药物中多组分含量分析检测方案(紫外分光光度计)

585600_CHN _01 简介 如图1所示，含有对乙酰氨基酚和阿司匹林的复方药物是广泛用于治疗偏头痛的抗炎镇痛药。两种活性成分具有相似的作用机制，即通过防止产生引起疼痛、炎症和发热的前列腺素，从而抑制环 氧化酶(COX)。紫外/可见光谱法是质量控制实验室常用的快速技术，适合于在许多行业的不同产品制造阶段对组分的纯度和含量进行常规分析。 《美国联邦法规》 (CFR) 第21篇确立了美国食品药品监督管理局(FDA)法规以确保溯源性，该法规要求受FDA监管的行业保留所用系统的电子记录、审计和文档，并执行安装、操作和性能鉴定(IQ/OQ/PQ)[1]。本应用描述了根据《美国药典》 (USP)所载方法，高效使用LAMBDA365+测定对乙酰氨基酚的含量和百分比含量，以及药物制剂中的组分浓度，同时遵循21 CFR Part 11标准。 图1.对乙酰氨基酚(左)和阿司匹林(右)的的化学结构[2]。 原理 可以使用单点标准化方法测定单组分药物含量，该方法涉及测量参考样品标准溶液和样品溶液的吸收光谱。如等式1所示，朗伯-比尔定律表明，如果样品的光程保持不变，样品中特定物质的吸光度与吸收物质的浓度成正比。因此，可以利用这一关系测定样品中的单组分浓度。 等式1 朗伯-比尔定律(A-吸光度，e-摩尔吸光系数，c-浓度，1-光程) 这种比例对于包含一种以上吸收物质的多组分样品仍然有效。在混合物中，特定波长处的吸光度等于该波长处每种吸收物质各自吸光度贡献的总和。因此，对于多组分样品中的物质含量测定，可以使用联立方程方法测定每种组分的浓度，下图示出了双组分混合物(x和y)的含量测定[3]. 其中： A'-波长'处的吸光度 A"-波长"处的吸光度 E'-波长'处的摩尔吸光系数 E"-波长"处的摩尔吸光系数 c-浓度 对乙酰氨基酚含量测定 方法 从Sigma-Aldrich (A5000) 购买符合USP质量标准的对乙酰氨基酚粉末。制备对乙酰氨基酚储备溶液(100mg/L)：称取适量对乙酰氨基酚粉末(10mg) 置于100 mL容量瓶， 溶于1mL甲醇，用去离子水(DI)稀释至总体积。制备对乙酰氨基酚工作标准品：取10ml储备溶液置于100 mL容量瓶，用去离子水稀释至刻度。使用与工作作准品相同的方法制备供试品[4]。 使用UV ExpressTM软件和LAMBDA 365+，用去离子水作为空白对照，在200-400 nm之间扫描工作标准品和共试品的光谱。使用图2所示的仪器参数，在243 nm的最大吸收波长(Amax) 处测量这些样品的吸光度。 图2.LAMBDA 365+仪器参数和波长监测设置。 图3.标准品和供试品的光谱扫描。 图3显示了对乙酰氨基酚标准品和供试品的光谱，其中243nm处的吸光度分别为0.693和0.667。使用2a和2b中的等式计算供试品中的对乙酰氨基酚含量和百分比含量。 等式2a. 供试品中的对乙酰氨基酚=10.1mg 等式2b. 供试品中的对乙酰氨基酚百分比含量= ×100 10.3 mg 供试品中的扑热息痛百分比含量=98.1% 供试品中的对乙酰氨基酚含量为10.1 mg， 使用该计算值， 百分比含量为98.1%。USP 29规定，供品品应含有“不少于98.0%且不超过101.0%的CgH，NO2，按无水物计算”[5]。结果表明，对乙酰氨基酚供试品在这一范围内，因此符合USP方法。 多组分分析 ( 方法 ) 制备两份单独的对乙酰氨基酚(100 mg/L)和阿司匹林(100mg/L) 储备溶液：称取适量粉末(10 mg) 置于100 ml容量瓶，用0.1MHCI稀释至刻度，然后超声处理20分钟。制备10 mg/L对乙酰氨基酚和阿司匹林工作标准品：取适量上述储备溶液置于100ml容量瓶，用0.1M HCI稀释至刻度。 使用UV Express软件中的多组分分析(MCA)模式，将LAMBDA 365+扫描参数设置为测量200-400nm的波长范围。