植物类食品中农药检测方案(液相色谱仪)

Edgar Naegele 和 Thomas Glauner 安捷伦科技有限公司 Waldbronn， Germany 使用 Agilent 1260 Infinity分析型SFC 系统与三重四极杆质普检测开发多农药分析方法 应用简报 食品检测与农业 摘要 本应用简报介绍了使用 Agilent 1260 Infinity 分析型 SFC 系统结合 Agilent6460三重四极杆质谱仪开发用于多农药分析的超临界流体色色(SFC)方法。利用最终的多农药分析方法在一次分析中测定200多种农药。在不同的水果和蔬菜基质中加入处于相关浓度范围内的各种浓度的农药，并对其进行定量分析。展示并讨论了各个校准和性能数据。 前言 如今，市面上销售的农药化合物有数百种，它们在全球范围内用于保护植物食品((如蔬菜、水果、玉米和谷物)免受各种害虫影响。在植物类食品上市之前，必须对其中可能存在的农药残留进行检测，并且这些农药残留必须满足法定限值要求。大量可能的农药-基质组合使得用于定量测定食品中农药的方法必须能对可能的化合物范围实现最广泛的覆盖。通常利用HPLC 方法与质谱相结合来对这些化合物进行分析，其中化合物通过液相色谱分离，并利用三重四极杆质谱法在多反应监测(MRM)模式下进行选择性检测。之前介绍了对农药的超临界流体色谱 (SFC) 分离方法的优化、对其质谱检测的优化以及基质化合物的影响23。 与HPLC相比， SFC 能够使用更经济的溶剂(如二氧化碳)i和危害较小的溶剂(如甲醇或乙醇)，降低溶剂废液处理成本，并缩短分析时间。必须对完整的植物食品样品进行提取并将其转换为可分析的形式，通常是溶于有机溶剂中的溶液。该提取主要通过 QuEChERS 程序完成，并利用HPLC/三重四极杆质谱对最终提取物进行分析。虽然纯溶剂(如乙腈)中的样品提取物在 HPLC 中通常会影响早洗脱化合物的峰形，但是它们可直接用于 SFC 进样。 本应用简报介绍了在优化多农药标准品的 SFC 分离后，利用 SFC 与三重四极杆质谱检测复杂食品基质中的200多种残留农药。在植物食品样品的农药分析中，采用 SFC 作为质谱分析的前端分离技术的优势体现在分离速度、与液相色谱的正交选择性以及对样品前处理过程中所用有机溶剂的进样耐受性这几方面。展示了所选的各种化合物的检测限(LOD)、定量限(LOQ)、线性、保留时间和峰面积RSD 数据。 实验部分 仪器 所有实验均在 Agilent 1260 Infinity分析型 SFC 系统 (G4309A)上完成，该系统包括： Agilent 1260 Infinity SFC 控制模块 ( Agilent 1260 Infinity SFC 二元泵 ) ( Agilent 1260 Infinity 高性能脱 气机 ) ( Agilent 1260 Infinity SFC 自动进样器 ) ( Agilent 1290 Infinity 柱温箱 ) ( Agilent 1260 Infinity 二极管阵列 检测器，配备高压 SFC 流通池 ) ( Agilent 6460 三重四极杆液质联 用系统 (G6460C) ) ( Agilent 1260 Infinity 等度泵 (G1310B) ) 分流器套装(G4309-68715) 仪器设置 图1显示了 Agilent 1260 Infinity分析型 SFC 系统与 Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统的推荐配置。色谱柱直接连接至分流器组件，该分流器组件包含两个组合分流器、一个额外的单向阀用于防止 CO， 流回辅助泵以及一个溶剂过滤器。在第一个分流器处，来自等度泵的补偿流被引入流路中。该分流器通过内径为 0.12 mm的短毛细管连接至第二个分流器。在这里，液流被分为两部分，一部分进入质谱仪，另一部分进入 SFC 模块的反压调节器(BPR)。利用内径为 50 pm且长度为1m 的专用不锈钢毛细管实现与质谱仪的连接，该毛细管包含在分流器套装中。分流比取决于该限流毛细管产生的反压和 BPR 所设置的压力。通常， SFC 反压为 120 bar时，分流至离子源的 SFC 流量约0.45 mL/min， 反压为 200 bar 时，分流至离子源的流量约 0.6 mL/min。由于电喷雾质谱检测取决于浓度，因此对信号强度无影响。 ( 色谱 柱 ) ( Agilent ZORBAX NH2， 4.6×150 mm， 5pm(部件号883952-708) ) ( 软件 ) ( · 适用于三重四极杆质谱仪的 Agilent MassHunter 数据采集软件，06.00版，包括 SFC 附加软件 ) ( Agilent MassHunter 定性分析软 件，07.00版 ) ( Agilent MassHunter 定量分析软 件，07.00版 ) 利用安捷伦 LC/MS 农药全套测试混标(部件号5190-0551)作为混标。该混标包含八种子混合物，总共254种农药化合物。储备液中包含各自浓度为100 ppm 的农药。用乙腈将该储备液稀释为1 ppm 的工作储备液。 化学品 所有溶剂均为 LC/MS 级。乙醇购自德国 J.T. Baker 公司。新制超纯水产自配置 LC-Pak Polisher 和 0.22 um膜式终端过滤器 (Millipak) 的 Milli-QIntegral水纯化系统。 样品前处理 水果和蔬菜购自当地蔬菜水果店。根据官方的柠檬酸盐缓冲QuEChERS 方案， 使用 Agilent BondElut QuEChERS试剂盒(部件号5982-5650)萃取样品。称取10g均质样品至50mL聚丙烯管中，并加入10mL乙腈，用手剧烈振摇萃取1分钟。加入包含4g无水MgSO、1 g NaCl 和1.5g缓冲柠檬酸盐的萃取盐包后，将混合物再次振摇1分钟，然后以4000 rpm 的转速离心5分钟。 在相分离后，将6mL上层乙腈相转移至 Agilent BondElut QuEChERS EN 分散式 SPE 管(部件号5982-5056)，该管中包含用于样品净化的150mgN-丙基乙二胺 (PSA)以及用于除水的900 mg 无水MgSO4。将管密封，并再次振辰1分钟。然后， 以4000 rpm 的转速将管离心5分钟。将4mL最终提取物转移至干净的聚丙烯样品瓶中。为改善目标农药的稳定性，将 40 pL甲酸加入最终提取物中。 图1. Agilent 1260 Infinity 分析型 SFC 系统与 Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统的配置。色谱柱直接连接至分流器组件中的分流器1(BPR=反压调节器，不使用紫外检测器，分流器套装部件号 G4309-68715) SFC方法 改性剂 甲醇 BPR温度 60°℃ BPR压力 120 bar 柱温 40°℃ 进样量 5pL， 定量环过量填充3倍 参数 值 电离模式 正离子 毛细管电压 2500 V 喷嘴电压 2000 V 气体流速 8 L/min 气体温度 220°C 鞘气流速 12L/min 鞘气温度 380°℃ 雾化器压力 25 psi DMRM 条件见附录表1，其中显示了详细的保留时间、保留时间窗口、碎裂电压和碰撞能量 安捷伦 LC/MS 农药全套测试混标包含八种子混合物，其中每种子混合物各自包含约33种化合物。利用这些混合物开发并优化 SFC 分离方法。选择氨基固定相色谱柱是基于之前的多农药样品分析方法开发工作方面的经验。选择乙醇作为改性剂，是由于它的洗脱强度低于甲醇，能够实现更宽的洗脱范围。 在第一个实验中，采用陡峭的梯度(改性剂在10分钟内增加至50%)洗脱不同子混合物中的农药，以了解哪种农药能够通过所选的色谱柱固定相和改性剂组合洗脱。由于大多数化合物在 SFC 条件下的洗脱行为容易在有机改性剂(即使含量较低)中发生细微变化，因此还利用在10分钟内从2%增加至10%的梯度对子混合物进行测试。在这些条件下，195种化合物被洗脱下来。当改性剂在14分钟内增加至26%，然后在14.01分钟时增加至50%并在该浓度下保持至20分钟，另有28种化合物洗脱下来。总体而言，在混合物固有的254种化合 物中，223种化合物被洗脱下来并通过MRM 检出。在剩余的31种化合物中，有些化合物仅在负离子模式条件下电离，而其他化合物未洗脱得到良好的峰形，因为它们似乎不太适合所选的色谱柱固定相和改性剂组合。在该组化合物中，存在几种磺酰脲类除草剂化合物。为提高最终方法的灵敏度，将 MRM 方法转换为动态 MRM(DMRM)模式方法，其中采用两倍峰宽的窗口在各自的保留时间处对各种化合物进行测量。图2显示了在20分钟内分离223种化合物所得到的DMRM 色谱图。图3显示了化合物在整个分析时间内的分布。 图2.利用 DMRM 测量安捷伦 LC/MS 农药全套测试混标中的223种农药。