出口食品中对羟基苯甲酸酯检测方案(液相色谱仪)

月旭科技(上海)股份有限公司 Tel：400-81C01--669)69E-|-m a il：lingyuyu@w eelchmnaat.com 出口食品中对羟基苯甲酸酯的测定 SN/T 4047-2014 1、适用范围 适用于苦瓜、苹果、肉罐头、苹果酱、豆沙馅料、醋、酱油、豆瓣酱、4牛奶、乳味饮料、胡萝卜汁、橙汁和碳酸饮料等食品中对羟基苯甲酸酯含量测定(该实验选用基质为可乐和苹果) 参考标准： 《SN/T 4047-2014出口食品中对羟基苯甲酸酯的测定》 2、溶液的配置 1) 标准储备液：各称对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸丁酯5mg，用甲醇溶解并定容至 10mL， 溶度为 500 ug/mL， 于4℃储存。 2 标准工作液：各吸取 0.2mL 标准储备液，用甲醇溶解并定容至10mL，溶度为 10 ug/mL 3)2mol/L乙酸铵溶液：称取乙酸铵77g，，加水定容至500mL，超声溶解，备用。 )35%甲醇溶液：量取甲醇35mL 加入65mL水，超声混匀，备用。 )洗脱剂：量取5mL氨水和95mL甲醇，超声混匀，备用。 3、提取步骤 a)可乐 称取试样5.0g(精确到0.01g)于50mL离心管中，加入2mL乙酸铵溶液震荡摇匀，加入2g氯化钠，15mL乙腈，涡旋混匀 2min，于4500r/min 离心 5min， ( 声明：除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 ) ( Add：上海市松江区明南路 85 号启迪漕河泾(中山)科技园.紫荆园10 号 邮 楼 邮编：201600 ) ( A dd： ：浙 江省 金华 市 婺城 区 ( 双林南 街 1 16 6 8 编 ： 3 2 1 10 0 0 0 ) ( 号 Tel：400-81001- -6 69)69E--1m ail：lingyuyu@weelchm na at.com ) 将乙腈层转至 100mL浓缩瓶中，残渣中加入10mL乙腈，重复提取两遍，合并乙腈，，于40℃氮吹至近干，用甲醇定容至1mL，过0.22um滤膜，待测。 b)苹果 称取试样5.0g(精确到0.01g)于50mL 离心管中，加入2mL 乙酸铵溶液震荡摇匀，加入2g氯化钠，15mL乙腈，涡旋混匀 2min， 于4500r/min 离心 5min，将乙腈层转至100mL浓缩瓶中，残渣中加入10mL乙腈，重复提取两遍，合并乙腈，于40℃氮吹至近干，加入2mL 35%甲醇溶液，待净化。 4、净化 SPE小柱： 月旭 Welchrom@ C18小柱，规格：500mg/3mL 活化：5mL甲醇，10mL水，弃去 上样：全部上样，弃去 分 淋洗：：3mL水，弃去，压干 洗脱：：5mL洗脱剂，收集 洗脱液于40℃氮吹至近干，用甲醇定容至1mL， 过 0.22um滤膜，待测。 5、注意事项 1)加标水平：5g样中加入100pL 10ug/mL 混合标准工作液，复溶至1mL 上机，因此加标水平为 0.2mg/kg，最终机度数为 1mg/L。 6、色谱条件 色谱柱：月旭UItimateR XB-C18，4.6x150mm，3um 流动相：A：水-B：甲醇，梯度 声明：除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add：上海市松江区明南路85号启迪漕河泾(中山)科技园.紫荆园10号邮楼 邮编：201600 A dd：：浙江省金华市婺城区双林南街11668 编：32110000 号Tel：400-81001--669)69E--1m ail：lingyuyu@w'eelchmnaat.com 流速： 1mL/min 柱温：30℃ 进样量： 10uL 波长：260nm 梯度表： 时间/min A% B% 0 60 40 5 60 40 15 40 60 30 40 60 7、色谱图或者加标回收率结果 图1. 对羟基苯甲酸酯混标1mg/L图谱 声明：除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add：上海市松江区明南路85号启迪漕河泾(中山)科技园.紫荆园10号邮楼 邮编：201600 Add：：浙江省金华市婺城区双林南街11668 编：32110000 号Tel：400-81C01--669)69E--1m a il：lingyuyu@weelchmnaat.com 峰名称 保留时间 峰面积 峰高 相对峰面积 拖尾因子 塔板数 min mAU*min mAU % EP (USP) 对羟基苯甲酸甲酯 5.890 0.9662 2.25 18.27 0.96 1127 对羟基苯甲酸乙酯 11.903 0.9636 2.71 18.22 1.00 6733 对羟基苯甲酸异丙酯 16.158 0.8621 3.31 16.30 1.00 23336 对羟基苯甲酸丙酯 17.128 0.8724 3.55 16.50 1.05 29768 对羟基苯甲酸异丁酯 22.077 0.7672 2.14 14.51 n.a. 23102 对羟基苯甲酸丁酯 22.795 0.8564 2.28 16.20 n.a. 22173 图2.