药物中辅料检测方案(液相色谱仪)

药用辅料分析检测解决方案 GC/GCMS 聚焦药用辅料关注药物分析 Thormo 赛默飞色谱及痕量元素分析药用辅料分析检测解决方案 ThermoFisher S CIENTIFIC 药用辅料(pharmaceutical excipients ) 是指在制剂处方设计制，为解决制剂的成型性、有效性、稳定性、安全性加入处方中除主药以外的一切药用物料的统称。是药物制剂的基础材料和重要组成部分，不仅赋予药物一定剂型，而且对药物制剂的安全性和有效性有着重要的影响。为确保药用辅料的安全，各国药典对辅料的定性和定量方法均做出了明确规定。中国药典(2015版)收录的药用辅料达到270种，包括一些常见但以前关注程度较少的辅料，如吐温、SPAN 和PEG 等。2015版中国药典收录的药用辅料不仅数量增加(2010年版中国药典仅收录132种)，标准与检测技术也不断提高。赛默飞色谱及痕量元素分析产品，以其完整的产品线和多样的检测手段，可为药用辅料的分析检测创造出全新的可能性。 药用辅料类别及赛默飞分析检测解决方案 辅料分类 功能 常见药用辅料 赛默飞色谱及痕量元素分析检测解决方案 (2015版药典收录) 辅材分析 辅材中杂质/有害物质分析 稀释剂 增加重量和体积，利于成型和分剂量 淀粉、糊精、蔗糖、乳糖、甘露醇 ·环糊精(IC) ·甘露醇/乳糖/棕榈酸/脂肪酸(HPLC-CAD) 缓释剂 使药物有效成分根据需要逐步释放，保证药效 聚酰胺、聚酯、胶类、 空心纤维、甘油酯类 ·甘油酯类 TAG 和 DAG (HPLC-CAD) 载体(膏体/软膏基质) 乳化作用、药物有效成分的载体(外用药) 脂肪醇、棕榈酸、脂肪酸、聚乙二醇 ·脂肪醇/棕榈酸/脂肪酸(HPLC-CAD) 湿润剂 润湿物料，以产生足够强度的黏性，利于制成颗粒 水、乙醇 ·维生素 K3中的乙醇、正丁醇(GC) ·发酵液中的乙醇(GC) 溶剂/助溶剂/乳化剂 溶解药物，易于吸收 注射用水、乙醇、丙二|醇、甘油、吐温、二苯酮、 ·水中甘油，二苯酮，N，N-二甲基甘氨酸(GC)·氨茶碱片中的乙二胺(IC) ·硫酸依替米星中的亚硫酸根(IC) ·甘氨酸测定 (HPLC) ·哌拉西林中的 PEG-400 (HPLC-CAD) ·注射液中的吐温-80 (HPLC-CAD) ·蛋白药物中的吐温-20(HPLC-CAD) ·非离子型表面活性剂吐温-20，吐温-80和Triton X-100 (HPLC-CAD)·维生素K3中的乙醇、正丁醇(GC) ·发酵液中的乙醇(GC) 包衣材料 改善片剂外观、增加药物稳定性、掩盖药物不良气味、控制药物释放部位等 丙烯酸树脂、羟丙甲纤维素、聚维酮、纤维醋法酯 ·三氯蔗糖(HPLC-CAD) ·醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯中的乙酸、琥珀酸(HPLC) 崩解剂 促进片剂在胃肠液中迅速崩解成小粒子，易于吸收 干淀粉、羟甲基淀粉钠、交联聚维酮 ·淀粉中的乙二醇(IC) 吸收剂 吸收片剂中的挥发油等液体成分，保持干燥，以利于制成片剂 硫酸钙、碳酸氢钙、氧化镁、碳酸钙 ·达替肝素钠中的硫酸根(IC) 粘合剂 使无黏性或低黏性物料聚集成颗粒 羟丙甲纤维素 HPMC、聚维酮PVP、淀粉浆、糖浆 ·2015版药典共聚维酮(HPLC-UV) 润滑剂 使片剂在压片时顺利加料和出片，减少药品成型中的摩擦力 硬脂酸镁、滑石粉、氢化植物油、聚乙二醇、微粉硅胶 ·哌拉西林中的 PEG-400(HPLC-CAD) 着色剂 改善片剂外观，便于识别 二氧化钛、日落黄、亚甲蓝、药用氧化铁红 ·饮品中的8种色素(HPLC) 缓冲剂 维持合适的 pH值，保持主药安全、稳定、有效 盐酸、乳酸、氢氧化钠、枸缘酸、枸缘酸钠；酒石酸、酒石酸钠 ·头孢呋辛中的乳酸和乙酸(IC)·三七总皂苷冻干粉针剂中的阴离子(IC) ·甘氨酸 (HPLC-UV) 抗氧化剂 延缓药物制剂的氧化 亚硫酸钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠 ·注射用绿原酸中的亚硫酸盐(IC)·亚硫酸氢钠(IC) ·甘氨酸(HPLC) 蛋白保护剂 与金属离子络合，增强抗氧效果 氨基酸、EDTA-Na ·甘氨酸(HPLC) 抗菌剂 防止或抑制病原微生物发育生长 苯酚、苯甲醇、苯扎氯胺、没食子酸 ·苯扎氯胺 (AB237)/没食子酸/羟苯丁酯/羟苯苄酯(HPLC) 等渗调节剂 调整注射液的渗透压，避免出现生理不适应状，如刺激、溶血等 氯化钠、葡萄糖 ·丹曲林钠中的钠(HPLC) 赛默飞UltiMate3000 系列液相色谱系统是分析活性药物成分，药物代谢产物，药物辅料等的有利工具，无论您有何种需求，我们都可以提供对应的液相色谱系统。 ·提供独特的双三元液相色谱系统满足您串联或并联的应用需求 ·提供快速分离液相色谱系统满足您快速、高流速、高压的应用需求 。提供生物兼容液相色谱系统满足您生物制药的开发及检测需求 ·提供二极管阵列，多波长紫外，荧光，CAD电雾式检测器，库伦电化学检测器，质谱等多种检测器，满足您对各种复杂成分的检测需求 赛默飞离子色谱已经有40年的历史，无论是产品创新，应用及研发等都处于离子色谱的领先地位。我们可以根据您的需求提供最高性价比的系统。 ·入门级的离子色谱用于常规分析 ·免试剂离子色谱系统无需手工配制浓淋洗液，用等度泵就能实现梯度淋洗 ·双系统能满足双倍的分析量，适合连续分析或者复杂方法的开发 。多种检测器供选择：抑制电导检测器、安培检测器、紫外可见光检测器、荧光检测器以及质谱检测器 ●“即时联接””——TRACE 1300 GC插拔式进样口及检测器，可方便地从单通道升级到多通道；换损坏进样口、检测器仅需几分钟 ·永不停机的ISQTM单四极杆气相色谱-质谱——真正实现高负荷高效率的GC-MS D. 原子吸收光谱仪， 电感耦合等离子体发射光谱仪赛默飞iCE3000 系列原子吸收光谱仪(AAS)可以作为铜、镉、铅、砷、汞等药品中有害元素分析控制的有利工具。简单的样品制备流程及快速上手的方法优化为准确可靠地进行微量和痕量分析提供了高效率的解决方案。赛默飞iCAP7000 Plus 系列电感耦合等离子体发射光谱仪(ICP-OES)采用“水平观测方式分析痕量元素、垂直观测模式分析主量元素”确定双向观测最优化条件，同时借助于预先导入的方法模板使方法开发变得简单快速，满足药品中多元素分析的需求，提供所有同类产品中最具竞争力的检出限水平。 电感耦合等离子体发射光谱-质谱联用(ICP-MS)作为一种新兴的痕量元素检测技术正被越来越多的药品分析用户使用。赛默飞 iCAP RQ ICP-MS 具有多元素同时检测，检测速度快，灵敏度高，动态范围宽的特点，而这些优势则是目前应用更为广泛的石墨炉原子吸收所不具备的。因此，近年来 ICP-MS元素分析方法不断地成为或即将成为环保、食品、药品、农产品检测的重金属元素检测法定方法。 样品前处理设备 赛默飞加速溶剂萃取 Dionex ASE 拥有专利技术，它通过提高温度和压力，能够使用常见溶剂从固体和半固体样品中萃取分析物。相比索式提取和超声提取等技术， ASE 只需更少的时间和溶剂即可得到良好的实验结果。 ·省时间，数分钟完成1至100g样品的提取 ·省溶剂，与其它现有技术比，可以节约50-90%的溶剂 。省劳力，完全自动化，便于方法开发，能够无人值守的运行 。经验证可用于U.S. EPA、GB/T和CLP计划等 药用辅料分析检测解决方案 LC 生物缓冲液中的胍与氯离子 盐酸胍是医药、农药、染料及其它有机合成物的中间体。它属于紫外末端吸收和易电离化合物，在反相液相色谱上保留很弱，因而难于检测。