采用2%-10%乙醇作为有机改性剂时，其中195种化合物在10分钟内从氨基固定相色谱柱上洗脱下来，而有机改性剂增加至50%时，另有28种化合物在20分钟内洗脱下来 图3.农药洗脱时间在总分析时间中的分布。第一个化合物在1.5分钟处被洗脱。68种化合物在前3分钟内洗脱下来，另外65种化合物在3分钟至5分钟之间洗脱下来，还有62种化合物在5分钟至10分钟之间洗脱下来。总体而言，采用2%-10%乙醇梯度时，195种化合物在10分钟内洗脱下来。洗脱广泛分布于前10分钟内 对于测量的全部223种农药，它们的LOQ分布如图4所示。共有102种农药的 LOQ为 0.5ppb (信噪比 (S/N) 大于10)，并有167 种农药的 LOQ为1 ppb 或更低。在223种化合物中，仅有7种农药的 LOQ 为低于10ppb。然而，所有农药的 LOD 均低于 10ppb，因此满足法规要求。在 LOQ 至最高100 ppb 的范围内，创建所有化合物的校准曲线。所有化合物均表现出R²=0.999或更出色的线性。图5显示了保留时间精密度的分布。在165种化合物中，大多数化合物的保留时间精密度优于1%RSD。图6显示了峰面积精密度的分布。总体而言，162种化合物的峰面积 RSD 低于5%，并且大多数化合物的 RSD 介于2%和5%之间。 图4.所检测的农药的 LOQ分布。102种农药的 LOQ 为 0.5 ppb且S/N>10，并且167种农药的LOQ 为 1 ppb 或更低。在223种农药化合物中，仅有七种化合物的 LOQ 为 10 ppb 图5.保留时间精密度的分布。有165种化合物的保留时间精密度低于1% RSD 图6.峰面积精密度的分布。有162种化合物的 RSD 低于5%，且大多数化合物的 RSD 介于2%和5%之间 作为示例，对图7所示的化合物予以更详细的讨论。第一个示例是环氧嘧磺隆。它属于磺酰脲类除草剂，并在SFC分析中表现出良好的色谱行为。最低的校准浓度为 10 ppb，计算得出的LOQ为 0.14 ppb， LOD 为 0.04 ppb，且线性为 R²=0.99993(图7A)。第二个示例是甲胺磷，其广泛用于保护水稻。它是一种高极性化合物，在反相HPLC分离中进样分析纯 QuEChERS 提取物时，由于洗脱较早，通常会观察到峰展宽。QuEChERS 样品前处理得到纯乙乙的最终提取物。与 HPLC 不同，该溶液可直接用于 SFC，且不影响峰形。在 SFC 条件下，该化合物在7.055分钟处洗脱。校准浓度为 10 ppb时的结果以及校准曲线如图7B 所示。计算得出的 LOQ 为 0.38 ppb， LOD 为0.13 ppb， 且线性为R*=0.99991。 作为实际样品的示例，根据先前文献所述的 QuEChERS 程序对草莓、苹果和番茄进行萃取，并直接进样分析所获得的乙腈提取物。在这部分实验中，在 10-100 ppb 的范围内对所有223种农药进行校准，其中 10 ppb值为法规规定的最高可接受的农药残留浓度。在测量的223种农药中，仅检出五种浓度接近 LOD 的农药：戊唑醇、三唑醇、氯虫苯甲酰胺、肟菌酯和啶酰菌胺。 图7.(A)环氧嘧磺隆，最低校准浓度为10 ppb， 且S/N=734.6， LOQ= 0.14 ppb， LOD= 0.05 ppb， 线性为 0.99993。(B)甲胺磷，最低校准浓度为10 ppb， 且 S/N=258.1， LOQ= 0.38 ppb， LOD=0.13 ppb， 线性为 0.99991 三唑醇是一种内吸性杀菌剂，主要用于防止锈病和白粉病，例如用于水果、葡萄和番茄。三唑醇是三唑酮的代谢物，但是其本身也可用作活性成分。通常，它与其他杀菌剂(如戊唑醇)结合使用。在番茄样品中，检测到低浓度的三唑醇(图8)。最低校准浓度为 10 ppb， 且 S/N=971.2，LOQ= 0.1 ppb， LOD= 0.03 ppb(图8A)。在番茄中检出的三唑醇残留浓度为1.36 ppb (图8B)。浓度为10、50和100 ppb 的三唑醇的校准曲线表现出良好的线性，R²=0.99929。在草莓样品中检出的另一种低浓度农药残留是啶酰菌胺。检测到它的浓度为 0.75ppb， 非常接近估算的LOD。啶酰菌胺广泛用作保护水果、蔬菜和酿酒葡萄的杀菌剂。根据美国国家环境保护局 (EPA)的简报，啶菌胺具有一定的致癌性，但是对人类的致癌性可能性较小。可接受的每日最大剂量为 0.04 mg/kg。然而，番茄中的三唑醇以及草莓中的啶酰菌胺的最小报告限值(MRL)明显较高(分别为1000 ppb 和 500 ppb)。