面包和豆干中丙酸钠、丙酸钙检测方案(旋涡混合器)

食品中丙酸检测的固相萃取方法（Copure® HLB） 丙酸及其钠盐和钙盐具有抑菌作用，可以防止霉菌的生长，常作为防腐剂和防霉剂添加到食品中。本实验参考了GB 5009.120-2016《食品中丙酸钠、丙酸钙的测定》中的前处理方法，建立了不同样品基质中丙酸的固相萃取测定方法，可显著降低样品基质带来的干扰，本法操作简便，回收率好。 样品提取 称取5.0 g样品于50 mL离心管中，加水20 mL，加入0.5 mL的1.0 mol/L磷酸溶液，涡旋混匀2 min,超声提取10 min,用1.0 mol/L磷酸溶液调pH为2.8~3.1，用水定容至刻度，摇匀，8000 r/min离心5 min，离心后取上清液5 mL于另一干净试管，待净化。 二、样品净化 （Copure® HLB, 500 mg/6mL） 活化：固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇，5 mL 水活化。 上样：加入上述待净化液至固相萃取柱中。 淋洗：加入5 mL 10 %甲醇水淋洗固相萃取柱，弃去流出液。 洗脱：加入5 mL 50 %甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，混匀，过0.22 μm有机滤膜，上机。 仪器条件 仪器：液相色谱仪，ThermoFisher U3000 色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm，5 μm) 流动相：A：1.5 g/磷酸氢二铵溶液（用1.0 mol/L磷酸溶液调为3.0左右）    B：50 %甲醇水溶液 洗脱方式：梯度洗脱，见表1 流速：1.0 mL/min 柱温：25 ℃ 进样量：20 μL 检测器：紫外检测器 检测波长：214 nm 表1 梯度洗脱程序 时间/min A/% B/% 0.0 95 5 14.0 95 5 18.0 5 95 21.0 5 95 22.0 95 5 30.0 95 5 实验结果 加标回收实验结果 表2 加标回收结果 名称 加标浓度 （g/kg） 回收率（%） 平均回收率（%） RSD（%，n=3） 豆干 0.10 99.93 101.56 103.16 101.55 1.59 1.00 94.98 95.77 92.73 94.49 1.67 面包 0.10 96.00 95.83 97.92 96.58 1.20 1.00 92.32 91.49 90.55 91.45 0.97 （2）豆干和面包中丙酸色谱图 图1豆干中丙酸（空白）液相色谱图 图2 加标浓度为0.10 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图 图2 加标浓度为0.10 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图 图3 加标浓度为1.00 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图 图4面包中丙酸（空白）液相色谱图 图5 加标浓度为0.10 g/kg的面包中丙酸液相色谱图 图6 加标浓度为1.00 g/kg的面包中丙酸液相色谱图 订购信息 货号 描述 包装 COHLB6500 Copure® HLB, 500 mg/6mL 50支/盒 BN24 biocomma® 智能水浴氮吹仪 1台/箱 SDC-3000-D biocomma® 多管涡旋混匀仪 1台/箱 SF130-22-NL NL针式过滤器，直径13 mm，孔径0.22 μm，有机系 100个/盒 SC2-1 2 mL蓝色聚丙烯盖，白色PTFE/红色硅胶垫，9-425 100个/盒 V2-AL 2 mL螺纹棕色样品瓶，带书写处11.6*32 mm，9-425 100个/盒 样品提取称取5.0 g样品于50 mL离心管中，加水20 mL，加入0.5 mL的1.0 mol/L磷酸溶液，涡旋混匀2 min,超声提取10 min,用1.0 mol/L磷酸溶液调pH为2.8~3.1，用水定容至刻度，摇匀，8000 r/min离心5 min，离心后取上清液5 mL于另一干净试管，待净化。样品净化▼Copure® HLB, 500 mg/6mL▼活化：固相萃取柱使用前依次用5 mL甲醇，5 mL 水活化。上样：加入上述待净化液至固相萃取柱中。淋洗：加入5 mL 10 %甲醇水淋洗固相萃取柱，弃去流出液。洗脱：加入5 mL 50 %甲醇水溶液洗脱，收集洗脱液，混匀，过0.22 μm有机滤膜，上机。仪器条件仪器：液相色谱仪，ThermoFisher U3000色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)流动相：A：1.5 g/磷酸氢二铵溶液（用1.0 mol/L磷酸溶液调为3.0左右）B：50 %甲醇水溶液洗脱方式：梯度洗脱，见表1流速：1.0 mL/min      柱温：25 ℃     进样量：20 μL检测器：紫外检测器  检测波长：214 nm表1 梯度洗脱程度实验结果【加标回收实验结果】表2 加标回收结果【豆干和面包中丙酸色谱图】图1豆干中丙酸（空白）液相色谱图图2 加标浓度为0.10 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图图3 加标浓度为1.00 g/kg的豆干中丙酸液相色谱图图4面包中丙酸（空白）液相色谱图图5 加标浓度为0.10 g/kg的面包中丙酸液相色谱图图6 加标浓度为1.00 g/kg的面包中丙酸液相色谱图订购信息