通常采用离子色谱-电导检测法或离子对液相色谱紫外检测器法进行分析。离子色谱电导检测器法能分别测定胍和氯离子且具有较高的灵敏度但该方法不能实现胍和氯离子的同时检测。离子对试剂液相色谱紫外检测器法可提供较长的保留和较好的分离度，但由于胍的紫外吸收较弱，低波长检测易受离子对试剂干扰，导致检测灵敏度低、无法满足分析测试要求。采用 Trinity P1 色谱柱，，一种新型的三位一体混合基质色谱柱，能对有机化合物-胍和其对离子-氯离子进行同时分离，同时以新型通用型检测器——电雾式检测器(CAD)为检测手段，实现氯离子和胍的同时检测。结果表明，采用 Trinity P1 色谱柱和 CAD 检测器能对胍和氯离子进行分离检测，取得了较理想的结果，样品测定谱图见图1。方法简单易行，相对离子对液相色谱紫外检测法和分光光度法等有明显的优势。 图1.生物缓冲液中的胍与氯离子色谱图 蛋白药物中的聚山梨醇酯20 聚山梨醇酯-20( Polysorbate-20)，商品名为吐温-20(Tween-20)，是聚山梨醇酯类中的一种，属于非离子型表面活性剂，具有乳化、扩散、增溶、稳定等作用。在生物制药行业中，聚山梨醇酯常用作蛋白乳化剂，可减少蛋白质之间原有的相互作用，且不破坏蛋白的结构。聚山梨醇酯20含有较多的亲水性基团，没有强生色官能团，采用常用的反相液相色谱-紫外检测器较难进行准确的定性与定量测定，常见方法是混合液相色谱分离配合蒸发光散射检测器检测，但该方法检测器灵敏度低，重现性差；也有使用液质联用法分析，但由于聚山梨醇酯成分较复杂，故难以定量，且仪器使用成本较高。赛默飞推荐采用液相色谱配合通用型检测器电雾式检测器(CAD)分析聚山梨醇酯，该方法灵敏度高、重现性稳定、线性范围宽，样品测定谱图见图2。 图2.蛋白药物中的聚山梨醇酯20色谱图 辅料中的杂质有一部分极性大，水溶性强，无法用液相等其他方法准确测定，离子色谱分析此类物质具有高效分离、灵敏检测和专属性强的特点，为辅料质量控制提供了有效的解决方案。 乳酸中乙醇酸的测定 乳酸是常用辅料，与药物成盐后存在于药品中。乙醇酸是在乳酸生产过程中产生的副产物，由于其结构与乳酸类似，分离存在难度。使用 ICE-AS6 柱排斥法可分离乳酸和乙醇酸，但ICE-AS6的柱效和容量都不高，不适用于乙醇酸与乳酸的比例达到 1：10000 的情况。采用 AS15色谱柱，可将乙醇酸和乳酸分开，且乳酸不干扰乙醇酸的定量。离子色谱抑制型电导检测乳酸中乙醇酸(阴离子电解再生抑制器，自循环模式)，样品测定谱图见图3。 图3.乳酸中乙醇酸的测定色谱图 几丁糖中氯乙酸的测定 医用几丁糖是由蟹壳提纯的高分子化合物几丁质，经脱N-乙酰基再深加工后制成的一种聚氨基葡萄糖，是一种生物相容性好、可降解性的医用高分子材料。医用几丁糖具有选择性促进上皮细胞、内皮细胞生长而抑制成纤维细胞生长的生物特性，可促进组织生理性修复，抑制疤痕形成，减少组织粘连。在普通外科、妇产科等腹、盆腔手术中广泛用来预防术后肠粘连和盆腔粘连。医用几丁糖在加工过程中需要用到氯乙酸，而氯乙酸对人体细胞具有较大的刺激性，因此在最终产品中需要监测其含量。几丁糖在使用过程中多用生理平衡液配制而成，其中氯离子的含量较高。采用离子色谱电导检测(检测方式：抑制型电导，阴离子电解再生抑制器，自循环电抑制模式)可同时将氯乙酸和高浓度的氯离子分开，并对氯乙酸准确定量。样品测定见图4。 图4.几丁糖中氯乙酸的测定色谱图 HS-GC (顶空-气相色谱)分析药物中的溶剂残留 药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料生产过程以及制剂制备过程中使用但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。药品还可能被来自包装、运输、仓储过程中接触的有机溶剂污染。