这些示例展示了该方法用于分析复杂食品基质中的痕量残留农药的性能。 通过比较加标基质样品与标准品，对相应基质的影响进行了考察。大多数化合物的回收率处于70%-120%范围内，根据 SANCO 方法验证指南该范围是可接受的。这一点在之前的工作中也有介绍“。例如，对于草莓基质，在10 ppb的浓度下，所测量的223种化合物中有193种化合物的回收率处于70%-120%范围内(图9)。考虑到基质效应，可通过化合物添加进行基质校准，以进一步改善这些结果。此外，可采用标准加入法来补偿基质 图8.番茄中的三唑醇残留。A)最低校准浓度为 10 ppb， 且 S/N=971.2， LOQ= 0.1 ppb，LOD = 0.03 ppb。B)在番茄中检测到的三唑醇残留浓度为1.36 ppb。C)浓度为10、50和100 ppb的三唑醇的校准曲线 图9.农药回收率的分布。大多数化合物的回收率处于-30%至+20%的所需范围 图 10显示了苹果中肟菌酯的标准加入法结果，该结果使用 AgilentMassHunter 定量分析软件的内置功能计算得出。校准曲线中的方形符号对应于样品，而圆形符号示出各种加标浓度。虽然外部校准法得到的菌酯最终冬度为8.1 ppb， 但是标准加入法得到的浓度为 11.3 ppb。这表明基质抑制效应能够导致结果比实际值偏低近30%。对于苹果中的肟菌酯， MRL显著高于(700 ppb) 默认的 10 ppbMRL，因此不必报告 MRL 超出情况。 结论 本应用简报介绍了利用 SFC 与三重四极杆质谱联用开发用于测定223种农药化合物的多农药残留分析方法。在该方法中，将有机改性剂浓度在10分钟内由2%增加至10%，195种农药化合物中的大多数化合物均在10分钟内被洗脱。与常用的HPLC 方法相比，该方法通过聚焦这些农药，在测量相同数量的化合物时，能够大大缩短分析时间。测得的目标农药的典型LOQ等于或低于1 ppb， 并且校准线性优于R²=0.999。利用 SFC/MS能够直接从有机样品提取物中轻松分离并测定标准反相HPLC/MS 难以测定的极性农药化合物。基质效应与之前报道的结果处于相同范围内，并且建议使用基质校准或内标来补偿特定化合物的强基质效应。 图10.苹果中的肟菌酯残留。A)通过外部校准法检测到的番茄中的肟菌酯残留浓度为 8.1 ppb.B)肟菌酯的校准曲线，标准加入浓度为10、50和100 ppb。 采用此方法得到的结果为11.3 ppb ( 参考文献 ) 1. Regulation (EC) No 396/2005of the European Parliament andof the Council of 23 February2005 on maximum residue levelsof pesticides in or on food andfeed of plant and animal origin(including amendments as of 18March 2008) and complying withregulation (EC) 1107/2009 2. Naegele， E.， Analysis ofPesticides by SupercriticalFluid Chromatography/MassSpectrometry-Optimizing theAgilent 1260 Infinity AnalyticalSFC System in Combinationwith the Agilent 6460 Triple Quadrupole LC/MS (利用超临界流体色谱/质谱分析农药一优化Agilent 1260 Infinity 分析型 SFC系统与 Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统的组合)，安捷伦科技公司应用简报，出版号5991-5256EN， 2014 3. Naegele， E.， Glauner， T. 使用Agilent 1260 Infinity 分析型 SFC系统与三重四极杆质谱检测分析蔬菜样品中的农药，安捷伦科技公司应用简报，出版号5991-5443ZHCN， 2015 4. Anastassiades， M.， Lehotay， S.J.，Stajnbaher， D.， Schenk， F.J.