可乐样品空白图谱 声明：除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 ( Add：上海市松江区明南路 85 号启迪漕河泾(中山)科技园.紫荆园10 号 邮 楼 邮编：201600 ) ( Add： ：浙 江省 金华 市 婺城 区 双林南 街 1 16 6 8 编 ： 3 2 1 10 0 0 0 ) ( 号 Tel：400-81C01- -6 69)69E--1m ail：lingyuyu@weelchm na at.com ) 图3. o可乐样加标0.2mg/kg 图谱 图4.苹果样品空白图谱 声明：除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 ( Add：上海市松江区明南路 85 号启迪漕河泾(中山)科技园.紫荆园10 号 邮 楼 邮编：201600 ) ( Add： ：浙 江省 金华 市 婺城 区 双林南 街 1 16 6 8 编 ： 3 2 1 10 0 0 0 ) 图5.苹果样加标 0.2mg/kg 图谱 表1.加标回收率表 基质 名称 加标水平mg/kg 平均回收率 RSD%(n=2) 可乐 苹果 对羟基苯甲酸甲酯 0.2 99% 4.74% 对羟基苯甲酸乙酯 99% 2.79% 对羟基苯甲酸异丙酯 97% 3.51% 对羟基苯甲酸丙酯 96% 0.40% 对羟基苯甲酸异丁酯 100% 5.16% 对羟基苯甲酸丁酯 105% 4.96% 对羟基苯甲酸甲酯 76% 3.51% 对羟基苯甲酸乙酯 88% 2.98% 对羟基苯甲酸异丙酯 81% 3.94% 对羟基苯甲酸丙酯 86% 1.73% 对羟基苯甲酸异丁酯 88% 0.31% 对羟基苯甲酸丁酯 91% 4.18% 声明：除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 Add：上海市松江区明南路85号启迪漕河泾(中山)科技园.紫荆园10号楼邮 邮编：201600321 000 Add：：浙江省金华市婺城区双林南街11668 编： 10 ( Tel：400-81C01- -6 69)69E--1m ail：lingyuyu@weelchm na at.com ) 8、、相关产品信息 货号 名称 规格 00504-11005 SPE小柱 WelchromQ C18， 500mg/3mL，50pk 00837-05006 50mL螺口尖底离心管 离心管一次性离心管，平盖，锥形底，RCF12000xg，袋装，未灭菌，50mL， 50/包 00837-05002 15mL 螺口尖底离心管 离心管一次性离心管，平盖，锥形底，RCF12000xg，袋装，未灭菌，15mL， 50/包 00824-31001 Welch 固相萃取装置 12位方缸 00821-32291 盖子+垫片 预切口红色特氟龙/白色硅胶隔垫，9mm蓝色短螺纹开口盖中心孔6mm 100pk 00821-40927 样品瓶 2mL 透明短螺纹广口样品瓶带书写处11.6*32mm1一级水解玻璃 100pk 00201-21041 液相色谱柱 UItimateQ XB-C18， 4.6x150mm，3um 00826-M168P250 对羟基苯甲酸甲酯 CAS：99-76-3 00826-E085P250 对羟基苯甲酸乙酯 CAS：120-47-8 对羟基苯甲酸异丙酯 CAS：4191-73-5 00826-P252P250 对羟基苯甲酸丙酯 CAS：94-13-3 对羟基苯甲酸异丁酯 CAS：4247-2-3 对羟基苯甲酸丁酯 CAS：94-26-8 ( 声明：除非另有说明，此报告结果仅对该测试样品负责。本报告未经公司许可，不可复制。 ) ( Add：上海市松江区明南路 85 号启迪漕河泾(中山)科技园.紫荆园10 号 邮 楼 邮编：201600 ) ( Add： ：浙 江省 金华 市 婺城 区 双林南 街 1 16 6 8 编 ： 3 2 1 10 0 0 0 ) ( 号 Tel：400-81C01- -6 69)69E--1m ail：lingyuyu@weelchm na at.com ) 1) 标准储备液：各称对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲 酸异丙酯、对羟基苯甲酸丙酯 、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸丁酯 5mg，用甲醇溶解并定容至 10mL，溶度为 500 μg/mL，于 4℃储存。 2) 标准工作液：各吸取 0.2mL 标准储备液，用甲醇溶解并定容至 10mL， 溶度为 10 μg/mL 3) 2mol/L 乙酸铵溶液：称取乙酸铵 77g，加水定容至 500mL，超声溶解， 备用。 4) 35%甲醇溶液：量取甲醇 35mL 加入 65mL 水，超声混匀，备用。 5) 洗脱剂：量取 5mL 氨水和 95mL 甲醇，超声混匀，备用。