因残留溶剂会影响产品的安全性，故必须对其进行监测。《《中国药典》参考了国际协调大会(ICH)颁布的残留溶剂研究指导原则，对四类有机溶剂进行了限量要求。本法采用顶空-毛细柱气相色谱法，测定药物中多种挥发性溶剂残留。各化合物分离色谱图见图5-1，5-2和5-3)。 药品中乙醛、乙酸的测定 (GC-MS) 利用ISQ气质联用， 采用 TriPlus RSH顶空进样模式，：，可测定药品中的乙醛和乙酸。下面为某客户样品的测定结果，标准品谱图和样品测定谱图见图6-1和6-2。 图5-1.一类溶剂色谱图 图5-2.二类溶剂 A( Class 2A)色谱图 图6-2.样品TD1谱图 ICP-MS 测定生理盐水中的杂质元素 生理盐水是生理学实验或临床上常用的渗透压与动物或人体血浆的渗透压相等的氯化钠溶液，其用途为供给电介质和维持体液的张力。生理盐水输入人体后，其重金属的含量直接影响着人体内血液的重金属含量。所以对生理盐水中重金属的的测定具有重要的意义。电感耦合等离子体质谱法 (ICP-MS) 测定微量元素具有操作简单、干扰少等优点，而且可多元素同时测定、灵敏度高、动态范围宽，可测定生理盐水中的重金属元素。表1为使用 iCAP Qc 测定6种生理食盐水样品(50倍稀稀)的结果。 表1.样品测量结果、回收率和方法检出限 金属元素 测定结果 (ppb) MDL (ppb) #1 #1样品加标回收率% #2 #3 #4 #5 #6 #6样品加标回收率% 加入量 2ppb) (加入量 2 ppb) 24Mg (KED) 156 100 223 239 241 221 237 100 10 39K(KED) 353 91 507 479 704 528 705 89 21 44Ca (KED) 126 106 192 227 378 175 222 105 11 48Ti(KED) 1.6 97 21.1 22.1 23.4 20.6 24.7 104 9.0 52Cr (KED) 9.9 98 19.7 18.6 25.7 29.7 26.7 97 0.4 55Mn(KED) 3.1 104 4.1 4.0 4.6 4.5 4.4 105 0.7 56Fe (KED) ND 93 16.9 31.6 35.3 17.0 30.0 95 3.0 60Ni (KED) 1.3 97 7.9 5.7 6.6 6.5 6.3 100 2.0 63Cu(KED) 1.0 97 18.6 13.1 15.2 12.3 11.3 97 1.0 66Zn (KED) 21.6 98 50.8 59.6 54.4 55.1 58.4 98 6.0 75As (KED) ND 113 1.8 1.7 1.8 2.2 2.2 115 0.4 88Sr (KED) 4.7 107 10.1 10.2 11.0 10.1 10.3 106 0.4 137Ba (KED) 41.3 103 42.4 44.4 41.4 42.5 42.4 100 0.7 208Pb (KED) 0.5 110 12.9 11.6 11.2 11.1 10.8 104 0.2 iCAP 6000 ICP-OES测定肝素中多种元素含量 某客户要求测定其样品中是否含有 As、Cd、Cu、Hg、Ir、Mo、Ni、Pb、Pd、Pt、Rh、V、B等元素。依据 USP232各元素限量要求范围，配制分析元素标准溶液，样品测定结果获得客户认可，结果见表2。 表2.样品测量量果(mg/Kg) 元素 As1890 Cd2144 Cu3247 Hg1849 lr2126 Mo2020 MDL， (mg/kg) 0.04 0.0024 0.008 0.014 0.028 0.008 精品肝素

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