， Fastand Easy Multiresidue MethodEmploying Acetonitrile Extraction/Partitioning and "DispersiveSolid-Phase Extraction" for ( the Determination of PesticideResidues in Produce， Journal of AOAC International， 2003， Vol. 86， No. 2，412-431 ) ( 5. United States Environmental Protection Agency： Pesticide Fact Sheet Boscali d ， 2006年7月， 最后更新日期2011年12月11日 ) 6. European Commission： Health &Consumer Protection Directorate-Safety of the Food Chain：Chemicals， Contaminates andPesticides.Guidance Documenton analytical quality controland validation proceduresfor pesticides residuesanalysis in food and feed.SANCO/12571/2013，rev.0 表1.测量的223种农药的动态 MRM 方法信息，包括保留时间、分子和碎片离子质量数以及碎裂电压、碰撞能量和碰撞池加速电压 保留时间 母离子 碎裂电压 子离子1 碰撞能量 子离子2 碰撞能量 碰撞池加速电压 编号 化合物名称 (min) (m/z) (V) (m/z) (V) (m/z) (V) (V) 1 虫螨畏 1.56 241 55 209.1 0 125.1 28 3 2 唑草酮 1.61 412 150 366 15 346.1 20 3 3 二甲戊乐灵 1.61 282.1 85 212.1 5 194.1 15 3 4 敌敌畏 1.62 220.9 100 109 12 79 24 4 5 草达灭 1.62 188.1 90 126 10 83.2 15 3 6 二嗪农 1.63 305.1 105 169 20 153.1 20 4 7 马拉硫磷 1.65 331 80 126.9 5 99 10 3 8 恶草酮 1.65 345 90 303 10 220 15 3 9 苄草丹 1.66 252.1 90 128.1 5 91.1 20 3 10 甲基嘧啶磷 1.67 306 130 164.2 20 108.1 30 3 11 辛硫磷 1.72 299.1 70 129.1 4 77.1 24 3 12 甲基立枯磷 1.76 300.9 115 269 10 125 15 3 13 联苯菊酯 1.78 440.2 100 181 5 4 13 联苯菊酯 1.78 442.2 100 一 181 5 4 14 乙硫磷 1.81 385 95 199 4 143 20 4 15 灭蚜磷 1.85 330 70 227 0 97.1 45 3 16 速灭磷 1.85 225 65 193.1 0 127 10 3 17 灭线磷 1.89 243 90 131 15 97 30 4 18 喹硫磷 1.89 299 90 163 20 147 20 7 19 甲基毒死蜱 1.90 322 110 290 10 125 25 4 20 稻丰散 1.90 321 75 247 79.1 48 3 表1.测量的223种农药的动态 MRM 方法信息，包括保留时间、分子和碎片离子质量数以及碎裂电压、碰撞能量和碰撞池加速电压(续) 保留时间 母离子 碎裂电压 子离子1 碰撞能量 子离子2 碰撞能量 碰撞池加速电压 编号 化合物名称 (min) (m/z) (V) (m/z) (V) (m/z) (V) (V) 21 克螨特 1.93 368.1 80 231.2 5 175.1 10 3 22 甜菜呋 1.97 287 80 259.1 0 121.1 10 3 23 异恶草松 1.98 240 70 125.1 15 89.1 45 3 24 乙氧喹 1.98 218 120 174 30 160 35 3 25 氟噻草胺 2.00 364 90 194.2 5 152.1 15 3 26 丙氧喹啉 2.03 372.9 85 331 12 289 24 3 27 异噁唑草酮 2.04 359.8 