min)，取上清液备用。 3、固相萃取方法 SelectCore AFT Total 免疫亲和柱3mL (1)亲和柱预处理：取出亲和柱，恢复至室温(22-25℃)，亲和柱连接于注射器下，打开下端堵头，将柱内保存液流尽； (2)上样：精密量取样品制备中的上清液 20 mL 注入注射器筒中，通过免疫亲和柱，流速每分钟3mL； (3)淋洗：依次使用淋洗缓冲液 10mL、水 10mL淋洗， 弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子； (4)洗脱：准确加入1.5 mL 甲醇洗脱亲和柱，收集洗脱液，置2mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，过 0.22 um 尼龙针式滤器，即得。 4、液相色谱-光化学柱后衍生器-荧光检测器条件 Column： ChromCore 120 C18 5 um Dimension： 4.6×250mm Mobile Phase： 30/15/55 v/v/v 甲醇/乙腈/水 Flow rate： 11.0mL/min Temperature： 30°C Injection： 50 pL 光化学柱后衍生器：254nm 实验谱图 图14种黄曲霉毒素标准品、酸枣仁样品、酸枣仁样品加标对比图 峰序号 化合物 保留时间(min) 拖尾因子 分离度(USP) 1 黄曲霉毒素G2 9.261 1.08 2 黄曲霉毒素 G1 10.648 1.09 2.57 3 黄曲霉毒素B2 12.034 1.06 2.49 4 黄曲霉毒素B1 14.105 1.05 3.56 加标回收率 峰序号 化合物 加标量 加标回收率 1 黄曲霉毒素 G2 2.7 ng/kg 97.16% 2 黄曲霉毒素 G1 8.3pg/kg 95.51% 3 黄曲霉毒素B2 2.7 ng/kg 99.87% 4 黄曲霉毒素B1 8.3ng/kg 97.00% 实验结论 本文按照中国药典2020版要求，对酸枣仁供试品溶液进行制备，并进行了液相色谱分析，谱图基线稳定，两个相邻色谱峰的分离度均大于1.5，酸枣仁供试品加标回收率也满足检测要求。 纳谱分析NanoChrom纳谱分析技术(苏州)有限公司Phone： E-mail： customerservice@nanochrom.com Web： www.nanochrom.com