大米中黄曲霉毒素 B1检测方案(旋涡混合器)

真菌毒素 大米中黄曲霉毒素B1 含量的免疫亲和柱法 (Copure@黄曲霉毒素B1免疫亲和柱) 本方法适用于大米中黄曲霉毒素B1的检测 一、样品提取 测波长：激发波长：360 nm 称取5.00g(精确到0.01g)粉碎大米到50 mL离心管，加入20 mL 70%甲醇水溶液，涡旋混匀，振荡10 min， 4000 r/min 下离心5 min， 取上清液4 mL于另一50mL离心管，加水21mL，混匀待净化。 发射波长：440 nm 流动相：A：乙腈 B：水 洗脱方式：等度洗脱，A： B=25：75 二、免疫亲和柱净化 (Copure°黄曲霉毒素B1免疫亲 流速： 0.6 mL/min 和柱，3mL)上样：将20mL上羊器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液样品液以1-2滴/秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。淋洗和洗脱：用20mL水淋洗柱子，分两次淋洗，弃掉流出的液体；抽干小柱；加入2×2mL甲醇缓慢洗脱亲和柱，流速约为2-3秒/滴；50℃下氮吹至近干，待衍生。 进样体积：20L 五、实验结果 表10.5 ng/kg 大米中黄曲霉毒素B1的添加回收结果 名称 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%) 1 2 3 黄曲霉毒素B1 83.2 84.8 80.0 82.7 3.0 三、衍生化反应 衍生：加100三氟乙酸和200L正己烷于待衍生样品液中，于40℃水浴避光振荡 15 min。重新溶解：50℃下氮吹至近干，加1mL 10%乙腈水溶液溶解，0.22 Hm滤膜过滤，供HPLC分析。 四、仪器条件 设备： Waters Alliance 2695 色谱柱： Inertsustain-C18 (4.6 mm×250 mm， 5 Hm) 图1添加水平为0.5 ug/kg大米中黄曲霉毒素Bl检测的液相色谱图 检测器： Waters 2475荧光检测器 订购信息 货号 描述 包装 COAFMB103 Copure@ 黄曲霉毒素 B1免疫亲和柱， 3mL 20支/盒 SF130-22-PTFE PTFE/中13 mm/0.22 Hm/有机系 100个/盒 MF047-45-MCE MCE/中47 mm/0.45 Hm/水系 200片/盒 MF047-45-PTFE PTFE/中47 mm/0.45 Hm/有机系 200片/盒 V2-AL 2 mL棕色短螺纹广口样品瓶，带书写处 100个/盒 SPEMF12GC 12位固相萃取负压装置，玻璃缸本 1个/盒 SC2-5 2 mL 蓝色聚丙烯盖，预开口， 9-425 100个/盒