95 250.9 20 220 35 3 28 胺丙畏 2.05 282.1 125 156 10 138 15 3 29 三唑酮 2.06 294.1 90 197.1 10 69.1 20 3 30 异丙甲草胺 2.13 284.1 100 252.2 10 176.1 20 3 31 醚菌酯 2.14 314.1 85 267.1 0 222.2 10 3 32 丙溴磷 2.15 374.9 120 347 5 304.9 15 3 33 肟菌酯 2.19 409.1 110 186.1 10 145 45 3 34 马拉氧磷 2.20 315.1 85 127 4 99 20 3 35 吡氟草胺 2.21 395 150 266 25 246 40 3 36 杀扑磷 2.25 302.9 55 145 0 85.1 15 3 37 二甲草胺 2.26 256 120 224 10 148 25 3 38 醚菊酯 2.27 394.2 100 177.2 10 107.1 45 3 39 吡丙醚 2.28 322.1 110 185.1 20 96.1 10 3 40 丁硫克百威 2.30 381.1 105 160.1 8 118.1 16 3 41 呋线威 2.30 383.1 110 252.1 5 195.1 15 3 42 苯胺灵 2.33 180.1 60 138.1 4 120 12 3 43 喹氧灵 2.33 308 115 197 35 162 45 7 44 对甲抑菌灵 2.37 346.9 70 238.1 0 137 表1.测量的223种农药的动态 MRM 方法信息，包括保留时间、分子和碎片离子质量数以及碎裂电压、碰撞能量和碰撞池加速电压(续) 保留时间 母离子 碎裂电压 子离子1 碰撞能量 子离子2 碰撞能量 碰撞池加速电压 编号 化合物名称 (min) (m/z) (V) (m/z) (V) (m/z) (V) (V) 64 茚虫威 2.82 528 110 203 45 149.9 20 3 65 霜脲氰 2.83 199 50 128 0 111.1 15 3 66 噻嗪酮 2.85 306.1 105 201.2 5 116.1 10 3 67 草达津 2.95 230.1 105 202.1 15 99 25 3 68 乙嘧酚磺酸酯 2.97 317.1 125 166.1 20 108.1 25 4 69 亚胺硫磷 3.03 317.9 70 160 10 133 40 3 70 硫硅菌胺 3.03 268 135 252.1 5 139 15 3 71 嘧霉胺 3.05 200.1 120 107.1 20 82.1 25 3 72 苯螨特 3.08 364.1 80 198.1 4 104.9 20 3 73 涕灭威-碎片 3.16 116 70 89.1 4 70.1 4 3 74 四螨嗪 3.16 303 110 138 10 102.1 40 3 75 丙炔氟草胺 3.23 355.1 100 327.1 20 299 28 3 76 乙霉威 3.25 268.1 70 226 0 124 30 3 77 乙基谷硫磷 3.28 346.05 70 132 8 97 32 3 78 氟喹唑 3.28 376 120 349.1 16 307 24 4 79 苯氧威 3.29 302.1 90 116.1 5 88.1 15 3 80 氟环唑 3.34 330 100 121.1 20 101.1 45 4 81 氟醚唑 3.34 372 130 159 30 70.1 20 4 82 丁酮威 3.35 213 70 156.1 5 75 10 3 83 氟丁酰草胺 3.37 356 145 162.1 25 91 30 3 84 溴谷隆 3.37 259 120 170 15 148 10 3 85 戊菌唑 3.4 284 70 159 30 70.1 15 3 86 氟硅唑 3.42 316 120 247.2 15 165.1 25 4 87 猛杀威 3.42 208.1 80 151 0 109.1 表1.