如图4所示， 将两份10 mg/L对乙酰氨基酚和阿司匹林溶液作为标准品，分别在10mm光程石英吸收池中进行测量，用0.1MHCI作为空白对照。使用不同比例的纯对乙酰氨基酚和阿司匹林溶液(如表1所示)制备三份4mL样品溶液，以获得双组分混合物样品。测量每份样品的吸收光谱，以测定混合物中每种组分的浓度。 图4.多组分分析设置。 表1.双组分混合物的浓度。 样品 对乙酰氨基酚浓度 阿司匹林浓度(mg/L) (mg/L) 1 7.50 2.50 2 5.00 5.00 3 2.50 7.50 结果 纯对乙酰氨基酚和阿司匹林标准品的重叠吸收光谱如图5所示，样品混合物光谱如图6所示。表2列出了使用软件的联立方程算法计算的浓度，并与预期比例进行了比较。样品2中对乙酰氨基酚和阿司匹林的计算浓度分别为4.82 mg/L和5.03 mg/L，接近5：5的预期比例。结果表明，在组分浓度范围内具有良好的准确度。 图6.标准品和多组分样品的重叠光谱。 表2.对乙酰氨基酚和阿司匹林组分的计算浓度。 样品 预期比例(对乙酰氨基酚：阿司匹林) 对乙酰氨基酚的计算浓度(mg/L) 阿司匹林的计算算浓度(mg/L) 1 7.5：2.5 7.25 2.58 2 5.0：5.0 4.82 5.03 3 2.5：7.5 2.42 7.33 在本应用中，对乙酰氨基酚百分比含量符合USP 29对乙酰氨基酚含量测定要求，并且药物混合物的多组分分析获得高准确度。LAMBDA 365+联合UV Express软件能够快速简便地测定药物含量，并准确定量测定多组分混合物，同时遵循21 CFRPart 11标准。附加软件功能使LAMBDA365+能够支持所有要求符合法规的应用和方法。 1. U.S. Department of Health and Human Services Food andDrug Administration， Guidance for Industry Part 11，Electronic Records； Electronic Signatures 一 Scope andApplication. 2. http：//www.chemspider.com/Structures of Paracetamoland Aspirin. 3. Chaudhary et al. IRJP 2011， 2 (12)， 81-83 ‘SimultaneousEstimation of Multicomponent Formulations by UV-Visible Spectroscopy： An Overview. 4. Behera et al.， JAnal Bioanal Techniques 2012， 3：6，UV-Visible Spectrophotometric Method Development andValidation of Assay of Paracetamol Tablet Formulation. 5. http：//www.pharmacopeia.cn/v29240/usp29nf24s0_m200.html. 欲获悉全球办事处的完整清单，请登录www.perkinelmer.com/ContactUs 版权所有C2020珀金埃尔默公司。保留所有权力。 PerkinElmer@是珀金埃尔默公司的注册商标。所有其他商标属于相应所有者的财产。 在本应用中，对乙酰氨基酚百分比含量符合USP 29对乙酰氨基酚含量测定要求，并且药物混合物的多组分分析获得高准确度。LAMBDA 365+联合UV Express软件能够快速简便地测定药物含量，并准确定量测定多组分混合物，同时遵循21 CFR Part 11标准。附加软件功能使LAMBDA 365+能够支持所有要求符合法规的应用和方法。