测量的223种农药的动态 MRM 方法信息，包括保留时间、分子和碎片离子质量数以及碎裂电压、碰撞能量和碰撞池加速电压(续) 保留时间 母离子 碎裂电压 子离子1 碰撞能量 子离子2 碰撞能量 碰撞池加速电压 编号 化合物名称 (min) (m/z) (V) (m/z) (V) (m/z) (V) (V) 107 丙森锌 3.74 321.1 80 203.1 0 119.1 20 3 108 混杀威 3.77 194.1 80 137 4 122.1 28 3 109 兹克威 3.82 223.1 110 166.1 12 151 24 3 110 阿扎康唑 3.83 300 130 230.8 16 158.9 32 3 111 残杀威 3.83 210.1 55 168.1 0 111.1 10 3 112 嘧菌胺 3.88 224 140 209.1 16 106.1 25 3 113 氰霜唑 3.89 325 90 261.1 5 108.1 10 3 114 糠菌唑 3.98 377.9 115 159 35 70.1 20 4 115 盖草津 4.10 272.2 140 198 24 169.9 28 3 116 克百威 4.11 222.1 80 165.1 5 123.1 20 3 117 噻唑隆 4.11 222 90 165 15 150 35 3 118 利谷隆 4.14 249 100 182.1 10 160 15 3 119 唑菌胺酯 4.18 388 95 194.1 5 163.1 20 3 120 苯醚甲环唑 4.20 406 120 337.1 15 251.1 25 3 121 密草通 4.24 226.2 100 170.1 16 67.9 50 3 122 灭害威 4.34 209.1 105 152 12 137.2 24 3 123 苯线磷 4.39 304.1 120 217.1 20 202 35 3 124 咪鲜胺 4.39 376 70 308 5 266 10 3 125 灭虫威 4.40 226.1 70 169.1 0 121.1 15 3 126 苯锈定 4.43 274 120 147 30 86 25 3 127 腈菌唑 4.50 289.1 110 125 35 70.1 15 3 128 烯草酮 4.67 360.1 100 268.2 10 164.1 15 3 129 抑霉唑 4.69 297 115 201 15 159 20 4 130 氟吡菌胺 4.72 382.9 110 172.9 25 144.9 表1.测量的223种农药的动态 MRM 方法信息，包括保留时间、分子和碎片离子质量数以及碎裂电压、碰撞能量和碰撞池加速电压(续) 保留时间 母离子 碎裂电压 子离子1 碰撞能量 子离子2 碰撞能量 碰撞池加速电压 编号 化合物名称 (min) (m/z) (V) (m/z) (V) (m/z) (V) (V) 150 粉唑醇 6.05 302 90 123 30 70.1 15 3 151 比锈灵 6.14 218.1 145 125 16 96.9 28 3 152 丁噻隆 6.18 229.1 105 172.1 12 116 24 3 153 氧化乐果 6.19 214 80 125 20 109 25 3 154 多杀菌素A 6.19 732.4 155 142.1 30 98.1 45 3 155 联苯酯 6.23 301.1 95 198.2 5 170.1 15 3 156 氯酚奴隆 6.23 510.9 138 158 20 141 45 3 157 叶菌唑 6.25 320.1 130 125.1 40 70.1 20 4 158 烯唑醇 6.27 326 75 159 28 70.1 28 4 159 多杀菌素D 6.30 746.5 145 142.1 35 98 55 3 160 双苯氟脲 6.31 493.1 90 158.1 20 141.1 45 3 161 吡喃草酮 6.33 342.1 130 250.2 10 166.1 20 3 162 环唑醇 6.36 292.1 100 125.1 35 70.1 15 3 163 烯效唑 6.36 292.1 135 125 36 70 24 4 164 种菌唑 6.39 334.1 115 125 45 70 25 4 165 乐果 6.41 230 70 199 0 125 20 3 166 棉铃威 6.45 400.1 130 238 4 91 50 3 167 双炔酰菌胺 6.52 411.9 110 356.1 5 328.1 10 3 168 甲萘威 6.54 202 65 145 0 127.1 25 3 169 除虫脲 6.55 311 80 158 10 141 35 3 170 氟虫脲 6.68 489 100 158 15 141 45 3 171 恶霜灵 6.88 279.1 70 219.1 5 132.1 35 3 172 灭菌唑 6.92 318.1 90 125.1 40 70.1 10 4 173 氟嘧菌酯 6.94 459 130 427.1 15 188.1 表1.测量的223种农药的动态 MRM 方法信息，包括保留时间、分子和碎片离子质量数以及碎裂电压、碰撞能量和碰撞池加速电压(续) 保留时间 母离子 碎裂电压 子离子1 碰撞能量 子离子2 碰撞能量 碰撞池加速电压 编号 化合物名称 (min) (m/z) (V) (m/z) (V) (m/z) (V) (V) 192 环草定 8.93 235.2 85 153.1 15 136 35 3 193 杀线威 9.17 237 60 90.1 0 72.1 15 3 194 氰氟虫腙 9.45 507 150 287.1 20 178.1 20 3 195 虫酰肼 9.45 353 95 297.2 0 133.1 15 3 196 莫西菌素 10.16 640.4 148 622.2 12 528.2 4 3 197 苯嗪草酮 10.18 203.1 100 175.1 15 104.1 20 3 198 非草隆 10.25 165.1 180 76.9 32 72 16 3 199 枯草隆 10.27 291 130 164 10 72.1 20 3 200 硫双威 10.28 355 82 108.1 10 88.1 10 3 201 甲氧虫酰肼 10.56 369.2 85 313.2 0 149.1 10 3 202 苯磺隆 11.08 396 110 181.1 15 155.1 5 3 203 噻菌灵 11.24 202 130 175.1 25 131.1 35 3 204 甜菜安 11.47 318.1 80 182.2 5 136.1 25 3 205 甜菜宁 11.47 318.1 90 168.1 4 136 20 3 206 霜霉威 11.88 189.1 90 144 5 102.1 15 3 207 赛唑隆 11.98 265.1 120 207.9 12 57 32 3 208 啶虫脒 12.06 223 80 126.1 2 90.1 35 3 209 氯虫苯甲酰胺 12.31 483.9 105 452.9 15 285.9 10 3 210 麦穗宁 12.34 185.1 145 157.1 20 156.1 30 3 211 环酰菌胺 12.56 302 130 97.2 20 55.1 40 3 212 吡蚜酮 12.84 218 110 105.1 20 78.1 45 3 213 乙菌定 12.87 210.1 145 140.1 20 98.1 25 3 214 氟蚁腙 12.99 495.2 200 323 36 170.9 48 3 215 吡虫啉 13.48 256 80 209.1 10 175.1 查找当地的安捷伦客户中心：www.agilent.com/chem/contactus-cn 免费专线： 800-820-3278，400-820-3278(手机用户) 联系我们： LSCA-China_800@agilent.com 在线询价： www.agilent.com/chem/erfq-cn www.agilent.com 本文中的信息、说明和指标如有变更，恕不另行通知。 @ 安捷伦科技(中国)有限公司，2017 2017年10月15日， 中国出版 5991-6151ZHCN Agilent Technologies 本应用介绍了利用 SFC 与三重四极杆质谱联用开发用于测定 223 种农药化合物的多农药残留分析方法。在该方法中，将有机改性剂浓度在 10 分钟内由 2% 增加至 10%，195 种农药化合物中的大多数化合物均在 10 分钟内被洗脱。与常用的 HPLC 方法相比，该方法通过聚焦这些农药，在测量相同数量的化合物时，能够大大缩短分析时间。测得的目标农药的典型LOQ 等于或低于 1 ppb，并且校准线性优于 R2 = 0.999。利用 SFC/MS 能够直接从有机样品提取物中轻松分离并测定标准反相 HPLC/MS 难以测定的极性农药化合物。基质效应与之前报道的结果处于相同范围内，并且建议使用基质校准或内标来补偿特定化合物的强基质效应。